氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品及其制备方法技术

本发明专利技术公开了氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品及其制备方法，干血斑质控品由氨基酸标准品、酰基肉碱标准品、红细胞组成，氨基酸标准品共有8种，酰基肉碱标准品共有15种。本发明专利技术的氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品大幅减少了标准品的使用，稳定性、均一性都符合要求，氨基酸与酰基肉碱干血斑质控在‑20℃的条件下可保存4个月以上。制备方法成本低，操作简单，能够较大量的进行配制，使用周期较长，不需频繁更换质控批号，方便日常质控分析，从而满足临床和日常检测对质控品的需求。

【技术实现步骤摘要】
氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品及其制备方法
本专利技术涉及一种检测用质控品及其配制方法，特别涉及氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品及其制备方法。
技术介绍
遗传代谢病是指由于基因突变使合成的酶、受体、载体等蛋白功能缺陷，导致体内生化物质在合成、代谢、转运和储存等方面出现各种异常。它属于单基因遗传病的一部分，绝大多数属常染色体隐性遗传，少数为常染色体显性遗传、X连锁伴性遗传，或者线粒体遗传；遗传代谢病病种繁多，常见500-600种，总数可能达数千余种；单病发病率低，但总体发病率较高，有报道患病率在0.5％以上。新生儿疾病筛查是预防出生缺陷行之有效的三级预防措施，对提高出生人口素质有着重要的意义。串联质谱检测的遗传代谢病项目在2分钟内可检测18种氨基酸和45种酰基肉碱，上述遗传代谢病可检测超过45种遗传代谢病，目前已广泛应用于各种高端实验室，可更有效、更早地检出遗传性代谢性疾病，为针对性治疗提供有效依据。随着该技术越来越多地应用于临床的辅助诊断，体内氨基酸和酰基肉碱测定的准确性显得越来越重要。质控品是专门用于室内质量控制的、稳定的、与待测样品近似的材料，是保证准确测定的重要基础，并可对方法稳定性进行一个长期有效的监控，随着串联质谱检测越来越多地应用于临床的辅助诊断，相关质控品的需求量也逐渐增大。由于串联质谱一次检测的化合物种类繁多，一般而言，为保证其质控效果，其质控品中也需要添加多种组分，而因为各组分的特性不同，难以制备得到均一稳定的质控品。因此，目前，商品化氨基酸和酰基肉碱干血斑质控品来源少，且产品价格昂贵，到货周期长，同一批号无稳定性来源。因此，研发稳定性、均一性都符合要求的质控品制备方法具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种成份相对简单、稳定性、均一性均符合要求的氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品及其制备方法。本专利技术所采取的技术方案是：一种氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品，主要由氨基酸标准品、酰基肉碱标准品和红细胞干固于载体上形成，其中，氨基酸标准品包括丙氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、瓜氨酸、精氨酸、酪氨酸共8种氨基酸。作为上述氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品的进一步改进，酰基肉碱标准品包括游离肉碱、乙酰肉碱、丙酰肉碱、丁酰肉碱、异戊酰肉碱、己酰肉碱、辛酰肉碱、葵酰肉碱、月桂酰肉碱、肉豆蔻酰肉碱、棕榈酰肉碱、十八碳酰肉碱、3-羟基异戊酰肉碱、戊二酰肉碱、丙二酰肉碱共15种酰基肉碱。作为上述氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品的进一步改进，质控品中各氨基酸按照以下述终摩尔比配合：作为上述氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品的进一步改进，质控品中各酰基肉碱按下述终摩尔比配合：作为上述氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品的进一步改进，载体为滤纸。滤纸可以是国际903滤纸片等本领域常用的滤纸。一种上述的氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品的制备方法，包括如下步骤：1)制备红细胞液：收集健康人源全血，分离得到红细胞，用生理盐水调整红细胞比容至预定值，得到红细胞液，并测定其中各氨基酸和酰基肉碱本底值；2)制备标准溶液：使用水性溶剂将氨基酸和/或水溶性酰基肉碱溶解；使用醇类溶剂溶解脂溶性酰基肉碱，得到氨基酸标准溶液和/或酰基肉碱标准溶液；3)制备血斑质控品：在上述红细胞液中添加氨基酸标准溶液和/或酰基肉碱标准溶液至设定值，得到工作液；取上述工作液滴加在载体上，干燥得到氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品。作为上述制备方法的进一步改进，水性溶剂为生理盐水，所述氨基酸为：丙氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、瓜氨酸、精氨酸、亮氨酸和酪氨酸；所述水溶性酰基肉碱为：游离肉碱、乙酰肉碱、丙酰肉碱、丁酰肉碱、异戊酰肉碱、己酰肉碱、辛酰肉碱、葵酰肉碱、3-羟基异戊酰肉碱、戊二酰肉碱和丙二酰肉碱；醇类溶剂为甲醇，所述脂溶性酰基肉碱为：月桂酰肉碱、肉豆蔻酰肉碱、棕榈酰肉碱、十八碳酰肉碱。作为上述制备方法的进一步改进，制备红细胞液步骤中，红细胞比容的预定值为45～55％。作为上述制备方法的进一步改进，工作液中，各氨基酸的浓度分别为：丙氨酸350～650μM、苯丙氨酸120～300μM、亮氨酸150～450μM、甲硫氨酸50～170μM、缬氨酸200～400μM、瓜氨酸40～150μM、精氨酸60～200μM、酪氨酸180～370μM；各酰基肉碱的浓度分别为：游离肉碱30～70μM、乙酰肉碱20～40μM、丙酰肉碱5～12μM、丁酰肉碱1～3.5μM、异戊酰肉碱0.5～2.0μM、己酰肉碱0.4～1.2μM、辛酰肉碱0.4～1.2μM、葵酰肉碱0.4～1.2μM、月桂酰肉碱0.3～1.0μM、肉豆蔻酰肉碱0.4～1.4μM、棕榈酰肉碱4.0～12.0μM、十八碳酰肉碱1.5～6.0μM、3-羟基异戊酰肉碱0.4～1.2μM、戊二酰肉碱1.0～3.0μM、丙二酰肉碱0.2～1.0μM。作为上述制备方法的进一步改进，制备血斑质控品步骤中，取70～100μL工作液滴加在载体上。本专利技术的有益效果是：本专利技术的氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品，通过精心设计组份，综合考虑检测方法的特点和18种氨基酸与45种酰基肉碱检测指标的重要性之后选出，最具代表性，在大幅减少标准品使用的情况下，获得了稳定性、均一性都符合要求的氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品。并且，该质控指标的浓度也是非常关键的，同样是综合考虑检测方法的特点和各检测指标的特点之后选出，具有最佳的代表性和稳定性。该质控品制备方法成本低，操作简单，能够较大量的进行配制，使用周期较长，不需频繁更换质控批号，方便日常质控分析，从而满足临床和日常检测对质控品的需求。采用本专利技术提供的制备方法制得的氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品在-20℃的条件下可保存4个月以上，从-20℃条件取出恢复常温后的均一性、稳定性都能符合质控品要求。具体实施方式一种氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品，主要由氨基酸标准品、酰基肉碱标准品和红细胞干固于载体上形成，其中，氨基酸标准品包括丙氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、瓜氨酸、精氨酸、酪氨酸共8种氨基酸。作为上述氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品的进一步改进，酰基肉碱标准品包括游离肉碱、乙酰肉碱、丙酰肉碱、丁酰肉碱、异戊酰肉碱、己酰肉碱、辛酰肉碱、葵酰肉碱、月桂酰肉碱、肉豆蔻酰肉碱、棕榈酰肉碱、十八碳酰肉碱、3-羟基异戊酰肉碱、戊二酰肉碱、丙二酰肉碱共15种酰基肉碱。作为上述氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品的进一步改进，质控品中各氨基酸按照以下述终摩尔比配合：作为上述氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品的进一步改进，质控品中各酰基肉碱按下述终摩尔比配合：作为上述氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品的进一步改进，载体为滤纸。滤纸可以是国际903滤纸片等本领域常用的滤纸。一种上述的氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品的制备方法，包括如下步骤：1)制备红细胞液：收集健康人源全血，分离得到红细胞，用生理盐水调整红细胞比容至预定值，得到红细胞液，并测定其中各氨基酸和酰基肉碱本底值；2)制备标准溶液：使用水性溶剂将氨基酸和/或水溶性酰基肉碱溶解；使用醇类溶剂溶解脂溶性酰基肉碱，得到氨基酸标准溶液和/或酰基肉碱标准溶液；3)制备血斑质控品：在上述红细胞液中添加氨基酸标准溶液和/或酰基肉碱标准溶液至设定值，得到工作液；取上述工作液滴加在载体上，干燥得到氨基酸与酰基肉碱干血本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品，主要由氨基酸标准品、酰基肉碱标准品和红细胞干固于载体上形成，其中，所述氨基酸标准品包括丙氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、瓜氨酸、精氨酸、酪氨酸共8种氨基酸。

