一种蝴蝶兰组织培养方法及培养基技术

本发明专利技术公开了一种蝴蝶兰组织培养方法，包括增殖培养液的幼苗培养，增殖培养液中包含复合大量元素、复合微量物质、肌醇、6‑苄基嘌呤、2,4‑二氯苯乙酸、吲哚丁酸、土豆泥、蔗糖；壮苗培养液的壮苗培养，壮苗培养液包含复合大量元素、复合微量物质、肌醇、蛋白胨、活性炭、柠檬酸、硝酸铵、硝酸钾、土豆泥、香蕉泥、蔗糖；生长培养液的适应性培养，生长培养液包含复合大量元素、复合微量物质、肌醇、吲哚丁酸、蛋白胨、活性炭、柠檬酸、硝酸铵、硝酸钾、大量元素助剂、土豆泥、香蕉泥、蔗糖。本发明专利技术还公开了培养蝴蝶兰用的培养基，发芽率提高了6％，幼苗长成缩短了10天，幼苗成活率为100％，壮苗长成时间缩短了14天。

Phalaenopsis tissue culture method and culture medium

The invention discloses a method for culturing Phalaenopsis tissue cultured seedlings, including proliferation culture, proliferation culture medium containing composite composite material, large elements, trace inositol, 6-BA and 2,4 6 two chlorobenzene acetic acid, indole butyric acid, sucrose, Mashed Potato; seedling medium seedling culture, seedling culture medium containing a large number of complex elements, complex trace substances, inositol, peptone, active carbon, citric acid, ammonium nitrate, potassium nitrate, Mashed Potato, banana, sugar; culture medium growth adaptability, growth medium containing composite composite material, large elements, trace inositol, IBA, peptone, activated carbon, lemon acid, ammonium nitrate, potassium nitrate, a large number of elements Mashed Potato, additives, banana, sugar. The invention also discloses a culture medium for Phalaenopsis, germination rate increased by 6%, shorten the seedlings grown for 10 days, the survival rate of seedlings was 100%, Seedling Grown time shortened 14 days.

