利用磁珠分离人外周血中CD4+和CD25+淋巴细胞的方法技术

本发明专利技术公开了分离富集外周血中CD4+和CD25+调节性淋巴细胞的方法，更好地为CD4+和CD25+调节性淋巴细胞进行后续研究提供基础，涉及生物医学领域。方法包括多臂井星聚合物与鼠抗人CD4+或CD25+单克隆抗体共价偶联、鼠抗人CD4+或CD25+单克隆抗体修饰的多臂井星聚合物再包被长链生物素分子、鼠抗人CD4+或CD25+单克隆抗体和长链生物素共修饰的多臂井星聚合物捕获外周血样品中的CD4+和CD25+淋巴细胞、链霉亲和素修饰的纳米磁珠识别并偶联外周血中长链生物素化多臂井星聚合物、被捕获CD4+和CD25+淋巴细胞的分离及重悬等步骤。重悬液可以直接进行后续分析，与传统的细胞分离方法相比，该方法更适用于在复杂外周血样品中对CD4+和CD25+淋巴细胞进行磁分离，提高了外周血样品中CD4+和CD25+淋巴细胞分离效率。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
利用磁珠分离人外周血中CD4+和CD25+淋巴细胞的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）每取1.0?mg多臂井星聚合物溶解于2?mL，0.02?M，pH?6.5?PBS，加入0.6?mg?NHSS，0.4?mg?EDC，室温置于混匀仪上搅拌，活化15?min；取2.1?mg?鼠抗人CD4+抗体加入上述反应液中，室温置于混匀仪上搅拌30?min；将上述溶液减压旋干溶剂，去离子水溶解，在PBS和去离子水中透析1?d；透析结束将得到的溶液冷冻干燥得多臂井星聚合物?鼠抗人CD4+抗体复合物；（2）每取1.0?mg多臂井星聚合物溶解于2?mL，0.02?M，pH?6.5?PBS，加入0.6?mg?NHS...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：许恒毅，魏华，熊勇华，赖卫华，
申请(专利权)人：南昌大学，
类型：发明
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