土党参多糖、衍生物及其制备方法和应用技术

土党参多糖及衍生物的制备方法，其特征在于：从药食兼用植物土党参中提取、分离和精制得到的粗多糖，以及组成它的ＣＰＪ－１和ＣＰＪ－２两种纯多糖物质。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种土党参多糖、衍生物及其制备方法和应用；属于药品及保健食品的

技术介绍
多糖为公认的具有调节机体免疫功能的大分子物质，其作用表现为多途径、多环节、多靶点性。研究表明活性多糖不是单独作用于免疫系统，具有调节神经-内分泌-免疫调节网络(NIM)的平衡。在神经、内分泌与免疫系统之间有一个多种神经递质、激素和免疫活性物质构成的完整调节环路，三者相互影响，共同维持体内环境的恒定，其中免疫系统则是这种整体调节的重要组成部分。中药活性多糖(Polysacharides)对机体特异性免疫与非特异性免疫、细胞免疫与体液免疫都有广泛的影响，促进和恢复机体免疫机能作用极其明显。多糖作为生物效应调节剂(BRM)，主要对机体的网状内皮系统(RES)、巨噬细胞(MΦ)、淋巴细胞、白细胞、NK细胞、补体系统以及RNA、DNA、蛋白质的合成和体内的cAMP、cGMP的含量高低产生影响，最终可以促进抗体的生成，使淋巴因子及干扰素的诱生增强，从而达到抗菌、抗病毒、抗寄生虫、抗肿瘤、抗辐射、抗衰老等作用效果(聂伟，张永祥，多糖的免疫调节作用及其作用机制研究进展，中国药理学通报，1999，15(6)484～7；李杰，张楚菁，中药多糖的免疫调节及抗肿瘤近年研究概述，天津药学，2003，15(6)62-4)。已经分离到的天然多糖有100多种，但应用于临床的只有几种，对质量稳定、疗效确切、毒性和不良反应小的多糖的开发，特别是作为药物来应用，意义重大。根据糖类生物学特性的研究结果，有人曾预言，多糖药物有可能对治疗老年痴呆症有效(Thomas.WR，CurrentOpinioninBiotechnology，1998，974-79)。神经生长因子是最有希望发展成为抗老年痴呆症的药物，从中药中寻找具有神经生长因子作用的多糖，具有发展成为预防和治疗老年痴呆症药物的潜力。中药活性多糖对神经细胞有作用的研究报道很少，已有专利报道夹竹桃花多糖具有神经生长因作用(中国专利，申请号99125746，公开号CN 1301774，专利技术名称夹竹桃多糖及其衍生物、制备方法及其应用)；另外，南沙参多糖可改善东莨菪碱所致大鼠学习记忆障碍(张春梅，李新芳，南沙参多糖可改善东莨菪碱所致大鼠学习记忆障碍的研究，中国药理与临床，1002，17(6)19-21)。
技术实现思路
我们在开展民族药中具有神经营养作用的物质研究时从众多植物中筛选出黔产药食兼用植物土党参(金钱豹属植物金钱豹，Campanumoeajavanica Bl.)多糖具有神经生长因子作用，即对神经细胞具有促生长和分化作用，能修复神经细胞损的功能。为此，本专利技术是为了达到以下目的1)提供一种具有神经生长因子作用的土党参多糖及其衍生物。2)提供这种土党参多糖的制备方法和途径，它是由土党参的块根中提取、分离、纯化而得。3)提供土党参多糖的衍生物的制备方法土党参多糖经硫酸化和羧甲基化而得。4)提供土党参多糖在药物中的应用预防和治疗老年痴呆症、中风、儿童智力低下、记忆功能障碍和减退等疾病。5)提供土党参多糖在保健食品中的应用改善记忆功能障碍，促进或提高学习记忆，作为脑保护剂。本专利技术是这样构成的土党参多糖及衍生物的制备方法从药食兼用植物土党参中提取、分离和精制得到的粗多糖，以及组成它的CPJ-1和CPJ-2两种纯多糖物质。具体的制备方法是，由土党参的块根提取分离土党参多糖，其步骤如下a.粗多糖的提取制备将土党参的块根用酒精回流除杂、石油醚脱脂后，经蒸馏水热提，提取物除去蛋白、脱色后再醇沉后可得土党参粗多糖。b.