【技术实现步骤摘要】
一种蝴蝶兰组织培养方法及培养基
本专利技术属于植物组织培养
，具体涉及一种蝴蝶兰组织培养方法及培养基。
技术介绍
蝴蝶兰(PhalaenopsisaphroditeRchb.F.)为兰科蝴蝶兰属，原产于亚热带雨林地区，为附生性兰花。蝴蝶兰白色粗大的气根露在叶片周围，除了具有吸收空气中养分的作用外，还有生长和光合作用。新春时节，蝴蝶兰植株从叶腋中抽出长长的花梗，并且开出形如蝴蝶飞舞般的花朵，深受花迷们的青睐，素有“洋兰王后”之称。为了满足花卉市行业的需求，传统的蝴蝶兰种植方式已经难以满足市场需求，因此目前蝴蝶兰最常用的种植方法是利用其组织进行无性繁殖，这样既能够大量繁殖植株、有能够是子代蝴蝶兰符合母本的表型性状，应用前景良好。现有蝴蝶兰等兰花类组织培养用营养液通常为市售的“花宝一号”，其中主要成分为氮、磷、钾元素，但是“花宝一号”主要针对的是兰花扦插、接枝、移植时促进根系生长的作用，难以满足整个蝴蝶兰生长周期的快速生长。
技术实现思路
本专利技术提供的一种蝴蝶兰组织培养方法及培养基，针对蝴蝶兰不同生长阶段的需求设计不同的培养基，通过该方法能够使整个蝴蝶兰生长周期缩短。本专利技术提供的一种蝴蝶兰组织培养方法，包括以下步骤：步骤1，将蝴蝶兰的花梗腋芽进行消毒后，对花梗腋芽进行切口，然后接种至增殖培养液中，培养12-18天，温度为20-25℃、光照强度1500-2000Lux得到蝴蝶兰幼苗；所述增殖培养液的配方如下，每升增殖培养液由以下组分制成：复合大量元素2g、复合微量物质1.3-1.5g、肌醇120-130mg、6-苄基嘌呤2-3mg、2,4-二氯苯乙酸2-3mg、吲哚丁酸0.4-0.6mg、土豆泥100g、蔗糖20-25g、琼脂粉5g、余量为水，且增殖培养液的pH为5.8；步骤2，将蝴蝶兰幼苗转移至壮苗培养液中，培养22-24天，得到蝴蝶兰壮苗；所述壮苗培养液的配方如下，每升壮苗培养液由以下组分制成：复合大量元素1g、复合微量物质1.3-1.5g、肌醇100mg、蛋白胨2-3g、活性炭1-2g、柠檬酸35-45mg、硝酸铵620-660mg、硝酸钾170-180mg、土豆泥40g、香蕉泥35-45g、蔗糖20-25g、琼脂粉5g、余量为水，且壮苗培养液的pH为6.0；步骤3，将蝴蝶兰壮苗转移至生长培养液中，自然环境下培养2-3天，得到用于移栽的蝴蝶兰植株；所述生长培养液的配方如下，每升生长培养液由以下组分制成：复合大量元素1g、复合微量物质1.3-1.5g、肌醇100mg、吲哚丁酸0.65-0.75mg、蛋白胨2-3g、活性炭1-2g、柠檬酸40-50mg、硝酸铵750mg、硝酸钾170-180mg、大量元素助剂6mg、土豆泥45g、香蕉泥45g、蔗糖15-20g、琼脂粉5g、余量为水，且生长培养液的pH为6.0。优选的，上述蝴蝶兰组织培养方法中，所述每升增殖培养液中还含有3g的椰子浸汁；每升生长培养液中还含有10g的椰子浸汁；每升所述椰子浸汁按照以下方法制备：将椰子去皮、去汁后留下白色的椰肉，然后将椰肉切碎，得到椰肉碎块，向100g椰肉碎块中加入1L水，煮沸20min，过滤，收集滤液，补水至1L，得到椰子浸汁。优选的，上述蝴蝶兰组织培养方法中，所述复合大量元素采用的是大量元素混合物或者花宝1号中的一种；所述大量元素混合物是由磷酸二氢钾、硝酸铵、氯化钾按照1:1:1.4的摩尔比例混合而成。优选的，上述蝴蝶兰组织培养方法中，所述复合微量物质是微量物质混合物或者善存多维元素片(29)中的一种；所述微量物质混合物是维生素A、维生素D、维生素E、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素C、维生素B12、维生素K1、生物素、叶酸、维生素PP、泛酸、氯化钙、一水硫酸锰、七水硫酸锌、二水钼酸钠、五水硫酸铜、六水氯化钴、七水硫酸亚铁按照5:0.4:0.03:1.5:1.7:2:60:1:0.006:0.025:0.4:20:10:162:2.5:15:5:2:2:1的质量比例混合而成。优选的，上述蝴蝶兰组织培养方法中，所述大量元素助剂为助剂混合物或者华多多1号20-20-20中的一种；所述助剂混合物是由磷酸二氢钾、硝酸铵按照1:1的摩尔比例混合而成。本专利技术还提供了一种根据上述蝴蝶兰组织培养方法得到的蝴蝶兰组织增殖培养基，按照所述增殖培养液的配方称取除了水以外的所有物质，充分混匀，得到蝴蝶兰组织增殖培养基。本专利技术还提供了一种根据上述蝴蝶兰组织培养方法得到的蝴蝶兰壮苗培养基，按照所述壮苗培养液的配方称取除了水以外的所有物质，充分混匀，得到蝴蝶兰壮苗培养基。本专利技术还提供了一种根据上述蝴蝶兰组织培养方法得到的蝴蝶兰生长培养基，按照所述生长培养液的配方称取除了水以外的所有物质，充分混匀，得到蝴蝶兰生长培养基。与现有技术相比，本专利技术的方法具有以下有益效果：(1)以香蕉皮和香蕉果肉作为培养基的制备材料之一，减少香蕉皮的丢弃率，并在此基础上添加了其他的组分，保证蝴蝶兰组织发芽率和茎叶分化率提高，发育周期缩短；添加椰子浸汁，在利用农业废弃物的同时，补充了微量元素和矿物质，减少纯化学物质的使用，降低了生产成本。(2)经煮沸处理的香蕉泥作为培养基材料时，幼苗长成时间缩短了12天、染菌率为0，壮苗长成的时间缩短了8天。说明不同的原料处理方式对蝴蝶兰组织生长的影响较大，应当采用煮沸处理的香蕉泥为宜。(3)本专利技术的增殖培养液使得蝴蝶兰花梗腋芽的发芽率提高了至少6％，幼苗长成缩短了至少10天，提高了发芽率，缩短了幼苗长成时间；利用本专利技术的壮苗培养液培养的蝴蝶兰叶肉饱满、茎枝粗壮，生长状况更佳，幼苗成活率为100％，壮苗长成时间缩短了至少14天，在蝴蝶兰组织培养方面具有良好的应用前景和经济价值。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术进行详细说明，但不应理解为本专利技术的限制。下面实施例中未注明具体条件的实验方法，均按照本领域的常规方法和条件进行。实施例1一种蝴蝶兰组织培养方法，包括以下步骤：步骤1，将蝴蝶兰的花梗腋芽进行常规消毒后，对花梗腋芽进行常规方法切口，然后接种至增殖培养液中，培养18天，温度为20℃、光照强度2000Lux，得到蝴蝶兰幼苗；所述增殖培养液的配方如下，每升增殖培养基由以下组分制成：美国花宝公司HYPONeX的花宝1号2g、惠氏制药有限公司的善存多维元素片(29)1.4g、肌醇125mg、6-苄基嘌呤(BA)2.5mg、2,4-二氯苯乙酸(2,4-D)2.5mg、吲哚丁酸(IBA)0.5mg、土豆泥100g、蔗糖20g、琼脂粉5g、余量为水，且增殖培养液的pH为5.8；步骤2，将蝴蝶兰幼苗转移至壮苗培养液中，培养24天，温度为20℃、光照强度2000Lux，得到蝴蝶兰壮苗；所述壮苗培养液的配方如下，每升壮苗培养液由以下组分制成：美国花宝公司HYPONeX的花宝1号1g、惠氏制药有限公司的善存多维元素片(29)1.4g、肌醇100mg、蛋白胨3g、活性炭1.5g、柠檬酸40mg、硝酸铵650mg、硝酸钾175mg、土豆泥40g、香蕉泥40g、蔗糖20g、琼脂粉5g、余量为水，且壮苗培养液的pH为6.0；步骤3，将蝴蝶兰壮苗转移至生长培养液中，自然环境下培养3天，得到用于移栽的蝴蝶兰植株；所述生长培养液的配方如下，每升生长培养液由以本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蝴蝶兰组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，将蝴蝶兰的花梗腋芽进行消毒后，对花梗腋芽进行切口，然后接种至增殖培养液中，培养12‑18天，温度为20‑25℃、光照强度1500‑2000Lux得到蝴蝶兰幼苗；所述增殖培养液的配方如下，每升增殖培养液包括以下组分：复合大量元素2g、复合微量物质1.3‑1.5g、肌醇120‑130mg、6‑苄基嘌呤2‑3mg、2,4‑二氯苯乙酸2‑3mg、吲哚丁酸0.4‑0.6mg、土豆泥100g、蔗糖20‑25g、琼脂粉5g、余量为水，且增殖培养液的pH为5.8；步骤2，将蝴蝶兰幼苗转移至壮苗培养液中，培养22‑24天，得到蝴蝶兰壮苗；所述壮苗培养液的配方如下，每升壮苗培养液由以下组分制成：复合大量元素1g、复合微量物质1.3‑1.5g、肌醇100mg、蛋白胨2‑3g、活性炭1‑2g、柠檬酸35‑45mg、硝酸铵620‑660mg、硝酸钾170‑180mg、土豆泥40g、香蕉泥35‑45g、蔗糖20‑25g、琼脂粉5g、余量为水，且壮苗培养液的pH为6.0；步骤3，将蝴蝶兰壮苗转移至生长培养液中，自然环境下培养2‑3天，得到用于移栽的蝴蝶兰植株；所述生长培养液的配方如下，每升生长培养液包括以下组分：复合大量元素1g、复合微量物质1.3‑1.5g、肌醇100mg、吲哚丁酸0.65‑0.75mg、蛋白胨2‑3g、活性炭1‑2g、柠檬酸40‑50mg、硝酸铵750mg、硝酸钾170‑180mg、大量元素助剂6mg、土豆泥45g、香蕉泥45g、蔗糖15‑20g、琼脂粉5g、余量为水，且生长培养液的pH为6.0。...

