一株具有鼠伤寒沙门氏菌防治效果的噬菌体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株具有鼠伤寒沙门氏菌防治效果的噬菌体，所述噬菌体的分类命名为鼠伤寒沙门氏菌噬菌体（

【技术实现步骤摘要】
一株具有鼠伤寒沙门氏菌防治效果的噬菌体及其应用
本专利技术涉及生物工程
，具体涉及一株具有鼠伤寒沙门氏菌防治效果的噬菌体及其应用。
技术介绍
鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)是一群非适应性或泛嗜性的沙门氏菌，具有广泛的宿主，是目前世界各国分离率最高的菌型之一。能引起各种家禽、犬、猫的副伤寒，表现为胃肠炎或败血症；在牛、羊和马中引起流产和急性胃肠炎；也可引起人类食物中毒。目前世界上最大的一起沙门氏菌食物中毒是1953年于瑞典由猪肉中的沙门氏菌引起的，造成7717人中毒，90人死亡。因此，对鼠伤寒沙门氏菌进行防治具有重要的公共卫生意义。目前，预防和控制鼠伤寒沙门氏菌最常用的方法是使用抗生素，但是随着抗生素的滥用，鼠伤寒沙门氏菌的耐药性不断增强，已成为严重的公共卫生问题。因此，亟需研究开发一种新型的产品，以解决抗生素滥用导致的细菌耐药性增强问题。噬菌体是一类细菌性病毒，其中裂解性噬菌体在感染宿主菌后能快速复制、增殖，并最终裂解细菌从而达到抗菌效果。早在1917年，法裔加拿大微生物学家FelixdHerelle首次发现噬菌体后，科学界就一直尝试将其用于治疗人或动物的细菌性感染；2013年2月由美国Intralytix公司研发的针对沙门菌的噬菌体制剂SalmoFreshTM被美国食品药品监督管理局(FDA)认定为公认安全级产品(GRAS)，并获批准上市。随着经济发展和人们对动物性食品安全问题广泛关注，噬菌体作为一种天然绿色、安全有效的抗生素替代品，具有广阔的应用前景。然而，大多数噬菌体生物控制研究集中在大肠杆菌、李斯特氏菌和梭菌的控制上，而针对鼠伤寒沙门氏菌能够进行特异性防治的噬菌体的相关报道较少。因此，开发新型对鼠伤寒沙门氏菌具有防治效果的噬菌体具有十分重要的意义。
技术实现思路
针对上述现有技术，本专利技术的目的是提供一株具有鼠伤寒沙门氏菌防治效果的噬菌体。本专利技术的另一目的是提供该噬菌体在杀灭畜禽体内、畜禽体表、畜禽饲料、养殖器具或养殖空间环境中的鼠伤寒沙门氏菌中的用途。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术的第一方面，提供一株具有鼠伤寒沙门氏菌防治效果的噬菌体，所述噬菌体的分类命名为鼠伤寒沙门氏菌噬菌体(Salmonellatyphimuriumphage)ΦSa-1，已于2017年4月28日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCM2017217，地址：中国武汉，武汉大学。本专利技术的噬菌体分离自粪液污水，噬菌体的形态特征为：该噬菌体具有呈正多面体的头部结构，没有尾部，头部直径约65nm，应属于复层噬菌体科(Tectiviridae)；噬菌体株在固体培养基上可以形成较大空斑，周围有晕环，边缘清晰规则，直径为2～3mm。上述的噬菌体在制备用于预防和/或治疗由鼠伤寒沙门氏菌引起的感染性疾病的药物中的用途也是本专利技术的保护范围。本专利技术的第二方面，提供一种用于预防和/或治疗由鼠伤寒沙门氏菌引起的感染性疾病的组合物，其包含上述的噬菌体作为有效成分。上述组合物可以以本专利技术的噬菌体作为唯一活性成分；还可以含有除本专利技术的噬菌体以外的其他噬菌体，其与本专利技术的噬菌体复配使用可以得到与之相当或者更好的防治鼠伤寒沙门氏菌的效果。上述组合物可以被制备成各种使用形式，如液体制剂、冻干制剂或口服固体制剂等，经口服、喷雾或注射等方式用于杀灭鼠伤寒沙门氏菌。本专利技术的第三方面，提供包含上述噬菌体作为有效成分的饲料添加剂、饮用水添加剂、饲料、饮用水、清洁剂或消毒剂。本专利技术的第四方面，提供利用上述噬菌体或包含上述噬菌体作为活性成分的组合物来预防和/或治疗由鼠伤寒沙门氏菌引起的感染性疾病的方法。上述技术方案具有如下有益效果：本专利技术的噬菌体对鼠伤寒沙门氏菌具有特异性的杀伤活性，能够选择性的杀死特定的致病菌，而不会杀死有益细菌，不会引起药物的抗性。本专利技术的噬菌体具有优异的耐酸性和耐热性，可以被制备成饲料添加剂、饮用水添加剂、饲料、饮用水、清洁剂或消毒剂各种形式的产品，能够在较广的温度范围和pH条件下对鼠伤寒沙门氏菌进行杀灭。附图说明构成本申请的一部分的说明书附图用来提供对本申请的进一步理解，本申请的示意性实施例及其说明用于解释本申请，并不构成对本申请的不当限定。图1为噬菌体ΦSa-1电镜图；图2为噬菌体ΦSa-1双层平板；图3为不同温度对噬菌体ΦSa-1的作用结果；图4为不同pH条件对噬菌体ΦSa-1的作用结果；图5为噬菌体ΦSa-1一步生长曲线图；图6为噬菌体ΦSa-1对小鼠鼠伤寒沙门氏菌感染的预防和治疗效果。具体实施方式应该指出，以下详细说明都是示例性的，旨在对本专利技术提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本专利技术所属