多糖的纯化和精制将步骤a中提取制备得到的粗多糖经DEAE纤维素柱层析以及SepharoseCL-6B和Sephadex G-25凝胶柱层析后得土党参多糖的纯物质CPJ-1和CPJ-2。本专利技术中，将得到的土党参多糖进行磺酸化和羧甲基化，从而得到土党参多糖的衍生物。所述土党参多糖及其衍生物对神经细胞有明显的促生长、分化作用和能明显修复损伤的神经细胞功能。所述土党参多糖及其衍生物的应用将土党参多糖及其衍生物制备成适宜的给药剂型，应用在制备预防和治疗神经退行性疾病如老年痴呆症、学习记忆障碍、儿童智力低下、中风等疾病的药物中。所述土党参多糖及其衍生物的应用还可以是将土党参多糖及其衍生物应用在制备改善记忆功能障碍，促进或提高学习记忆，作为脑保护剂的保健食品中。本专利技术中(1)具有神经生长因子作用的土党参多糖及其衍生物，包括土党参粗多糖、纯多糖组份及其硫酸化和羧甲基化物。(2)土党参多糖的制备方法和途径。从土党参(桔梗科金钱豹属植物金钱豹Campanumoeajavanica Bl.)的块根提取、除蛋白、脱色后再醇沉后可得土党参粗多糖，再对粗多糖经分离、DEAE纤维素柱层析以及SepharoseCL-6B和Sephadex G-25凝胶柱层析分离纯化克的纯多糖组份。(3)将土党参多糖经硫酸化和羧甲基化后可得其相应衍生物。(4)将土党参多糖及其衍生物应用在预防和治疗老年痴呆症、中风、儿童智力低下、记忆功能障碍和减退等疾病的药物中。其服用方式可以是口服、静脉注射、输液等，可以是片剂、胶囊、粉针、注射液、大输液等适宜的给药剂型，其中也可使用惰性辅加剂和赋形剂。其他应用方法可以是现行的常规方法。(5)土党参多糖及其衍生物在保健食品中的应用改善记忆功能障碍，促进或提高学习记忆，作为脑保护剂。其服用方式可以是口服或其他现行的方法。为了达到更佳的效果，本专利技术优选如下技术方案一、土党参多糖的制备方法土党参多糖来源于黔产金钱豹属植物金钱豹(也可以是其它产地)的块根，其制备步骤如下1、提取和分离将土党参的块根用酒精回流除杂、石油醚脱脂后，经蒸馏水热提，过滤，浓缩，除蛋白、脱色后再经醇沉，可得土党参出多糖(详见图1)。2、多糖的纯化和精制将步骤1中提取制备得到的粗多糖进行二乙氨基乙基纤维素(DEAE)柱层析，先经蒸馏水洗脱，再经0.1mol/LNaCl溶液洗脱。蒸馏水洗脱部分经浓缩、透析、醇沉后过滤得粉末A；NaCl溶液洗脱部分经浓缩、透析、醇沉后过滤得粉末B。粉末A和粉末B经SepharoseCL-6B和Sephadex G-25凝胶柱层析后分别得到土党参多糖纯组份，命名为CJP-1和CJP-2(详见图2)。二、多糖组份的纯度、理化性质、光谱分析、气相色谱分析和分子量多糖组份CJP-1和CJP-2经常规方法如全甲基化，全水解，分子量测定，核磁共振，红外光谱等化学和光谱方法证明为多糖结构。(1)多糖组份纯度的确证将上述获得的土党参多糖组份CJP-1和CJP-2以0.2mol/LNaCl溶液为流动相，流速为0.52ml/min经Sepharose CL-6B凝胶柱层析进行纯度分析，测得多糖组份CJP-1和CJP-2均为单一对成峰，故CJP-1和CJP-2为单一纯品。(2)土党参多糖组份的理化性质CJP-1为白色结晶，坚硬，易吸潮。不易溶于冷水，易溶于热水，不溶于高浓度乙醇、丙酮、正丁醇等有机溶剂，完全溶解后水溶液呈透明状。碘—碘化钾反应呈阴性，说明不含淀粉，硫酸苯酚反应呈阳性，表示有糖存在。CJP-2为白色粉末状固体，易吸潮，不易溶于冷水，极易溶于热水，不溶于高浓度乙醇、丙酮、正丁醇等有机溶剂；完全溶解后水溶液呈半透明状，碘—碘化本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨小生，张占军，杨再昌，朱海燕，
申请(专利权)人：贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室，
类型：发明
国别省市：