因子Xa抑制剂制造技术

本发明专利技术提供了能够特异性抑制因子Ｘａ活性的化合物。该化合物由结构Ｘ１－ＹＩＲ－Ｘ２组成，其中Ｘ＃－［１］为Ｈ、酰基、烷基、酰烷基、芳烷基或一种或多种氨基酸，Ｘ＃－［２］为经修饰的Ｃ－末端基团、一种或多种羧基保护基团或一个或多个氨基酸或它们的替代物，Ｙ、Ｉ和Ｒ分别为酪氨酸、异亮氨酸和精氨酸，或是具有与Ｙ、Ｉ和Ｒ同样功能活性的肽解模拟物或有机结构物。另外，本发明专利技术提供了一种结构为Ａ＃－［１］－Ａ＃－［２］－（Ａ＃－［３］）＃－［ｍ］－Ｂ，其中ｍ是０或１的化合物。本发明专利技术的化合物可以是线型的或环状的，链长可以为约２—４３个残基。一定程度说，本发明专利技术化合物的特征在于该化合物能够特异性地抑制因子Ｘａ的活性，其ｋｉ≤１００μＭ，优选≤２ｎＭ，并且基本上不会抑制凝血链中所涉及到的其它蛋白酶的活性。本发明专利技术还提供了特异性抑制因子Ｘａ活性的方法，在体外及个体内抑制血凝的方法，以及测定因子Ｘａ水平或活性的方法。（*该技术在2015年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

概括地说，本专利技术涉及的是凝血蛋白抑制剂，更具体地说，本专利技术涉及的是凝血酶因子Xa的特异性抑制剂。
技术介绍
形成凝血的能力对于生存来说是至关重要的。但是，当处于某些病症状态时，在循环系统内形成凝血这本身却是一种发病源。因此，有时可能会要求防止出现血块形成这一现象，然而，又不希望完全抑制凝血系统，因为这样一来会出现威胁生命的大出血现象。为了减少血管内的凝血形成，本领域技术人员一直在试图研制出一种凝血酶原酶或因子Xa的有效抑制剂，把这种抑制剂结合到凝血酶原酶复合物上，从而在凝血过程中激活凝血酶。一旦达到凝血酶的阈值浓度，适当浓度的因子Xa抑制剂就会提高诱发凝血所要求的形成凝血酶原酶试剂的水平，但又不会过渡延长凝血过程。尽管长期以来存在着对这种抑制剂的需求，但直到目前为止，临床应用上仍然尚无有效的特异性因子Xa抑制剂。在许多临床应用中，十分需要抗凝血剂治疗处理。而目前使用的药物在许多特定临床应用中是不能令人满意的。例如，将近50％的整体髋骨复位患者发展为深度静脉血栓形成(DVT)。目前批准使用的治疗方法包括定剂量低分子量肝素法和变剂量肝素法。即使采用了这些药物疗法，仍有10％-20％的患者发展为DVT，5％-10％的患者发展为出血并发症。需要有效抗凝血剂的另一类临床情形是指实施横腔(transluminal)冠状血管成形术、处于心肌梗塞形成危险或出现逐渐增强性心绞痛的情况。目前普遍接受的治疗方法是给予肝素和阿司匹林，在24小时治疗过程内6％-8％的突发性脉管闭合症与此治疗方法有关。另外，因使用肝素而需要输液治疗的出血并发症所占的比率大约为7％。此外，尽管认为延迟闭合症是有意义的，但疗程终止后继续给予肝素已价值不大，并可能是有害的。最广泛使用的凝血抑制剂是肝素和有关的硫酸化多糖、LMWH和硫酸肝素。这些分子通过促进凝血过程中的天然调节剂、抗凝血酶III与凝血酶和因子Xa的结合而发挥着它们的抗凝血作用。肝素的抑制活性主要是针对凝血酶的，后者的失活作用比因子Xa要快100倍左右。虽然相对于肝素而言，硫酸肝素和LMWH是更有效的Xa和凝血酶抑制剂，而且作为Xa抑制剂又比凝血酶抑制剂稍有效些，但体外差别并不很大(3-30倍)，对体内的作用来说是毫无意义的。水蛭素和hirulog是目前临床试验用的另外两种凝血酶特异性抗凝血剂。但是，这些抑制凝血酶的抗凝血剂也与出血并发症有相关性。对狒狒和狗所做的临床前期研究表明，因子Xa的特异性抑制剂能够防止凝血形成，不会产生使用直接凝血酶抑制剂所观察到的那种出血副作用。这类因子Xa抑制剂包括如2，7-双-(4-脒基亚苄基)-环庚酮和Nα-甲苯磺酰基甘氨酰-3-脒基苯丙氨酸甲酯(“TENSTOP”)，它们的有效抑制浓度(Ki)分别为约20nM和800nM。