在癌症和免疫恢复中监测CD4制造技术

诊断或治疗患有癌症或者有发生癌症风险的哺乳动物受试者的方法，包括：从抗原递呈细胞或其前体细胞产生CD4

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】在癌症和免疫恢复中监测CD4+1型T辅助细胞应答的方法本申请要求于2014年3月14日提交的，序列号为61/953,726的美国临时专利申请的优先权和权益。致谢本申请是在国立卫生研究院授予的基金号为R01CA096997的部分支持下开发的。政府对于本申请具有一定的权利。
本实施例针对癌症中免疫应答的逐渐损失，尤其是抗-HER2/neuCD4+1型T辅助细胞(“Th1”)应答在HER2-驱动的乳腺癌及其恢复中的损失，和基于其的诊断监测方法，治疗方法和工具。
技术介绍
乳腺癌(“BC”)是世界范围内癌症相关死亡率的主要原因。见，Jemal，A.等，全球癌症统计。CA：癌症临床医生杂志61：69-90(2011)。通过基因表达标记的发展，目前认识到至少四种显著的乳腺肿瘤表型：管腔A型和管腔B型，基底细胞样型和人表皮生长因子受体-2型/neu(“HER2pos”)。见，Perou，CM.，等，Nature406：77-52(2000)。HER2过表达，在包括约20-25％乳腺癌的多种肿瘤类型中的驱动分子(Meric，F，等，J.AmColl.Surg.194：488-501(2002))，与侵袭性临床病程，化学疗法抗性以及乳腺癌的整体不良预后相关。见，Henson，E.S.，Clin.Can.Res.12：845-53(2006)(“Henson，等”)和Wang，G.S.，Mol.Med.Rep.6：779-82(2012)。在乳腺癌初期，HER2过表达与增强的侵袭性(Roses，R.E.，等，癌症控制措施.生物标记&Prev.18(5)：1386-9(2009))，肿瘤细胞迁移(Wolf-Yadlin，A.，等，分子系统生物学2：54(2006))，和促血管生成因子的表达(Wen，X.F.，等，致癌基因25：6986-96(2006))相关，表明HER2在促进肿瘤发生环境中起到关键性作用。尽管HER2-靶向治疗(即，赫赛汀/曲妥单抗)，与化学疗法联合治疗，已显著提高HER2pos乳腺癌患者的存活率(Piccart-Gebhart.，M.J.，等，N.Eng.J.Med.353：1659-72(2005))，很大比例的患者对所述治疗产生了抗性(Pohlmann，P.R.，等，Clin.Can.Res.15：7479-91(2009)(″Pohlman，等″))。因此需要鉴别治疗失败高风险患者亚群的策略，和提高HER2-靶向治疗应答率的新方法。有越来越多的证据表明肿瘤微环境中强力的细胞免疫应答与乳腺癌中改善预后有关，尤其在HER2pos亚型中，见Alexe.，G.，等，Can.Res.67：10669-76(2007)。为此，已经在这些抗肿瘤作用的个体免疫介质的破译中取得了进步。尽管细胞毒素CD8+T淋巴细胞(“CTL”)过去被认为是抗肿瘤免疫的主要效应物(Mahmoud，S.M.，等，J.Clin.Oncol.29：1949-55(2011))，在HER2-驱动的乳腺癌中用多肽疫苗推进CTL应答已经产生了最小的临床影响(Amin.，A.，等，癌症免疫.免疫疗法.57(12)：1817-25(2008))，可能是因为CTL功能在没有合适的CD4+T-淋巴细胞的帮助下是非最优化的，依据Bos，R.，等的报道，癌症研究.70：8368-77(2010)。