The invention discloses a method for purifying hydrophilic polypeptides, belonging to the field of protein and polypeptide purification. The present invention mainly solves the technical problem that the conventional HPLC is hardly reserved at the time when HPLC is used for separating small molecular polypeptides, and the separation and purification of the latter are difficult. The polypeptide sample is separated and purified by gel chromatography and amino column reversed phase chromatography in two steps so as to realize the separation of the final product and obtain the peptide with high purity. The method has good separation effect and high efficiency.
【技术实现步骤摘要】
一种亲水性多肽纯化的方法
本专利技术公开了一种亲水性多肽纯化的方法，属于蛋白质与多肽纯化领域。
技术介绍
所谓多肽，它是分子结构介于氨基酸和蛋白质之间的一种化合物。它由氨基酸构成，但与蛋白质又有所不同，属于它们之间的中间物质。氨基酸能够彼此以肽键相互连接的化合物称作肽。一种肽含有的氨基酸少于10个就被称为寡肽，超过的就称为多肽，氨基酸为50多个以上的多肽称为蛋白质。多肽生物活性高，它能调节各种生理活动和生化反应。到现在，人们已发现和分离出100多种存在于人体的肽，对于多肽的研究和利用，在世界范围内已经出现了一个空前的繁荣景象。近几十年来，对于多肽的研究取得了突飞猛进的发展，现在的科学家已经对多肽有了清醒的认识。多肽对人体具有非常重要的不可替代的调节作用，这种作用几乎涉及到人体的所有生理活动。在进行普通药物动力学研究中，HPLC是技术成熟，应用广泛的分析手段。在蛋白多肽药物的实验研究或产业化中，HPLC都是主要的分离纯化工具。但鉴于蛋白多肽药物结构的特殊性，特别一些小分子多肽。由于序列短而且很多亲水性氨基酸，所以在常规HPLC上几乎没有保留，对后期的分离纯化造成一定...
【技术保护点】
一种亲水性多肽纯化的方法，其特征在于包括以下步骤：第一次凝胶色谱纯化步骤：（1）将多肽样品加纯入水中超声搅拌溶解直至澄清，用微孔滤膜过滤；（2）将多肽样品加入到预装好的凝胶柱中，上样量为1‑5倍柱床体积；（3）加入无盐水作为洗脱液，设置合适的流速洗脱分离样品；（4）样品纯度大于90%的收集在一起放置；第二次氨基柱纯化步骤：（1）将上述收集的样品上样至反相色谱系统，洗脱流动相A相为磷酸缓冲液，流动相B相为乙腈；（2）设置洗脱梯度、流速及检测波长；（3）收集目标馏分；（4）将收集馏分冻干称重。
【技术特征摘要】
1.一种亲水性多肽纯化的方法，其特征在于包括以下步骤：第一次凝胶色谱纯化步骤：（1）将多肽样品加纯入水中超声搅拌溶解直至澄清，用微孔滤膜过滤；（2）将多肽样品加入到预装好的凝胶柱中，上样量为1-5倍柱床体积；（3）加入无盐水作为洗脱液，设置合适的流速洗脱分离样品；（4）样品纯度大于90%的收集在一起放置；第二次氨基柱纯化步骤：（1）将上述收集的样品上样至反相色谱系统，洗脱流动相A相为磷酸缓冲液，流动相B相为乙腈；（2）设置洗脱梯度、流速及检测波长；（3）收集目标馏分；（4）将收集馏分冻干称重。2.根据权利要求1所述一种亲...
【专利技术属性】
技术研发人员：徐红岩，秦敬国，
申请(专利权)人：吉尔生化上海有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31
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