的普通技术人员通常理解的相同含义。需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本专利技术的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作和/或它们的组合。正如
技术介绍
所介绍的，针对目前禽业养殖中鼠伤寒沙门氏菌引起的疾病并没有有效的控制措施。基于此，本专利技术提出了一株具有鼠伤寒沙门氏菌防治效果的噬菌体及其应用。在本专利技术的一种实施方案中，提供了对鼠伤寒沙门氏菌具有特异性杀伤活性的新型噬菌体。噬菌体是能够感染特定细菌并抑制细菌生长的细菌特异性病毒，并且是包含单链或双链脱氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)作为遗传物质的病毒。具体而言，本专利技术的噬菌体是由专利技术人分离自粪液污水的新型噬菌体，该噬菌体具有呈正多面体的头部结构，没有尾部，头部直径约65nm，应属于复层噬菌体科；噬菌体株在固体培养基上可以形成较大空斑，周围有晕环，边缘清晰规则，直径为2～3mm。已于2017年4月28日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCM2017217，地址：中国武汉，武汉大学。在本专利技术的另一种实施方案中，提供了一种用于预防和/或治疗由鼠伤寒沙门氏菌引起的感染性疾病的组合物，其包含上述的噬菌体作为有效成分。由于本专利技术的噬菌体展现了能够特异性的杀死鼠伤寒沙门氏菌的抗菌活性，因此，本专利技术的噬菌体能够用于预防和/或治疗由鼠伤寒沙门氏菌的感染引起的疾病。本文中，术语“预防”指的是通过给动物施用噬菌体作为有效成分的组合物抑制相应疾病或者延缓相应疾病发生的所有措施。本文中，术语“治疗”指的是通过给动物施用噬菌体作为有效成分的组合物改善或减轻感染性疾病的症状的所有措施。本文中，术语“鼠伤寒沙门氏菌引起的感染性疾病”指的是鼠伤寒沙门氏菌感染后的症状，如发烧、头疼、腹泻和呕吐等。本实施方案中，用于预防和/或治疗由鼠伤寒沙门氏菌引起的感染性疾病的组合物中，噬菌体的含量为3×109PFU/mL。根据该实施方案，本专利技术的组合物中还可以包含其他非致病性的噬菌体，与本专利技术的噬菌体复配使用，以达到对鼠伤寒沙门氏菌更好的杀灭效果。本专利技术的又一种实施方案中，提供饲料添加剂或饮用水添加剂，其包含本专利技术的噬菌体为有效成分。饲料用添加剂或饮用水用添加剂可以通过如下来使用：使用本专利技术的噬菌体或包含其的组合物单独制备饲料用添加剂或饮用水用添加剂，并将饲本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株具有鼠伤寒沙门氏菌防治效果的噬菌体，所述噬菌体的分类命名为鼠伤寒沙门氏菌噬菌体（

【技术特征摘要】
1.一株具有鼠伤寒沙门氏菌防治效果的噬菌体，所述噬菌体的分类命名为鼠伤寒沙门氏菌噬菌体（Salmonellatyphimuriumphage）ΦSa-1，已于2017年4月28日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCM2017217，地址：中国武汉，武汉大学。2.权利要求1所述的噬菌体在制备用于预防和/或治疗由鼠伤寒沙门氏菌引起的感染性疾病的药物中的用途。3.一种用于预防和/或治疗由鼠伤寒沙门氏菌引起的感染性疾病的组合物，其包含权利要求1所述的噬菌体作为有效成分。4.如权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述组合...

【专利技术属性】
技术研发人员：单宝龙，陈雷，王春凤，谷巍，徐海燕，赵影，姜延龙，王红，李金敏，刘秀侠，陈玉春，高绪娜，郭婷婷，辛国芹，董佩佩，汪祥燕，于佳民，亓秀晔，曾佳佳，赵倩，
申请(专利权)人：山东宝来利来生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37