除了对CTLs的产生和持续至关重要之外，CD4+T辅助(“Th”)细胞通过其他机制调节抗肿瘤作用，包括直接细胞毒素的破坏肿瘤活性，调控抗肿瘤细胞因子应答，和增强长时程免疫记忆(Cintolo，J.A.，等，FutureOncol.8：1273-99(2012))。通过促进免疫球蛋白的类型转换，Th细胞也有助于抗肿瘤体液免疫以及效应B细胞应答。见，Parker，D.C.，等，Ann.Rev.免疫学11：331-60(1993)(″Parker，等″)。的确，在肿瘤微环境中产生CD4+1型T辅助细胞(“Th1”)的干扰素(“IFN”)-γ的渗透与乳腺癌的改善预后相关。见，Gu-Trantien，C，等，J.Clin.Inv.123：2873-92(2013)。然而，在HER2-驱动的乳腺肿瘤发生的全身抗-HER2CD4+Th1应答的作用尚不明确。仍然迫切需要预测治疗失败高风险患者亚群的策略，以及提高使用曲妥单抗的HER2-靶向治疗和化学疗法的应答率的方法。因此，本申请的一个或多个实施例旨在应对在此提到的一个或多个问题。
技术实现思路
在一个广义方面，本专利技术提供了诊断或治疗患有癌症或者有发生癌症风险的哺乳动物受试者的方法，包括：从抗原递呈细胞(“APCs”)或其前体细胞以及来自所述受试者的血液样本中的CD4+T-细胞生成循环的抗癌CD4+Th1应答，其引起干扰素伽玛(”IFN-γ”)的分泌；和检测所述的抗-癌CD4+Th1应答以确定所述应答是否下调。在另外一个方面，所述生成步骤进一步包括：从所述血液样本中分离未膨胀的外周血单核细胞(“PBMCs”)；用组合物脉冲PBMCs和其中的APC-前体单核细胞，所述组合物包括基于使受试者受到折磨的癌症类型的免疫原性II类MHC结合肽，从而激活PBMC中的CD4+Th1细胞以分泌IFN-γ；所述检测步骤包括检测所分泌的IFN-γ。在可供选择的方面，所述生成步骤进一步包括：将来自受试者样本中纯化的CD4+T细胞与来自受试者样本的、用组合物脉冲过的APC未成熟或成熟的树突状细胞(”DCs”)共同培养，所述组合物包括基于使受试者受到折磨的癌症类型的免疫原性II类MHC结合肽，从而激活CD4+T细胞以分泌IFN-γ；所述检测步骤包括检测所分泌的IFN-γ。在另一方面，所述癌症选自由乳腺癌，脑癌，膀胱癌，食管癌，肺癌，胰腺癌，肝脏癌，前列腺癌，卵巢癌，大肠癌和胃癌或其任意组合所组成的组。在另一方面，所述癌症是表达HER2的。再一方面，所述癌症是HER2-阳性乳腺癌，所述受试者是人类女性，并且所述免疫原性II类MHC结合肽是基于HER2分子的。在优选的实施例中，所述的组合物进一步包括HER2II类MHC抗原结合肽，其包括：肽42-56(SEQIDNO：1)；肽98-114(SEQIDNO：2)；肽328-345(SEQIDNO：3)；肽776-790(SEQIDNO：4)；肽927-941(SEQIDNO：5)；和肽1166-1180(SEQIDNO：6)。在优选的实施例中，采用IFN-γ酶联免疫斑点法(″ELISPOT″)测定所述IFN-γ的产生。在另一方面，在有需求的HER2-阳性乳腺癌患者中恢复HER2-特异性CD4+Th1免疫应答的方法，包括：向所述患者施用治疗有效量的树突状细胞疫苗(DCvaccine)，所述树突状细胞疫苗包括用免疫原性HER2II类MHC结合肽脉冲过的自体树突状细胞(“树突状细胞疫苗接种”，DCvaccination)以提高所述患者的抗-HER2CD4+Th1应答的；和根据上述方面的生成和检测步骤来测定所述患者接种树突状细胞疫苗之前和之后的抗-HER2CD4+Th1应答以确定在所述应答中的增加量，其中所述恢复方法进一步包括：通过在一个或多个附加时间间隔实施上述方面的生成和检测步骤来测定接种树突状疫苗本文档来自技高网...

