葡萄糖脱氢酶法检测葡萄糖的试剂盒及制备方法技术

本发明专利技术公开了一种葡萄糖脱氢酶法检测葡萄糖的试剂盒，属于一种含酶的葡萄糖检测试剂盒。本发明专利技术试剂盒包括有：4瓶葡萄糖脱氢酶法试剂及1支葡萄糖标准液，在本发明专利技术试剂中包括有：120.0mmol/L浓度的磷酸盐缓冲液中溶解草酸钠8.0mmol/L、葡萄糖脱氢酶6000U/L、变旋酶180U/L、NAD+4.0mmol/L、0.2％ProClin?300防腐剂。在测定中通过草酸钠抑制内源性乳酸脱氢酶、α-羟丁酸脱氢酶的活性来控制干扰反应，增加反应的特异性，提高检测结果的准确度。本发明专利技术的试剂盒检测时受样品/试剂体积比的设置影响小，线性范围可达35.0mmol/L。其使用方法与原有葡萄糖脱氢酶法相同，不会增加实验人员的负担，几乎不增加试剂成本，经济方便易行，是一种准确性更高的葡萄糖脱氢酶法测定葡萄糖的试剂盒。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于一种含有酶的葡萄糖检测试剂盒，特别是涉及一种。
技术介绍
葡萄糖的测定方法已知的就有12种之多，在这些方法中，有的方法易受反应液中还原性物质、其它糖类干扰而产生或高或低偏差而很少应用。目前，国内外临床实验室检测葡萄糖最常用的方法是酶法，以酶为试剂可以提高特异性，葡萄糖氧化酶法易受维生素C、尿酸、尿素、胆红素、肌酐的干扰，而以上各物质对葡萄糖脱氢酶法无干扰。目前各实验室使用的葡萄糖脱氢酶法试剂盒，虽生产厂家不同，但试剂盒的组成基本相似，缓冲液内含有葡萄糖脱氢酶、变旋酶、NAD+或NADP+、防腐剂。下面是《全国临床检验操作规程》葡萄糖脱氢酶法试剂盒配方《全国临床检验操作规程》第三版中配方: 磷酸盐缓冲液(PH 7.6) 120.0 mmol/L GDH4500 U/L 变旋酶90 U/L NAD+2.2 mmol/L 使用方法:样品:试剂=I: 100，混匀后7分钟检测。葡萄糖脱氢酶法(GDH)法检测葡萄糖的过程为:葡萄糖脱氢酶催化葡萄糖脱氢，与NAD+氧化生成葡萄糖酸(D-葡萄糖糖酸-δ -内酯)和NADH。 GDHβ -D-葡萄糖+NAD+ 4 NADH+D-葡萄糖酸内酯反应液中加入变旋酶可缩短反应到达平衡的时间,在反应过程中，NADH的生成量与葡萄糖浓度呈正比关系。在肝转移癌、恶性贫血、急性心肌梗塞患者中，血液中LDH、a -HBDH活性都升高，同时伴有丙酮酸、α -酮丁酸升高，用葡萄糖脱氢酶法测定其葡萄糖时，一旦有NADH生成，它将会产生如下干扰反应:在LDH催化下，NADH与丙酮酸反应，生成L-乳酸和NAD+，如反应方程式(I);在a-HBDH催化下，NADH与α -酮丁酸反应生成α -羟丁酸和NAD+，如反应方程式(2)。干扰反应不同程度地消耗了 NADH，有时甚至会耗尽生成的NADH，使反应曲线下降或变为平坦，使NADH的生成与葡萄糖不成等量关系，干扰反应的结果使葡萄糖测定结果偏低，LDH、a-HBDH活性越高，干扰反应速度越快，偏差越大。葡萄糖脱氢酶法测定心肌酶升高患者的葡萄糖，内源性干扰可通过与葡萄糖氧化酶法比较而被发现，葡萄糖脱氢酶法测定葡萄糖结果明显偏低，也可以通过在自动化分析仪上查看实时反应曲线获知，心肌酶活性越高，样品体积分数增加，内源性干扰越大，反应曲线下降越陡，葡萄糖结果偏差越大，准确度越低。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种葡萄糖脱氢酶法检测葡萄糖的试剂盒，包括有：4瓶葡萄糖脱氢酶法试剂及1支葡萄糖标准液，其特征在于90～150.0mmol/L的磷酸盐缓冲液溶解4.0～12.0mmol/L浓度的草酸盐，葡萄糖脱氢酶5000～7000U/L，变旋酶140～220U/L，NAD+2.0～6.0mmol/L，0.1～0.3％ProClin300防腐剂。

【技术特征摘要】
1.种葡萄糖脱氢酶法检测葡萄糖的试剂盒，包括有:4瓶葡萄糖脱氢酶法试剂及I支葡萄糖标准液，其特征在于90 150.0mmol/L的磷酸盐缓冲液溶解4.0 12.0mmol/L浓度的草酸盐，葡萄糖脱氢酶5000 7000U/L，变旋酶140 220U/L，NAD+2.0 6.0mmol/L,0.1 0.3% ProClin300 防腐剂。2.据权利要求1所述的葡萄糖脱氢酶法检测葡萄糖的试剂盒，其特征在于试剂中草酸盐为分析纯的草酸钠、草酸钾，用于抑制葡萄糖脱氢酶法测定中的干扰反应。3.据权利要求1所述的葡萄糖脱氢酶法检测葡萄糖的试剂盒，其特征在于葡萄糖标准液的浓度为5.55mmol/L。4.据权利要求1所述的葡萄糖脱氢酶法检测葡萄糖的试剂盒...

【专利技术属性】
技术研发人员：李立和，
申请(专利权)人：李立和，
类型：发明
国别省市：