猪牙皂总皂苷及其制备方法与其在制备药物中的应用技术

一种抗免疫性炎症的猪牙皂总皂苷，其特征在于：按重量百分比计，含有总三萜皂苷５０－９５％，该总三萜皂苷主要为齐墩果烷型三萜皂苷化合物。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及中药猪牙皂总皂苷及其制备方法，以及该总皂苷在制备治疗免疫性炎症药物中的应用，具体为提取分离猪牙皂总皂苷，用于制备治疗鼻炎和类风湿关节炎的药物。
技术介绍
鼻炎和类风湿关节炎为临床常见病和多发病，鼻炎的发生主要与过敏反应有关，而类风湿关节炎属于自身免疫性疾病，两者均属于免疫性炎症的范畴。目前，治疗鼻炎主要采用特非那丁等抗组胺药物或曲尼司特、酮替芬等抗过敏药物，这些药物对鼻炎的慢性化和反复发作疗效较差或无效。对于类风湿关节炎，目前主要采用非甾体抗炎药(双氯灭痛、阿司匹林等)和免疫抑制剂(6-巯基嘌呤等)进行治疗，但这些药物均存在明显的不良反应，如前者损伤胃肠道粘膜导致消化性溃疡，后者作用选择性差，易于诱发感染等。因此，有效成分明确、质量可控且安全高效的中药有效部位在研制鼻炎或类风湿关节炎治疗药物方面，具有潜在的价值。猪牙皂为豆科植物皂荚Gleditsia sinensis Lam.已衰或受伤后所结之果实。在中医临床，主要用于治疗中风口噤、喉痹、痰喘、痞满积滞、痈肿、疥癞和头疮等(中药大辞典，上海人民卫生出版社，1977，1144-1147)。猪牙皂富含皂苷类成分，现已从其正丁醇部位分离、鉴定了十余种齐墩果烷型三萜皂苷。迄今为止尚未发现有关猪牙皂皂苷类成分生物活性或临床研究的文献报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是如何利用现代提取分离技术获得中药猪牙皂的有效部位总皂苷，以及研究其在制备抗免疫性炎症药物中的应用，如在治疗鼻炎、类风湿关节炎方面的用途。本专利技术要解决的技术问题还包括研究猪牙皂总皂苷可供工业化生产的制备方法，以及猪牙皂总皂苷的组成，因为在中药提取物中主要化学成分清楚明确有利于工业化生产中进行质量控制，从根本上保证疗效和制剂质量的稳定性。为解决上述技术问题，现提供技术方案如下。一种抗免疫性炎症的猪牙皂总皂苷，其特征在于按重量百分比计，含有总三萜皂苷50-95％，该总三萜皂苷主要为齐墩果烷型三萜皂苷化合物。所述的猪牙皂总皂苷，其特征在于可单独或与其它中药及中药提取物组配，用于制备抗免疫性炎症的药物。所述的猪牙皂总皂苷，其特征在于可与药学上可接受的载体混合，用于制备抗免疫性炎症的药物。前述的猪牙皂总皂苷，其特征在于抗免疫性炎症药物为治疗鼻炎和治疗类风湿关节炎药物。一种抗免疫性炎症猪牙皂总皂苷的制备方法，其特征在于取猪牙皂，以乙醇提取，将提取液减压回收至无醇味，得乙醇提取物；在该乙醇提取物中，加入乙醇至含醇量为5-15％，离心后取上清液，上样于D101型大孔吸附树脂柱，再分别以水和不同浓度乙醇梯度洗脱，收集60％乙醇洗脱物，回收溶剂后得猪牙皂总皂苷；或者，取上述乙醇提取物，先用氯仿萃取，再以正丁醇萃取，收集正丁醇萃取液，回收溶剂后得猪牙皂总皂苷。所述方法的特征为30-95％的乙醇提取1-4次，每次提取溶剂用量为6-7ml/g药材，提取时间为1-3小时，合并乙醇提取液，减压回收至无乙醇味，得乙醇提取物；取乙醇提取物，加入适量乙醇，调整乙醇浓度至12％，经离心，上清液上样于D101型大孔吸附树脂柱，分别以水、15％乙醇、30％乙醇和60％乙醇洗脱，合并60％乙醇洗脱物，减压回收，得到的干浸膏状物即为猪牙皂总皂苷；或者，取乙醇提取物，用氯仿萃取1-3次，每次使用溶剂量为500ml/1kg药材，然后再用500ml/1kg药材的正丁醇萃取1-5次，合并正丁醇萃取液，减压回收溶剂，得到的干浸膏状物即为猪牙皂总皂苷。前述方法的特征为使用60％的乙醇，乙醇提取次数为3次，提取时间为每次2小时；氯仿萃取次数为3次，正丁醇萃取次数为3次。