【技术保护点】
诊断或治疗患有癌症或者有发展成癌症风险的哺乳动物受试者的方法，包括：从抗原递呈细胞(″APCs″)或其前体细胞以及来自所述受试者血液的样本中的CD4

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.03.14 US 61/953,7261.诊断或治疗患有癌症或者有发展成癌症风险的哺乳动物受试者的方法，包括：从抗原递呈细胞(″APCs″)或其前体细胞以及来自所述受试者血液的样本中的CD4+T-细胞生成引起干扰素伽玛(”IFN-γ”)分泌的循环的抗癌CD4+Th1应答；和检测所述的抗癌CD4+Th1应答以确定所述应答是否下调。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述的生成的步骤进一步包括：从所述血液样本中分离未膨胀的外周血单核细胞(“PBMCs”)；和用组合物脉冲所述的外周血单核细胞和其中的APC-前体单核细胞，所述组合物包括基于使受试者受到折磨的癌症类型的免疫原性II类MHC结合肽，从而激活所述PBMC中的CD4+Th1细胞以分泌IFN-γ；和所述检测步骤包括检测所分泌的IFN-γ。3.根据权利要求1所述的方法，其中所述的生成的步骤进一步包括：将来自受试者样本中纯化的CD4+T细胞与来自受试者样本的、用组合物脉冲过的APC未成熟或成熟的树突状细胞(”DCs”)共同培养，从而激活CD4+T细胞以分泌IFN-γ，所述组合物包括基于使受试者受到折磨的癌症类型的免疫原性II类MHC结合肽；和所述检测步骤包括检测所分泌的IFN-γ。4.根据权利要求1所述的方法，其中所述癌症选自由乳腺癌，脑癌，膀胱癌，食管癌，肺癌，胰腺癌，肝脏癌，前列腺癌，卵巢癌，大肠癌和胃癌或其任意组合所组成的组。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述癌症是表达HER2的。6.根据权利要求2所述的方法，其中所述癌症是HER2-阳性乳腺癌，所述受试者是人类女性，并且所述免疫原性II类MHC结合肽是基于HER2分子的。7.根据权利要求3所述的方法，其中所述癌症是HER2-阳性乳腺癌，所述受试者是人类女性，并且所述免疫原性II类MHC结合肽是基于HER2分子的。8.根据权利要求6所述的方法，其中所述的组合物进一步包括HER2II类MHC结合肽，HER2II类MHC结合肽包括：肽42-56：HLDMLRHLYQGCQVV(SEQIDNO：1)；肽98-114：RLRIVRGTQLFEDNYAL(SEQIDNO：2)；肽328-345：TQRCEKCSKPCARVCYGL(SEQIDNO：3)；肽776-790：GVGSPYVSRLLGICL(SEQIDNO：4)；肽927-941：PAREIPDLLEKGERL(SEQIDNO：5)；和肽1166-1180：TLERPKTLSPGKNGV(SEQIDNO：6)。9.根据权利要求7所述的方法，其中所述组合物进一步包括HER2II类MHC结合肽，HER2II类MHC结合肽包括：肽42-56：HLDMLRHLYQGCQVV(SEQIDNO：1)；肽98-114：RLRIVRGTQLFEDNYAL(SEQIDNO：2)；和肽328-345：TQRCEKCSKPCARVCYGL(SEQIDNO：3)；肽776-790：GVGSPYVSRLLGICL(SEQIDNO：4)；肽927-941：PAREIPDLLEKGERL(SEQIDNO：5)；和肽1166-1180：TLERPKTLSPGKNGV(SEQIDNO：6)。10.根据权利要求1所述的方法，其中所述IFN-γ的分泌是通过IFN-γ酶联免疫斑点法("ELISPOT"...

【专利技术属性】
技术研发人员：加里·K·科斯基，乔休德普·达塔，
申请(专利权)人：宾夕法尼亚大学理事会，
类型：发明
国别省市：美国,US