The invention discloses a reagent kit and RT PCR method for detection of peripheral blood lymphocytes in a HIV real-time fluorescent quantitative usRNA, real-time fluorescence quantitative HIV kit usRNA a peripheral blood lymphocytes, including RT mix, PCR enzyme mixture, probe and primer set, the quality control, the primers consisting of nucleotide sequence of SEQ ID No.1, SEQ ID No.2, SEQ No.3, SEQ ID ID No.4, the probe is a nucleotide sequence of SEQ ID No.5. The invention can realize the peripheral blood lymphocytes in HIV usRNA rapid detection, detection sensitivity, the application is convenient.
【技术实现步骤摘要】
一种外周血淋巴细胞中HIVusRNA实时荧光定量的试剂盒及其RT-PCR检测方法
本专利技术涉及分子生物
,尤其是涉及一种外周血淋巴细胞中HIVusRNA实时荧光定量的试剂盒及其RT-PCR检测方法。
技术介绍
血浆中游离病毒颗粒的浓度(血浆病毒载量),由每毫升血浆的病毒RNA的拷贝数表示,其可以通过PCR方法可靠地定量,并一直作为HIV-1病毒复制的传统生物标志物。抗逆转录病毒治疗的主要目标是为了减少血浆病毒载量,通过抑制病毒复制降低血浆中的病毒量,并使其低于临床上大多数敏感的检测方法可以检出的标准,并使治疗保持这种标准。在大多数接受并坚持抗逆转录病毒治疗的HIV-1感染者中,这个目标已经实现了,因此血浆中的病毒载量比较低,甚至低于于可检测到的限度。就算经过了最好的治疗,大部分患者体内仍残留低水平的病毒拷贝。由于低水平的血浆病毒检测具有挑战性,因此并不清楚低水平的病毒血症是否能够对长期治疗产生反应,新的诊断标志物的出现也就十分必要。而细胞相关的HIV-1RNA在感染HIV进行抗逆转录治疗的病人中被认为是具有潜力的诊断标志物。多于40种不同的病毒RNA由整合 ...
【技术保护点】
一种外周血淋巴细胞中HIV usRNA实时荧光定量的试剂盒,其特征在于:包括RT‑PCR mix、酶混合液、引物组、探针和质控品,所述引物组由核苷酸序列SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4组成,所述HIV usRNA‑F1上游引物具有SEQ ID No.1的核苷酸序列;所述HIV usRNA‑F2上游引物具有SEQ ID No.3的核苷酸序列;所述HIV usRNA‑R1下游引物具有SEQ ID No.2的核苷酸序列;所述HIV usRNA‑R2下游引物具有SEQ ID No.4的核苷酸序列;所述探针具有SEQ ID ...
【技术特征摘要】
1.一种外周血淋巴细胞中HIVusRNA实时荧光定量的试剂盒,其特征在于:包括RT-PCRmix、酶混合液、引物组、探针和质控品,所述引物组由核苷酸序列SEQIDNo.1、SEQIDNo.2、SEQIDNo.3、SEQIDNo.4组成,所述HIVusRNA-F1上游引物具有SEQIDNo.1的核苷酸序列;所述HIVusRNA-F2上游引物具有SEQIDNo.3的核苷酸序列;所述HIVusRNA-R1下游引物具有SEQIDNo.2的核苷酸序列;所述HIVusRNA-R2下游引物具有SEQIDNo.4的核苷酸序列;所述探针具有SEQIDNo.5的核苷酸序列。2.根据权利要求1所述的外周血淋巴细胞中HIVusRNA实时荧光定量的试剂盒,其特征在于:所述质控品包括阳性质控品和阴性质控品,所述阳性质控品为假病毒,所述阴性质控品为生理盐水。3.根据权利要求1所述的外周血淋巴细胞中HIVusRNA实时荧光定量的试剂盒,其特征在于:所述的RT-PCRmix包含Tris-MOPS-柠檬酸钠缓冲体系、硫酸铵和氯化钾。4.根据权利要求3所述的外周血淋巴细胞中HIVusRNA实时荧光定量的试剂盒,其特征在于:所述Tris-MOPS-柠檬酸钠缓冲液为3-(N-吗啉)丙磺酸、Tris和柠檬酸三钠相互混合而成;所述3-(N-吗啉)丙磺酸:Tris:柠檬酸三钠的摩尔比为20-100:10-50:1-5。5.权利要求1所述的外周血淋巴细胞中HIVusRNA实时荧光定量的试剂盒的PCR扩增体系,其特征在于:...
【专利技术属性】
技术研发人员:王星,张晓玮,彭春梅,张嘉,邓可基,李海茵,谢丽娟,李家导,乐小炎,林志豪,罗园香,张新,陈观芝,陈凤英,林敏深,石壮壮,林若琳,王法,余培煜,莫静嫣,
申请(专利权)人:广州海力特生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:广东,44
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