本专利技术的猪牙皂提取物的较详细的制备方法如下将猪牙皂磨碎成粉末，以30-95％的乙醇提取1-4次，每次提取溶剂用量为6-7ml/g，提取时间为1-3小时，合并乙醇提取液，减压回收至无乙醇味，加入适量乙醇，调整乙醇浓度至15％，经离心，上清液上样于D101型大孔吸附树脂柱，充分吸附后，再分别以水、15％乙醇、30％乙醇和60％乙醇洗脱，合并60％乙醇洗脱物，减压回收，得到的干浸膏状物即为猪牙皂总皂苷。本专利技术的猪牙皂提取物还可以按照下列方法制备得到将猪牙皂磨碎成粉末，以30-95％的乙醇提取1-4次，每次提取溶剂用量为6-7ml/g，提取时间为1-3小时，合并乙醇提取液，减压回收至无乙醇味，用氯仿萃取所得的浓缩液1-3次，每次使用溶剂量为500ml/1kg药材，然后再用500ml/1kg药材的正丁醇萃取1-5次，合并正丁醇萃取液，减压回收溶剂，得到的干浸膏状物即为猪牙皂总皂苷。在上述两种制备方法中，乙醇提取的优选浓度为60％，优选提取次数为3次，优选提取时间为2小时，氯仿的优选萃取次数为3次，正丁醇的优选萃取次数为3次。专利技术人经过深入研究，发现本专利技术猪牙皂总皂苷主要由齐墩果烷型三萜皂苷组成，其中总皂苷的含量为50-95％。在该总皂苷中含有下列8种三萜皂苷化合物，分别以GS-1～GS-8表示。 GS-1R1＝OH R2＝CH2OH R3＝CH3(6′＝S)GS-2R1＝OH R2＝CH3(6＝S) R3＝CH3(6′＝S) GS-4R1＝HR2＝CH(6＝S)R3＝HGS-3R1＝HR2＝CH3(6＝S) R3＝CH2OH GS-5R1＝OH R2＝CH2OH R3＝Gal 本专利技术猪牙皂总皂苷在小鼠的口服LD50为3.428g/kg，该提取物100，200mg/kg口服给药，对抗原(卵白蛋白)和组胺所致大鼠搔抓鼻部、打喷嚏反应及鼻腔血管通透性升高具有抑制作用，因此，可用该总皂苷作活性成分制备治疗鼻炎的药物。本专利技术猪牙皂总皂苷100，200mg/kg口服给药，明显抑制佐剂关节炎大鼠的原发性和继发性足跖肿胀，角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀及醋酸所致小鼠扭体反应，表明该提取物抑制急慢性炎症和疼痛。因此，可用该总皂苷作活性成分制备治疗类风湿关节炎及其它炎症相关性疾病的药物。建议临床患者使用猪牙皂总皂苷的剂量约为200mg/次，一天三次。具体可遵医嘱。本专利技术猪牙皂总皂苷还可以作为活性成分与其它中药提取物/有效部位或与药学上可接受的赋型剂一起用于制备药物组合物，该药物组合物可采用制剂学的常规方法制备成各种剂型，如胶囊、片剂、丸剂、口服液、颗粒剂、酊剂等胃肠道给药剂型及注射液等胃肠外给药剂型。方法称取猪牙皂粗粉1kg，加入60％乙醇6.5L，加热回流2小时，重复三次，合并乙醇提取液，减压回收至无乙醇味，得到浓缩液，用500ml氯仿萃取所得的浓缩液3次，然后再用500ml的正丁醇萃取3次，合并正丁醇萃取液，减压回收溶剂，得到的干浸膏状物164g。常规定性实验后，经紫外分光光度法测定，该干浸膏中含有60.5％的皂苷类成分。实例2、本专利技术猪牙皂总皂苷的急性毒性昆明种小鼠50只，雌雄各半，体重18～22g，给药前禁食10小时，将50只小鼠随机分为5组，每组10只，取按本专利技术实例1中方法1制备的猪牙皂总皂苷(下同)，分别口服给予5，4.25，3.613，3.071，2.61g/kg，剂间比为1∶0.85，给药体积为0.2ml/10g体重，给药后连续饲养并观察7天，记录各组小鼠的中毒症状和死亡情况，并对死亡小鼠解剖，肉眼观察内脏病变，按Bliss法计算LD50及95％本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：戴岳，叶文才，符麟军，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：