变异葡萄糖脱氢酶及其使用制造技术
【技术实现步骤摘要】
变异葡萄糖脱氢酶及其使用
本专利技术涉及底物特异性提高的变异葡萄糖脱氢酶(GDH)。详细地讲，本专利技术涉及包含变异型α亚单位的GDH。本专利技术的GDH可以适当地用于葡萄糖传感器及葡萄糖检测试剂盒等，在生物化学领域、临床领域等中有用。
技术介绍
目前，将野生型的含细胞色素C的GDH(CyGDH)及以吡咯并喹啉苯醌作为辅酶的PQQGDH用于血糖自测传感器。然而，野生型的CyGDH及PQQGDH有以下缺点：由于其不仅与葡萄糖反应而且还与麦芽糖反应，因此不能测定准确的血糖值。专利文献1中虽然公开了对二糖类的反应性低、且在α亚单位的326位、365位以及472位具有变异的变异GDH，但显示反应性低的仅仅是针对麦芽糖，并没有公开对木糖以及半乳糖的反应性低的变异GDH。在先技术文献专利文献专利文献1：日本特开2012-090563号公报。
技术实现思路
专利技术要解决的技术问题本专利技术的课题在于，提供一种对木糖、优选木糖以及半乳糖的反应性低、且对葡萄糖的底物特异性提高的GDH。用于解决技术问题的手段本专利技术人为了解决如上所述的课题而进行了潜心研究，结果发现，通过在依次包含下...
【技术保护点】
一种变异葡萄糖脱氢酶，其包含变异葡萄糖脱氢酶α亚单位，所述变异葡萄糖脱氢酶α亚单位具有在依次包含下面的肽序列(i)～(v)的520～550个氨基酸的葡萄糖脱氢酶α亚单位的氨基酸序列中、以其他氨基酸取代肽序列(iii)的10位的甘氨酸、肽序列(iv)的4位的组氨酸、以及肽序列(v)的4位的天冬酰胺中的一个以上的氨基酸序列，其中，所述变异葡萄糖脱氢酶具有葡萄糖脱氢酶活性，对木糖的反应性降低。(i)Val/Ile Val/Ile Val/Ile Gly Ser Gly Val Ala Gly(序列号21)(ii)Cys Cys Gly Asn Asn Asn Cys Met Pr...
【技术特征摘要】
2015.10.29 JP 2015-2130851.一种变异葡萄糖脱氢酶，其包含变异葡萄糖脱氢酶α亚单位，所述变异葡萄糖脱氢酶α亚单位具有在依次包含下面的肽序列(i)～(v)的520～550个氨基酸的葡萄糖脱氢酶α亚单位的氨基酸序列中、以其他氨基酸取代肽序列(iii)的10位的甘氨酸、肽序列(iv)的4位的组氨酸、以及肽序列(v)的4位的天冬酰胺中的一个以上的氨基酸序列，其中，所述变异葡萄糖脱氢酶具有葡萄糖脱氢酶活性，对木糖的反应性降低。(i)Val/IleVal/IleVal/IleGlySerGlyValAlaGly(序列号21)(ii)CysCysGlyAsnAsnAsnCysMetProIleCys(序列号22)(iii)ValGlyArgAsnLeuMetAspHisProGlyThrGly(序列号23)(iv)LysLysIle/LeuHisLeuSerAsn(序列号24)(v)PheAlaPro/AsnAsnAsnHisIle(序列号25)。2.如权利要求1所述的变异葡萄糖脱氢酶，其中，与从肽序列(ii)的8位的Met、肽序列(iii)的12位的Gly、肽序列(iv)的6位的Ser、肽序列(v)的2位的Ala、肽序列(v)的3位的Pro/Asn、肽序列(v)的5位的Asn以及肽序列(v)的7位的Ile中选择的至少一个氨基酸残基相当的氨基酸残基还被其他氨基酸残基取代。3.如权利要求1所述的变异葡萄糖脱氢酶，其中，所述变异葡萄糖脱氢酶还对半乳糖的反应性降低。4.如权利要求1至3中任一项所述的变异葡萄糖脱氢酶，其中，所述变异葡萄糖脱...
【专利技术属性】
技术研发人员：小岛胜博，森一茂，
申请(专利权)人：爱科来株式会社，究极酵素国际股份有限公司，
类型：发明
国别省市：日本,JP
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