(+)-(2s)-2-(4({(3s)-1-亚氨代乙酰基-3-吡咯烷基}氧基)苯基)-3-(7-脒基-2-萘基)丙酸也代表一类因子Xa抑制剂(Katakure等人，Biochem.Biophys.Res.Comm.197965-972(1993))。但是迄今为止这些化合物尚未在临床上进行开发。另外，因子Xa的特异性蛋白质抑制剂已经得到确认，它们包括如antistasin(“ATS”)和蜱抗凝血剂肽(“TAP”)。ATS是由水蛭(Haememterin officinalis)分离得到的，含有119个氨基酸，对因子Xa的Ki为约0.05nM。TAP是由蜱(Ornithodoros moubata)分离得到的，含有60个氨基酸，对因子Xa的Ki为约0.5nM。业已在大量动物模型系统中研究了重组产生的ATS和TAP的效果。这两种抑制剂相对于其它抗凝血剂而言均可减少出血时间，并且在促凝血酶原激酶诱导的结扎颈静脉的深度静脉血栓形成模型中能够防止血凝现象。该模型达到的结果与当前选用的药物肝素所获得的结果是相互关联的。还发现，皮下ATS在促凝血酶原激酶诱导的播散性血管血凝(DIC)模型中是一种有效的治疗剂。TAP能够有效地防止“高剪切”动脉血栓形成和“流速降低”，这两种现象均是由于外科手术放置聚酯(“DACRON”)移植物引起的，所说的移植物的放置剂量能够达到临床上可接受的延长激活部分促凝血酶原激酶时间(aPTT)，即小于大约2倍的延时。相比之下，即使给予增加aPTT5倍剂量的标准肝素，仍不能防止血栓形成和移植物内的流速降低。aPTT是一种对凝血酶抑制剂特别敏感的临床凝血分析值。ATS和TAP一直未能进行临床开发。这两种抑制剂的一个主要缺点是，需要重复剂量给药，由此产生使之失效的抗体，限制它们在临床上的有效应用。另外，TAP和ATS的大小不可能口服给药，进一步限制了能够受益于这些药剂的患者人数。因子Xa特异性抑制剂在医药实践中具有实际应用价值。具体而言，因子Xa抑制剂在当前可选择的药物，即肝素和有关的硫酸化多糖这样的环境下是有效的，后两种是无效或仅仅勉强有效。因此，需要有一种有效的，不会引起不期望副作用的，低分子量的因子Xa特异性凝血抑制剂。本专利技术满足了这一需求，并带来了相应的优点。专利技术概述本专利技术提供了具有特异性抑制因子Xa活性的化合物。本专利技术的化合物具有结构X1-Y-I-R-X2，其中X1为氢(H)、酰基、烷基或芳基烷基、或者一种或多种氨基酸，X2为修饰的C-末端基团，一种或多种羧基保护基团(见下文)，一种或多种氨基酸，或其它的取代基团，Y、I和R分别为氨基酸酪氨酸、异亮氨酸和精氨酸，以及分别具有酪氨酸、异亮氨酸和精氨酸同样功能活性的肽分解模拟(peptidomimetic)结构或有机结构。另外。本专利技术的化合物具有如本文所定义的结构A1-A2-(A3)m-B。本专利技术的化合物可以是线型的或环状的，长度为约2-43个残基，N-末端或C-末端或两者均可被修饰。这些化合物具有因子Xa特异性抑制活性，Ki≤100μM，优选Ki≤2nM，并且基本上不会抑制包括在凝血链中的其它蛋白酶的活性。这些化合物的具体实例包括Ac-Tyr-Ile-Arg-Leu-Ala-NH2、Ac-Tyr-Ile-Arg-Leu-Pro-NH2、Ac-(iBu)Tyr-Ile-Arg-Leu-Pro-NH2、Ac-Tyr-Ile-Arg-N(CH3)O(CH3)、Ac-Tyr-{ψ(CH2NH)}-Ile-Arg-Leu-Pro-NH2(其中“ψ”表示假肽键，可以是如“(CH2NH)”所示的还原键；假肽键用括号中的“ψ”即“{ψ}”表示)、Ac-Tyr-Ile-Arg-NH-CH2(4-吡啶基)、Ac-Tyr-Ile-{ψ(CH2NH)}-Arg-Leu-Pro-NH2