一种中短链酰基辅酶A合成酶的应用制造技术
Application of medium and short chain acyl coenzyme A synthetase
The invention relates to the application of a medium short chain acyl coenzyme A synthetase. The application steps are as follows: (1) in the preparation of short chain acyl coenzyme A synthetase amino acid sequence of SEQ ID NO.2 shown; (2) using step (1) prepared in short chain acyl coenzyme A synthetase preparation reaction system; (3) after the reaction, stop the reaction, removal of protein after purification, drying, that is. The present invention discloses the preparation technology for the first time 2 hepten acyl coenzyme A and cyclohexyl formyl coenzyme A by short chain acyl coenzyme A synthesis enzyme, can only overcome the think C two acyl coenzyme A synthetase only as a substrate to 1,3 two carboxylic acid or a salt thereof in the prior art, the catalytic formation of acyl coenzyme the corresponding A products, but can not be catalyzed by monocarboxylic acid as substrate of the technical prejudice, broaden the scope of application of the enzyme.
【技术实现步骤摘要】
一种中短链酰基辅酶A合成酶的应用
本专利技术涉及一种中短链酰基辅酶A合成酶的应用，特别涉及一种中短链酰基辅酶A合成酶在制备2-庚烯酰辅酶A、环己甲酰辅酶A中的应用，属于酶工程
技术介绍
辅酶A(coenzymeA，CoA)是酶促反应期间有助于酰基活化和转移的关键辅因子，在脂肪酸、大环内酯(macrolides)、芳香族化合物的生物合成，分解代谢或氧化过程，糖类的修饰，以及酶调控等广泛的生物学途径中发挥重要作用。据估计，已知的酶当中有4％使用CoA作为辅因子。酰基CoA(acyl-CoA)是CoA的巯基(-SH)共价连接至游离羧酸的羧基(-COOH)形成的临时化合物，作为酰基供体在初级和次级代谢中是必不可少的。大环内酯、聚醚(polyethers)、多烯(polyenes)、黄酮类(flavonoids)、芪类(stilbenes)等化合物是发掘具有药用价值的天然产物的重要来源，而上述聚酮类次级代谢物的生物合成均涉及各类中、短链酰基CoA(medium,short-chainacyl-CoA)作为结构单元。多样的酰基CoA作为起始或延伸单元在聚酮合酶(PK...
【技术保护点】
一种中短链酰基辅酶A合成酶在制备2‑庚烯酰辅酶A、环己甲酰辅酶A中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种中短链酰基辅酶A合成酶在制备2-庚烯酰辅酶A、环己甲酰辅酶A中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤如下：(1)制备氨基酸序列如SEQIDNO.2所示的中短链酰基辅酶A合成酶；(2)利用步骤(1)制得的中短链酰基辅酶A合成酶配制如下反应体系：100mM4-羟乙基哌嗪乙磺酸；质量体积百分比10％甘油，单位g/ml；100mM氯化镁；15～50mM2-庚烯酸、2-庚烯酸的钠盐、环己烷甲酸或环己烷甲酸的钠盐；20mM三磷酸腺苷；5mM辅酶A；10μM纯化的丙二酰辅酶A合成酶；pH7.5；(3)上述反应体系在20～24℃条件下反应7.5～10h，终止反应，去除酶蛋白，经纯化，干燥，即得。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤(1)中，制备氨基酸序列如SEQIDNO.2所示的中短链酰基辅酶A合成酶...
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