凝结芽孢杆菌在制备预防或治疗慢性疲劳综合征制剂中的应用制造技术

本发明专利技术公开了凝结芽孢杆菌在制备预防或治疗慢性疲劳综合征制剂中的应用，具体是用凝结芽孢杆菌预防或治疗慢性疲劳综合征。

Application of Bacillus subtilis in preparing or preventing or treating chronic fatigue syndrome preparation

The invention discloses the application of Bacillus subtilis in preparing or preventing or treating chronic fatigue syndrome preparation, in particular to prevent or treat chronic fatigue syndrome by Bacillus subtilis.

【技术实现步骤摘要】
凝结芽孢杆菌在制备预防或治疗慢性疲劳综合征制剂中的应用
本专利技术涉及凝结芽孢杆菌在制备预防或治疗慢性疲劳综合征制剂中的应用，具体是用凝结芽孢杆菌预防或治疗慢性疲劳综合征。
技术介绍
慢性疲劳综合征(CFS)是机体躯体及精神上长期过度消耗不能缓解，以反复出现、不易消除的严重功能紊乱为特征的疾病。该病对患者的记忆力、注意力、工作、教育和个人活动带来严重的影响。随着现代生活节奏的加快，CFS的发病率呈现上升趋势。据美国疾病控制中心(CDC)预测：慢性疲劳已成为21世纪影响人类健康的主要疾病之一，我国该病的发病率也正逐年上升，涉及我国城市人口的10％—25％，且女性高于男性，高发年龄段为31-50岁，严重危害着国人的健康。由于CFS病因不明，目前尚无特效治疗方法。目前，慢性疲劳综合征的药物治疗以缓解临床症状为主。由于患者对很多药物都表现出高度敏感性，特别是影响中枢神经系统的药物，因此，一般治疗策略是从小剂量开始，逐步加量，此外还需慎用可引起疲劳副反应的药物。药物治疗仅缓解症状，并不能有效的治疗疾病，且所用药物长期服用会产生多种毒副作用。本专利技术人经过研究发现，凝结芽孢杆菌能够有效预防或治疗慢性疲劳综合征，安全没有任何毒副作用，效果优于双歧杆菌，且未见相关研究报道，特申请此专利技术专利。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种能预防或治疗慢性疲劳综合征的制剂，该制剂由凝结芽孢杆菌制成。本专利技术的制剂的制备优选是通过下述步骤实施的，但不局限于此制备工艺，公知的能实现的制备工艺均可以：采取可能含凝结芽孢杆菌的样品，然后将样品置于灭菌瓶内，研究时从中取一定量的样品加入18mL灭菌的稀释液中，充分混匀，在无菌操作台内，进行10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7梯度稀释，取10-5、10-6、10-7三个稀释梯度，分别涂布于凝结芽孢杆菌选择性单菌落分离固体培养基上，置于培养箱，37℃下培养48小时，选择长势良好的单菌落分别接种于液体扩增培养基中，置于培养箱内，37℃下扩增培养48小时。将所得培养液离心(12000rpm)分离出菌体后，将菌体冷冻真空干燥，调制出干燥菌粉，然后根据《伯杰细菌鉴定手册》、相关细菌鉴定文献或16SrRNA序列对比分析进行凝结芽孢杆菌鉴定和毒性试验，将无毒性的凝结芽孢杆菌干燥菌粉按需要比例添加辅料制成片剂、胶囊、散剂、粉剂或液体制剂等各种剂型，也可加入其他活菌或低聚果糖等低聚糖起到协同作用。凝结芽孢杆菌选择性单菌落分离固体培养基优选但不局限于：纯化水1000mL，蛋白胨10g，牛肉浸取物10g，柠檬酸二铵2g，乙酸钠5g，酵母粉5g，葡萄糖5g，磷酸二氢钾2g，吐温801.0ml，碳酸钙20g，硫酸镁0.58g，硫酸锰0.25g，琼脂15g，调pH6.2-6.5，115℃高压灭菌20min。凝结芽孢杆菌液体扩增培养基优选但不局限于：纯化水1000mL，蛋白胨10g，牛肉浸取物3g，氯化钠5g，葡萄糖5g，调pH7，115℃高压灭菌20min。为进一步具体说明本专利技术，专利技术人利用上述方法通过凝结芽孢杆菌选择性单菌落分离固体培养基分离鉴定出了无毒性的凝结芽孢杆菌，本专利技术所述凝结芽孢杆菌并不局限于为说明本专利技术所述的菌，只要无毒性的凝结芽孢杆菌均是本专利技术所述，均在本专利技术的保护范围内。本专利技术所述凝结芽孢杆菌优选但不限于凝结芽孢杆菌TBC169保藏编号CGMCCNo.1207或凝结芽孢杆菌保藏编号CGMCCNo.1.2407。本专利技术实施说明中优选使用的凝结芽孢杆菌的细菌学性质：1、为说明本专利技术，本专利技术利用上述方法分离的凝结芽孢杆菌为凝结芽孢杆菌TBC169保藏编号CGMCCNo.1207。2、菌落形态显微镜观察：杆状，革兰氏染色阳性。