从菌丝体中分离纯化他克莫司的方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种从菌丝体中分离纯化他克莫司的方法及应用。本发明专利技术通过用亲水型离子液体溶解筑波链霉菌菌丝体，再用有机溶剂萃取除去脂肪和脂肪酸等成分。然后采用疏水型离子液体－亲水型离子液体两相萃取的方法，将他克莫司等成分转移到疏水离子液体相中。最后通过超临界CO

Method and application for separating and purifying tacrolimus from mycelium

The invention discloses a method for separating and purifying tacrolimus from a mycelium and its application. The present invention dissolves the mycelium of Tsukuba Streptomyces by using hydrophilic ionic liquid, and extracts the components of fat and fatty acid by organic solvent extraction. Then, the method of two-phase extraction of hydrophobic ionic liquid hydrophilic ionic liquid was used to transfer tacrolimus and other components into hydrophobic ionic liquid phase. Finally, through supercritical CO

【技术实现步骤摘要】
从菌丝体中分离纯化他克莫司的方法及应用
本专利技术属于化合物分离纯化领域，特别涉及一种从菌丝体中分离纯化他克莫司的方法及应用。
技术介绍
他克莫司(英文：Tacrolimus)，是从链霉菌Streptomycestsukubaensis中分离出的23元大环内酯类抗生素。化学式：C44H69NO12·H2O，3S-[3R[E(1S，3S，4S)]，4S，5R，8S，9E，12R，14R，15S，16R，18S，19S，26aR]]-5，6，8，11，12，13，14，15，16，17，18，19，24，25，26，26a-十六氢-5，19-二羟基-3-[2-(4-羟基-3-甲氧基环已基)-1-甲基乙烯基]-14，16-二甲氧基-4，10，12，18-四甲基-8-(2-丙烯基)-15，19-环氧-3H-吡啶并[2，1-c][1，4]氧杂氮杂环二十三碳烷-1，7，20，21(4H，23H)-四酮－单水合物。纯品他克莫司无色棱状结晶，熔点127～129℃；其易溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿或乙醚，难溶于己烷或石油醚，不溶于水。以他克莫司为主要原料的药物具有高度免疫抑制活性，主要通过抑制本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从菌丝体中分离纯化他克莫司的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将筑波链霉菌菌丝体与亲水型离子液体混合；常压下惰性气体氛围中或者真空环境下加热搅拌，加热条件为于40～90℃反应0.5～5小时；(2)步骤(1)反应后的菌丝体－亲水型离子液体溶液与有机溶剂A混合，进行萃取；(3)使用疏水型离子液体与步骤(2)萃取后的菌丝体－亲水型离子液体溶液混合，常压惰性气体氛围中或者真空环境下加热搅拌，加热条件为于40～90℃反应0.5～5小时，然后静置分层，取疏水相，回收含亲水型离子液体的亲水相；(4)使用超纯水对步骤(3)的疏水相进行水洗；(5)对步骤(4)水洗后的疏水相中的他克莫斯成分进行超临界CO

【技术特征摘要】
1.一种从菌丝体中分离纯化他克莫司的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将筑波链霉菌菌丝体与亲水型离子液体混合；常压下惰性气体氛围中或者真空环境下加热搅拌，加热条件为于40～90℃反应0.5～5小时；(2)步骤(1)反应后的菌丝体－亲水型离子液体溶液与有机溶剂A混合，进行萃取；(3)使用疏水型离子液体与步骤(2)萃取后的菌丝体－亲水型离子液体溶液混合，常压惰性气体氛围中或者真空环境下加热搅拌，加热条件为于40～90℃反应0.5～5小时，然后静置分层，取疏水相，回收含亲水型离子液体的亲水相；(4)使用超纯水对步骤(3)的疏水相进行水洗；(5)对步骤(4)水洗后的疏水相中的他克莫斯成分进行超临界CO2萃取，收集萃取物，回收含疏水型离子液体的溶剂；萃取物干燥后用有机溶剂B溶解，得到萃取物溶液；(6)将液态二氧化碳和步骤(5)的萃取物溶液同时注入超临界CO2反应器的顶部，通过雾化的方法喷入反应腔反应；二者在反应腔内充分混合后流过底部的筛板沉淀器，收集聚集在沉淀器的他克莫司结晶，得到他克莫司；步骤(2)中所述的有机溶剂A为己烷和石油醚中的一种或两种；步骤(5)中所述的有机溶剂B为二甲基亚砜或乙腈。2.根据权利要求1所述的从菌丝体中分离纯化他克莫司的方法，其特征在于还包括如下步骤：将步骤(3)回收的含亲水型离子液体的亲水相和步骤(5)中回收的含疏水型离子液体的溶剂经过真空干燥和活性炭吸附处理后，分别得到能重复利用的亲水型离子液体和疏水型离子液体。3.根据权利要求1所述的从菌丝体中分离纯化他克莫司的方法，其特征在于：步骤(2)中所述的亲水型离子液体中的阳离子为1-甲基-3-甲基咪唑、1-甲氧基-3-甲基咪唑、1-羧甲基-3-甲基咪唑、1-乙基-3-甲基咪唑、1-乙烯基-3-甲基咪唑、1-羟乙基-3-甲基咪唑、1-乙氧基-3-甲基咪唑、1-羧乙基-3-甲基咪唑、1-乙酸乙酯基-3-甲基咪唑、1-氨乙基-3-甲基咪唑、1-丙基-3-甲基咪唑、1-氨丙基-3-甲基咪唑、1-腈丙基-3-甲基咪唑、1-烯丙基-3-甲基咪唑、1-丁基-3-甲基咪唑、1-戊基-3-甲基咪唑、1-己基-3-甲基咪唑、1-辛基-3-甲基咪唑、1-甲基-2、3-二甲基咪唑、1-甲氧基-2、3-二甲基咪唑、1-羧甲基-2、3-二甲基咪唑、1-乙基-2、3-二甲基咪唑、1-乙烯基-2、3-二甲基咪唑、1-羟乙基-2、3-二甲基咪唑、1-乙氧基-2、3-二甲基咪唑、1-羧乙基-2、3-二甲基咪唑、1-乙酸乙酯基-2、3-二甲基咪唑、1-氨乙基-2、3-二甲基咪唑、1-丙基-2、3-二甲基咪唑、1-氨丙基-2、3-二甲基咪唑、1-腈丙基-2、3-二甲基咪唑、1-烯丙基-2、3-二甲基咪唑、1-丁基-2、3-二甲基咪唑、1-戊基-2、3-二甲基咪唑、1-己基-2、3-二甲基咪唑和1-辛基-2、3-...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴振强，田霄飞，
申请(专利权)人：华南理工大学，
类型：发明
国别省市：广东,44