【技术特征摘要】
1.一种氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品，主要由氨基酸标准品、酰基肉碱标准品和红细胞干固于载体上形成，其中，所述氨基酸标准品包括丙氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、瓜氨酸、精氨酸、酪氨酸共8种氨基酸。2.根据权利要求1所述的氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品，其特征在于：所述酰基肉碱标准品包括游离肉碱、乙酰肉碱、丙酰肉碱、丁酰肉碱、异戊酰肉碱、己酰肉碱、辛酰肉碱、葵酰肉碱、月桂酰肉碱、肉豆蔻酰肉碱、棕榈酰肉碱、十八碳酰肉碱、3-羟基异戊酰肉碱、戊二酰肉碱、丙二酰肉碱共15种酰基肉碱。3.根据权利要求1或2所述的氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品，其特征在于：所述质控品中各氨基酸按照以下述终摩尔比配合：4.根据权利要求3所述的氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品，其特征在于：质控品中各酰基肉碱按下述终摩尔比配合：5.根据权利要求1或2所述的氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品，其特征在于：所述载体为滤纸。6.一种权利要求1-5任一项所述的氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品的制备方法，包括如下步骤：1)制备红细胞液：收集健康人源全血，分离得到红细胞，用生理盐水调整红细胞比容至预定值，得到红细胞液，并测定其中各氨基酸和酰基肉碱本底值；2)制备标准溶液：使用水性溶剂将氨基酸和/或水溶性酰基肉碱溶解；使用醇类溶剂溶解脂溶性酰基肉碱，得到氨基酸标准溶液和/或酰基肉碱标准溶液；3)制备血斑质控品：在上述红细胞液中添加氨基酸标准溶液和/或酰基肉碱标准溶液至设定值，得到工作液；取上述工作液滴加在载体上，干燥得到氨基酸与酰基肉碱干血斑质控品。7.根据权利要求6所述的制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈秀如，佘旭辉，赵蓓蓓，程雅婷，韦兰清，李卓阳，倪周，吴婉琼，邓珍容，陈静宜，欧婷，
申请(专利权)人：广州金域医学检验中心有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44