血清中甘油三酯的两步酶测定方法技术

本发明专利技术公开了一种血清中甘油三酯的两步酶测定方法，属于利用可见光，通过测试反应的结果产生颜色变化来测试材料的方法。本发明专利技术的技术方案是：双色原物质同在试剂Ｉ中，试剂ＩＩ仅有脂蛋白脂肪酶有效成分；其测定方法为：血清先与试剂Ｉ于３７℃温浴３～５分钟，血清中游离甘油与试剂Ｉ反应生成醌亚胺，加入试剂ＩＩ后于３７℃温浴４～７分钟，甘油三酯水解后经反应产生红色的醌亚胺。仪器在５００－５２０ｎｍ波长处检测，以试剂Ｉ反应产生的醌亚胺为空白，由试剂ＩＩ反应产生的醌亚胺计算出甘油三酯的含量。本发明专利技术检测时不受内源性甘油影响，其使用方法和范围与原有两步酶法相同，不增加试剂成本，经济方便易行，是一种准确性更高的甘油三酯检测方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于一种包含酶的测定方法；或是利用可见光，通过测试反应的结果产生颜色变化来测试材料的方法，特别是涉及一种用生化分析仪检测。
技术介绍
血清中甘油三脂(TG)的测定方法一般可分为化学法、酶法和色谱法3大类。早期测定方法是以总脂质与胆固醇和磷脂之差估算。化学法用有机溶剂抽提标本中的TG，去除抽提液中磷脂等干扰物后，用碱水解(皂化)TG，以过碘酸氧化甘油生成甲醛，然后用显色反应测甲醛。比较准确的是二氯甲烷硅酸变色酸法(Van Handel-Caslson法)，此法抽提完全、能去除磷脂及甘油干扰、变色酸显色灵敏度高、显色稳定，至今还是美国疾病控制与预防中心(CDC)的内部参考方法。但因操作步骤繁多、技术要求高而不适于临床常规检测工作中应用。色谱法包括核素稀释/气相色谱/质谱等方法(ID/GC/MS)，主要用作参考系统中决定性方法的建立及参考物质的制备与定值，此法费用昂贵，样品处理复杂，难以推广应用。另外应用高效液相色谱仪测定血清中的甘油三酯，检测成本高，难以在临床推广。 目前国内几乎所有的临床实验室都用酶法检测血清TG水平，此方法分为一步法和两步法，虽然方法各异，但一般本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种血清中甘油三酯的两步酶测定方法，其特征在于双色原物质同在试剂Ⅰ中，试剂Ⅱ仅含有脂蛋白脂肪酶有效成分；其测定方法为：血清先与试剂于３７℃温浴３～５分钟，血清中游离甘油与试剂的反应生成醌亚胺，加入试剂后于３７℃温浴４～７分钟，甘油三酯水解后经反应也生成醌亚胺；仪器在５００－５２０ｎｍ波长处检测，以试剂反应产生的醌亚胺为空白，由试剂反应产生的醌亚胺计算出甘油三酯的含量，计算公式为：　　ＯＤＴＧ＝ＯＤ２－ＯＤ１×［（ＳＶ＋Ｒ１Ｖ１）／（ＳＶ＋Ｒ１Ｖ１＋Ｒ２Ｖ２）］　　甘油三酯浓度＝Ｆ×ＯＤＴＧ　　其中ＯＤＴＧ是甘油三酯产生的吸光度，ＯＤ１是样品加入试剂反应后测得的吸光度，ＯＤ２是样品加入试剂反应后...

【技术特征摘要】
1.一种血清中甘油三酯的两步酶测定方法，其特征在于双色原物质同在试剂I中，试剂II仅含有脂蛋白脂肪酶有效成分；其测定方法为血清先与试剂？于37℃温浴3～5分钟，血清中游离甘油与试剂？的反应生成醌亚胺，加入试剂？后于37℃温浴4～7分钟，甘油三酯水解后经反应也生成醌亚胺；仪器在500-520nm波长处检测，以试剂？反应产生的醌亚胺为空白，由试剂？反应产生的醌亚胺计算出甘油三酯的含量，计算公式为ODTG＝OD2-OD1×[(SV+R1V1)/(SV+R1V1+R2V2)]甘油三酯浓度＝F×ODTG其中ODTG是甘油三酯产生的吸光度，OD1是样品加入试剂？反应后测得的吸光度，OD2是样品加入试剂？反应后测得的吸光度，SV是血清样品的体积，R1V1是试剂I的体积，R2V2是试剂II的体积，F是校正因数。2.根据权利要求1所述的血清中甘油三酯的两步酶测定方法，其特征在于试剂I中双色原物质一个为4-氨基安替比林，另一个选自2，4-二氯酚或苯酚的衍生物。3.根据权利要求1所述的血清中甘油三酯的两步酶测定方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：李立和，
申请(专利权)人：李立和，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]