CEA.CAR‑T及其制备与应用制造技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体涉及一种CEA.CAR‑T及其制备与应用。本发明专利技术首先提供一种靶向于癌胚抗原的嵌合抗原受体，所述嵌合抗原受体包括依次连接的结合癌胚抗原（CEA）的多肽、CD28跨摸区（CD28‑TM）、胞内4‑1BB 及胞内CD3ζ。接下来，制备能够表达所述嵌合抗原受体的T细胞，可以特异性识别并杀伤CEA高表达的人肿瘤细胞系及移植瘤模型，证实其是一种安全、特异、有效的CAR‑T细胞，具有重要的临床应用价值。

【技术实现步骤摘要】
CEA.CAR-T及其制备与应用
本专利技术涉及生物
，具体涉及一种CEA.CAR-T及其制备与应用。
技术介绍
嵌合抗原受体(Chimericantigenreceptor,CAR)修饰T细胞(CAR-T细胞治疗技术)是近年来发展非常迅速的一种过继免疫细胞治疗技术。通过基因改造技术，效应T细胞的靶向性、杀伤活性和持久性均优于常规应用的免疫细胞，并可克服肿瘤局部免疫抑制微环境和打破宿主免疫耐受状态，是肿瘤免疫细胞治疗领域中新的靶向治疗方式。CAR-T细胞治疗技术的特点在于将抗体的靶向特异性与T细胞的归巢、组织穿透和靶向摧毁能力结合起来用于肿瘤治疗，并在过去的十年中取得了飞速发展，在多种恶性肿瘤的基础研究及临床转化中均取得了显著疗效，多个临床试验结果也令人振奋。CAR-T技术将能识别某种肿瘤抗原的抗体的抗原结合部与CD3-ζ链或FcεRIγ的胞内部分在体外偶联为一个嵌合蛋白，通过基因转导患者T细胞，使其表达嵌合抗原受体，患者的T细胞被“重编码”后，生成大量肿瘤特异性的CAR-T细。根据胞内区的结构不同，可将CAR-T划分为三代：第一代CAR-T(cFv+信号传导部分)虽然能够介导本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种靶向于癌胚抗原的嵌合抗原受体，所述嵌合抗原受体包括依次连接的结合癌胚抗原的多肽、CD28跨摸区、胞内4‑1BB及胞内CD3ζ。

【技术特征摘要】
1.一种靶向于癌胚抗原的嵌合抗原受体，所述嵌合抗原受体包括依次连接的结合癌胚抗原的多肽、CD28跨摸区、胞内4-1BB及胞内CD3ζ。2.根据权利要求1所述的靶向于癌胚抗原的嵌合抗原受体，其特征在于，所述结合癌胚抗原的多肽为抗癌胚抗原的单链抗体。3.根据权利要求2所述的靶向于癌胚抗原的嵌合抗原受体，其特征在于，所述抗癌胚抗原的单链抗体包括轻链可变区和重链可变区，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO.11所示，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO.12所示。4.根据权利要求2所述的靶向于癌胚抗原的嵌合抗原受体，其特征在于，所述抗癌胚抗原的单链抗体的氨基酸序列SEQIDNO.10所示。5.根据权利要求1所述的靶向于癌胚抗原的嵌合抗原受体，其特征在于，还包括以下特征中的任一项或多项：(1)所述CD28跨膜区的氨基酸序列如SEQIDNO.13所示；(2)所述胞内CD3ζ的氨基酸序列如SEQIDNO.14所示；(3)所述胞内4-1BB的氨基酸序列如SEQIDNO.15所示。6.根据权利要求1所述的靶向于癌胚抗原的嵌合抗原受体，其特征在于，所述结合癌胚抗原的多肽与CD28跨膜区之间通过连接片段连接。7.根据权利要求6所述的靶向于癌胚抗原的嵌合抗原受体，其特征在于，所述连接片段为免疫球蛋白IgD的铰链区片段。8.根据权利要求6所述的靶向于癌胚抗原的嵌合抗原受体，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋敬庭，卢斌峰，陈宇昂，陈陆俊，
申请(专利权)人：常州市第一人民医院，
类型：发明
国别省市：江苏,32