超声波辅助酶法提取肠激酶工艺制造技术

本发明专利技术公开了生物制药和基础科研领域的一种超声波辅助酶法提取肠激酶工艺。本发明专利技术公开的新型重组鳉鱼肠激酶轻链可以通过简单的分离纯化步骤得到，通过简单的复性和纯化，获得快速、简便、稳定、高活性、高特异性的重组鳉鱼肠激酶轻链蛋白。该酶适用于生物制药工程、基因工程、生物化学和分子生物学等领域的而研究和应用。

Ultrasonic assisted enzymatic extraction of intestinal kinase

The invention discloses an ultrasonic assisted enzymatic extraction method of intestinal kinase technology in biological pharmacy and basic scientific research field. The invention discloses a novel recombinant medaka fish light chain kinase can be obtained by simple separation and purification, renaturation and purification by simple, recombinant medaka fish light chain protein kinase is rapid and simple, stable, high activity and high specificity. The enzyme is suitable for research and application in the fields of biopharmaceutical engineering, gene engineering, biochemistry and molecular biology.

【技术实现步骤摘要】
超声波辅助酶法提取肠激酶工艺
本专利技术属于生物
的一种超声波辅助酶法提取肠激酶工艺。
技术介绍
外源蛋白的表达方式可分为直接表达和融合表达两种，其中利用融合表达方式往往能实现外源目的蛋白的高效表达，且利于分离纯化。但有时目的蛋白不能以融合蛋白的形式被使用，因此需要在目的蛋白和标签蛋白之间设计特异的蛋白酶酶切位点，利用独特的蛋白酶切割，才能得到完整的目的蛋白。目前常见的工具蛋白酶有肠激酶，Xa因子或凝血酶等，其中肠激酶由于其能完全去除目的蛋白的N端序列，而最常被使用。（Gasparian,M.etal.Expression,purification,andcharacterizationofhumanenteropeptidasecatalyticsubunitinEscherichiacoli.ProteinExprPurif.2003,31(1),133-9）。肠激酶（Enteropeptidase，EP或ENterokinase，EK，EC3.4.21.9）是存在于脊椎动物十二指肠内的一种异源二聚体（heterodimeric）丝氨酸蛋白酶。分子量为150KDa，由1条1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种超声波辅助酶法提取肠激酶工艺，其特征在于：用超声波辅助酶法提取肠激酶，具有 SEQ ID NO ：2 所示的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种超声波辅助酶法提取肠激酶工艺，其特征在于：用超声波辅助酶法提取肠激酶，具有SEQIDNO：2所示的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的超声波辅助酶法提取肠激酶工艺，其特征在于：所述SEQIDNO：1的氨基酸序列含有核酸分子和所述核酸分子的序列操作性相连的表达调控序列，其中载体为含有T7启动子的载体。3.根据权利要求2所述的超声波辅助酶法提取肠激酶工艺，其特征在于：所述的载体为PET32。4.根据权利要求2所述的超声波辅助酶法提取肠激酶工艺，其特征在于：所述的载体为一种宿主细胞，为原核细胞。5.根据权利要求4所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：费苹，陈银芳，费正明，陈明全，
申请(专利权)人：如皋市永兴肠衣有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32