【技术特征摘要】
1.一种蝴蝶兰组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，将蝴蝶兰的花梗腋芽进行消毒后，对花梗腋芽进行切口，然后接种至增殖培养液中，培养12-18天，温度为20-25℃、光照强度1500-2000Lux得到蝴蝶兰幼苗；所述增殖培养液的配方如下，每升增殖培养液包括以下组分：复合大量元素2g、复合微量物质1.3-1.5g、肌醇120-130mg、6-苄基嘌呤2-3mg、2,4-二氯苯乙酸2-3mg、吲哚丁酸0.4-0.6mg、土豆泥100g、蔗糖20-25g、琼脂粉5g、余量为水，且增殖培养液的pH为5.8；步骤2，将蝴蝶兰幼苗转移至壮苗培养液中，培养22-24天，得到蝴蝶兰壮苗；所述壮苗培养液的配方如下，每升壮苗培养液由以下组分制成：复合大量元素1g、复合微量物质1.3-1.5g、肌醇100mg、蛋白胨2-3g、活性炭1-2g、柠檬酸35-45mg、硝酸铵620-660mg、硝酸钾170-180mg、土豆泥40g、香蕉泥35-45g、蔗糖20-25g、琼脂粉5g、余量为水，且壮苗培养液的pH为6.0；步骤3，将蝴蝶兰壮苗转移至生长培养液中，自然环境下培养2-3天，得到用于移栽的蝴蝶兰植株；所述生长培养液的配方如下，每升生长培养液包括以下组分：复合大量元素1g、复合微量物质1.3-1.5g、肌醇100mg、吲哚丁酸0.65-0.75mg、蛋白胨2-3g、活性炭1-2g、柠檬酸40-50mg、硝酸铵750mg、硝酸钾170-180mg、大量元素助剂6mg、土豆泥45g、香蕉泥45g、蔗糖15-20g、琼脂粉5g、余量为水，且生长培养液的pH为6.0。2.根据权利要求1所述的蝴蝶兰组织培养方法，其特征在于，所述每升增殖培养液中还含有3g的椰子浸汁；每升生长培养液中还含有10g的椰子浸汁；每升所述椰子浸汁按照以下方法制备：将椰子去皮、...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨录军，王俊，赵玉安，杨书才，冯建，将拴丽，
申请(专利权)人：郑州市农林科学研究所，
类型：发明
国别省市：河南,41