一种检测猪外周血和脾脏淋巴细胞膜表面分子的样品制备试剂盒及其制备方法技术

本发明专利技术公开一种适用于流式细胞术检测猪外周血和脾脏淋巴细胞膜表面分子的样品制备试剂盒及其制备方法。其中，所述的制备方法将猪的外周血或脾脏获取生物样品并制成细胞粗提混悬液；将粗提液转入离心管后，加入红细胞裂解液经冰浴裂解红细胞，离心除去上清，收集沉淀细胞；用缓冲液I重悬细胞，并计数细胞；用缓冲液II重悬细胞，并加入荧光素标记的细胞膜表面抗体，冰浴30min；再用缓冲液I洗涤细胞后，将细胞悬浮于缓冲液III。本发明专利技术所制备的样品可在常温保存或长途运输以备流式细胞仪的检测，检测结果高效而稳定。

【技术实现步骤摘要】
一种检测猪外周血和脾脏淋巴细胞膜表面分子的样品制备试剂盒及其制备方法
本专利技术涉及猪外周血和脾脏淋巴细胞膜表面分子的流式细胞检测技术，特别提供了适用于条件较差的基层猪场实验室的流式细胞样品制备方法。
技术介绍
我国是猪肉生产和消费的大国。在国际上，我国生猪存栏量、屠宰量以及猪肉产量已多年占据世界首位。国家统计局数据显示，2012年我国猪肉产量5335万吨，同比增长5.6％。我国养殖业在世界有着举足轻重的地位。自80年以来，中国养猪业进入了由农户养猪向集约化和产业化转型期，养猪科学技术也取得了长足的进步。然而，养猪业也正面临着猪病和食品安全的极度困扰。由于猪病流行日趋复杂化以及科学养猪理念的深入人心，越来越多的规模化猪场开始筹备建立兽医实验室来有效监控猪病，为猪群的保健提供技术支持。但是典型的猪场实验室只能完成大体病理学解剖，显微镜检验，血清学检验和简单的生化检测。而多数流行性疾病的诊断，疫苗免疫效果检测和饲用添加剂功效检验等尚需做细胞免疫反应相关指标的检验，该检验的常规仪器——流式细胞仪属于高端科研型仪器，绝大多数基层实验室都尚未配备，限制了细胞学检验的有效实施。流式细胞术是一种基本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种适用于流式细胞术检测猪外周血和脾脏淋巴细胞膜表面分子的样品制备试剂盒，包括缓冲液I、缓冲液II和缓冲液III，所述缓冲液I为含100?800U/ml青霉素，100?800μg/ml链霉素，1?8μg/ml两性霉素B的PBS缓冲液，pH值为7.2?7.4；所述缓冲液II为含2mMEDTA,0.2%?0.6%BSA，100?800U/ml青霉素，100?800μg/ml链霉素，1?8μg/ml两性霉素B的PBS缓冲液，pH值为7.2?7.4；所述缓冲液III为含0.1%NaN3，1%?5%多聚甲醛的PBS缓冲液，pH值为7.2?7.4。

【技术特征摘要】
1.一种适用于流式细胞术检测猪外周血和脾脏淋巴细胞膜表面分子的样品制备试剂盒，包括缓冲液I、缓冲液II和缓冲液III，所述缓冲液I为含100-800U/ml青霉素，100-800μg/ml链霉素，1-8μg/ml两性霉素B的PBS缓冲液，pH值为7.2-7.4；所述缓冲液II为含2mMEDTA,0.2％-0.6％BSA，100-800U/ml青霉素，100-800μg/ml链霉素，1-8μg/ml两性霉素B的PBS缓冲液，pH值为7.2-7.4；所述缓冲液III为含0.1％NaN3，1％-5％多聚甲醛的PBS缓冲液，pH值为7.2-7.4。2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述缓冲液I为含500U/ml青霉素，500μg/ml链霉素，5μg/ml两性霉素B的PBS缓冲液，pH值为7.2-7.4；所述缓冲液II为含2mMEDTA,0.5％BSA，500U/ml青霉素，500μg/ml链霉素，5μg/ml两性霉素B的PBS缓冲液，pH值为7.2-7.4；所述缓冲液III为含0.1％NaN3，2％多聚甲醛的PBS缓冲液，pH值为...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏华荔，王安如，
申请(专利权)人：北京大北农科技集团股份有限公司，浙江大北农农牧科技有限公司，漳州大北农农牧科技有限公司，
类型：发明
国别省市：