平板形态：菌落呈白色、圆形、边缘整齐、大小2-3mm。3、生理生化鉴定明胶液化：－；过氧化氢酶：+；VP试验：+；苯丙氨酸脱氨酶试验－。4、糖酵解实验鉴定葡萄糖：+；麦芽糖：+；蔗糖：+；木糖：－；果糖：+；鼠李糖：－；乳糖：+；菊粉：+；半乳糖：+；糊精：+。5、分离的菌进行16SrRNA基因测序，测得序列用BLAST与GenBank和RDP数据库中的基因序列进行相似性分析，确定分离的菌为凝结芽孢杆菌。本专利技术所述的凝结芽孢杆菌指活的生物个体。本专利技术是以有效剂量按上述方法分离的凝结芽孢杆菌作为主要活性成份，按照一定的制剂工艺，加入常规的赋形剂、调味剂、崩解剂、防腐剂、润滑剂、湿润剂、黏合剂、溶剂、增稠剂、增溶剂等辅料，制成任何一种适合于使用的剂型，如片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、液体制剂、粉剂等剂型。本专利技术所述凝结芽孢杆菌作为主要药物活性成份制成活菌制剂。本专利技术所指有效剂量是指按上述方法分离的凝结芽孢杆菌根据上面所述单独或组合作为主要药物活性成份制成的固体活菌制剂包含的总活菌数不能低于1×106CFU/g，一般在1×107CFU/g以上，最高可达到1×1012CFU/g或1×1012CFU/g以上。本专利技术所指有效剂量是指按上述方法分离的凝结芽孢杆菌根据上面所述单独或组合作为主要药物活性成份制成的液体活菌制剂包含的总活菌数不能低于1×106CFU/mL，一般在1×107CFU/mL以上，最高可达到1×1012CFU/mL或1×1012CFU/mL以上。本专利技术所述制剂包括凝结芽孢杆菌单独应用或与其他药物联合应用，尤其包括凝结芽孢杆菌单独应用或与双歧杆菌联合应用。本专利技术所述双歧杆菌指活的生物个体。本专利技术所述双歧杆菌联合应用的制剂中，固体制剂包含的双歧杆菌总活菌数不低于1×106CFU/g，一般在1×107CFU/g以上，最高可达到1×1012CFU/g或1×1012CFU/g以上；或液体制剂包含的双歧杆菌总活菌数不低于1×106CFU/mL，一般在1×107CFU/mL以上，最高可达到1×1012CFU/mL或1×1012CFU/mL以上。由于本专利技术首次公开了凝结芽孢杆菌作为主要活性成份制成制剂在预防或治疗慢性疲劳综合征中的应用，因此含上述凝结芽孢杆菌的制剂在预防或治疗慢性疲劳综合征制剂中的应用均属于本专利技术的保护范围。本专利技术所述的凝结芽孢杆菌在制成任何一种剂型时，均具有预防或治疗慢性疲劳综合征的作用。如果其组份中含有凝结芽孢杆菌成份制备成制剂，在其包装或说明书等标识上或者在其他任何宣传品上只要注明或提示具有预防或治疗慢性疲劳综合征的作用，则落入本专利技术的保护范围之内。本专利技术所述的凝结芽孢杆菌可以制成药品、保健食品、食品或饮品等。具体实施方式制备例说明：上述已经对凝结芽孢杆菌制剂的制备进行说明，这里通过凝结芽孢杆菌TBC169保藏编号CGMCCNo.1207或凝结芽孢杆菌保藏编号CGMCCNo.1.2407(凝结芽孢杆菌保藏编号CGMCCNo.1.2407购自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心)为例进行具体说明，其他凝结芽孢杆菌菌种制剂的制备方法本领域技术人员通过本实施例很容易掌握，其他剂型的制备方法本领域技术人员通过本实施很容易掌握，在此不再一一叙述说明。制备方法并不局限于本专利技术实施例所述，公知的能够达到制备目的的方法均可以，实施例的制备说明只是对本专利技术的说明，并不是对本专利技术保护范围的限制。制备实施例1凝结芽孢杆菌粉剂的制备1菌粉的制备和菌种的鉴定采取人的本文档来自技高网...

【技术保护点】
凝结芽孢杆菌在制备预防或治疗慢性疲劳综合征制剂中的应用。

【技术特征摘要】
1.凝结芽孢杆菌在制备预防或治疗慢性疲劳综合征制剂中的应用。2.按权利要求1所述应用，其特征在于所述制剂包括凝结芽孢杆菌单独应用或与其他药物联合应用。3.按权利要求1所述应用，其特征在于所述制剂包括药品、保健食品、食品、饮品。4.按权利要求1所述应用，其特征在于所述凝结芽孢杆菌指活的生物个体。5.按权利要求1所述应用，其特征在于所述凝结芽孢杆菌包括凝结芽孢杆菌TBC169保藏编号CGMCCNo.1207或凝结芽孢杆菌保藏编号CGMCCNo.1.2407。6.按权利要求2所述应用，其特征在于所述制剂包括凝结芽孢杆菌单独应用或与双歧杆菌联合应用。7.按权利要求6所述应用，其特征在于所述双歧杆菌指活的生物个体。8.按权利要求1所述制剂，其特征在于固体制剂包含...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔云龙，赵婀姿，李洪福，
申请(专利权)人：青岛东海药业有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37