、Ac-Tyr-Chg-Arg(NO2)-{ψ(CH2NH)}-Leu-NH2、Ac-Tyr-Ile-Arg-{ψ(COCH2)}-Gly-Pro-NH2、Ac-Tyr-Ile-Dab(Nγ-C3H7N)-Leu-Ala-NH2、Ac-Tyr-Ile-PalMe(3)-NH2、Tyr-Ile-Arg-NH2、(D)-Tyr-Ile-Arg-Leu-Pro-NH2、Ac-(Bzl)Gly-(Chx)Gly-(3-胍基丙基)Gly-NH2、环(Gly-Tyr-Ile-Arg-Gly)、Tfa-(iBu)T本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种特异性抑制因子Ｘａ活性的化合物，该化合物具有通式Ａ１－Ａ２－（Ａ３）↓［ｍ］－Ｂ，其中ｍ为０或１； Ａ１为Ｒ↓［１］－Ｒ↓［２］－Ｒ↓［３］；Ａ２为Ｒ↓［４］－Ｒ↓［５］－Ｒ↓［６］；Ａ３为Ｒ↓［７］－Ｒ↓［８］－Ｒ↓［９］； 其中Ｒ↓［１］选自于： ｉ）．１－２０个氨基酸； ｉｉ）．＊＊＊和 ｉｉｉ）．＊＊＊； 其中的Ｘ选自Ｎ、ＣＨ和ＮＣ＝Ｏ，以及 Ｒ′↓［１］和Ｒ″↓［１］分别选自Ｈ、烷基、酰基、芳基、芳烷基和氨基保护基团， Ｒ↓［１］可以被取代基取代； Ｒ↓［２］为－ＣＲ↓［９９］Ｒ↓［１００］－，其中Ｒ↓［９９］和Ｒ↓［１００］分别选自Ｈ、烷基、芳烷基、杂芳烷基和杂芳基，并且Ｒ↓［９９］和Ｒ↓［１００］可分别被取代基取代； Ｒ↓［３］选自－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ↓［２］－、－ＣＨＲ↓［９９］－Ｃ（Ｏ）－和－Ｃ（Ｏ）－ＮＲ↓［３５］－ＣＨ↓［２］－Ｃ（Ｏ）－，其中Ｒ↓［３５］为桥连基团－Ｃ（Ｏ）－ＣＲ↓［５５］－中的ＣＨＲ↓［５５］基团； Ｒ↓［４］选自－ＣＨ↓［２］－和－ＮＲ↓［５０］－，其中Ｒ↓［５０］选自Ｈ、烷基、芳烷基和杂环； Ｒ↓［５］为－ＣＲ↓［２０１］Ｒ↓［２０２］－，其中Ｒ↓［２０１］和Ｒ↓［２０２］分别选自Ｈ、烷基、芳基和芳烷基，并且Ｒ↓［２０１］和Ｒ↓［２０２］可分别被取代基取代； Ｒ↓［６］选自－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ↓［２］－和－ＣＨＲ↓［９９］－Ｃ（Ｏ）－； Ｒ↓［７］选自－ＣＨ↓［２］－和－ＮＲ↓［５１］－，其中Ｒ↓［５１］为Ｈ、烷基、芳烷基、杂烷基和杂芳烷基，并且这些基团部分均可被选自Ｑ和－（ＣＨ↓［２］）↓［ｎ］－Ｑ的基团取代，其中ｎ为０－５，Ｑ选自氨基、脒基、咪唑和胍基，这些基团可以被取代基取代，可以是其一、二、三或四烷基铵的可成药盐、其异酰脲或异硫酰脲； Ｒ↓［８］为－ＣＲ↓［２１０］Ｒ↓［２１１］－，其中Ｒ↓［２１０］和Ｒ↓［２１１］分别选自Ｈ、烷基、烷芳基、杂环，并且这些基团部分均可被选自Ｑ或－（ＣＨ↓［２］）↓［ｎ］－Ｑ的基团取代，其中ｎ为１－５，Ｑ选自氨基、脒基、咪唑基和胍基，这些基团可以被取代基取代，可以是其一、二、三或四烷基铵的可成药盐、其异酰脲或异硫酰脲； Ｒ↓［９］选自－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ↓［２］－和－ＣＨＲ↓［９９］－Ｃ（Ｏ）－； 其中，当ｍ为１时，Ｂ选自１－２０个氨基酸、－ＮＨＲ↓［５２］、－ＮＲ↓［６０］Ｒ↓［６１］、...

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：法赫德阿尔奥贝迪，米哈尔列布尔，詹姆斯A奥斯特里姆，佩维尔萨法尔，埃琳娜斯蒂兰多娃，彼德斯特罗普，阿明沃尔泽，
申请(专利权)人：西莱克泰德公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]