GLP-1衍生物制造技术

一种ＧＬＰ－１衍生物，其中母体肽的至少一个氨基酸残基连接有一个亲脂性取代基，并且如果只有一个亲脂性取代基，而该取代基又连接到母体肽的Ｎ－末端或Ｃ－末端氨基酸残基上，那么该取代基是烷基或具有一个ω－羧基的基团。（*该技术在2017年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及人胰高血糖素样肽-1(GLP-1)及其片段和这些片段的类似物的新衍生物，它们具有更长时间的作用曲线(protracted profile ofaction)，还涉及这些物质的制备和使用方法。专利技术的技术背景肽广泛用于医学实践，由于可以用DNA重组技术制备肽，因此可以预计在未来一些年内其重要性也将会增加。当在治疗中使用天然肽或其类似物时，通常发现它们有高的清除率。在需要使治疗剂在更长时间的期间内保持其高的血液水平的情况下，治疗剂的高清除率是不适宜的，因为这将需要重复给药。有高清除率的肽例如有ACTH，促肾上腺皮质激素释放因子，血管紧张肽，降钙素，胰岛素，胰高血糖素，胰高血糖素样肽-1，胰高血糖素样肽-2，胰岛素样生长因子-1，胰岛素样生长因子-2，肠抑胃肽，生长激素释放因子，垂体腺苷酸环化酶活化肽，胰泌素，肠抑胃素(enterogastrin)，促生长素抑制素，生长调节素，促生长素，甲状旁腺素，血小板生成素，红细胞生成素，下丘脑释放因子，促乳素，促甲状腺素，内啡肽，脑啡肽，血管升压素，催产素，阿片样物质及其类似物，超氧化物歧化酶，干扰素，天冬酰胺酶，精氨酸酶，精氨酸脱氨酶，腺苷脱氨酶和核糖核酸酶。在某些情况下，能使用适宜的药物组合物以影响肽的释放曲线，但这种方法存在各种不足之处，一般是不适用的。调节胰岛素分泌的激素属于所谓的肠胰岛轴，指的是随着肠内营养素的存在和吸收而从胃肠粘膜释放的一组激素，它促使胰岛素的早期释放并使之增强。促进胰岛素分泌的作用，即所谓的肠降血糖素作用，对于正常的葡萄糖耐受性或许是必需的。包括胃泌素和胰泌素的许多胃肠激素具有促胰岛素作用(人的缩胆囊素不具有促胰岛素作用)，但生理上重要的、能导致肠降血糖素作用的仅有葡萄糖依赖性促胰岛素多肽GIP和胰高血糖素样肽-1(GLP-1)。由于GIP的促胰岛素作用，它在1973年得到分离(1)后立即在糖尿病学家中引起相当大的兴趣。然而，在随后一些年中进行的大量研究清楚地显示，GIP分泌缺陷与胰岛素依赖性糖尿病(IDDM)或非胰岛素依赖性糖尿病(NIDDM)的发病原因并无关系(2)。进而还发现，GIP虽是一种促胰岛素激素，但它对于NIDDM几乎无效(2)。另一种肠降血糖素激素GLP-1，是已知最有效的促胰岛素物质(3)。不同于GIP,GLP-1在促进NIDDM病人的胰岛素分泌方面非常有效。另外，与其它促胰岛素激素相比(也许除肠泌素外)，GLP-1也有效地抑制胰高血糖素分泌。由于这些作用，它尤其对于NIDDM病人具有显著的降血糖效果。GLP-1是胰高血糖素原(proglucagon)的一种产物(4)，它是胰泌素-VIP族肽中最新成员之一，但它已被确认是一种对于葡萄糖代谢和胃肠分泌及代谢具有调节功能的重要的胃肠激素(5)。胰高血糖素基因在胰腺和肠内加工方式不同。在胰腺内(9)，加工导致形成和平行分泌以下物质1)胰高血糖素自身，占据胰高血糖素原(PG)的33-61位；2)一种有30个氨基酸(PG(1-30))的N-末端肽，通常称之为胰高血糖素样肽相关的胰肽，GRPP(10,11)；3)一种对应于PG(64-69)的六肽；4)最后还有所谓的主要的胰高血糖素原片段(PG(72-158))，其中藏有两个胰高血糖素样序列(9)。胰高血糖素似乎是唯一的生物活性产物。与之相比，在肠粘膜内，却是胰高血糖素被埋藏在一个大分子中，而两个胰高血糖素样肽则是分别形成的(8)。以下产物是平行形成并分泌的1)对应于PG(1-69)的胰高血糖素样肽，其中胰高血糖素序列占据No.33-61残基(12)；2)GLP-1(7-36)酰胺，即PG(78-107)酰胺(13)，而不是最初认为的PG(72-107)酰胺或PG(72-108)酰胺，它是非活性的。也生成少量C-末端甘氨酸延伸的具有同等生物活性的GLP-1(7-37)(PG(78-108))(14)；3)中间肽-2(PG(111-122)酰胺)(15)；和4)GLP-2(PG(126-158))(15,16)。胰高血糖素样肽的一部分进一步切割成GRPP(PG(1-30))和胃泌酸调节素(PG(33-69))(17,18)。在这些肽中，GLP-1有最显著的生物活性。由于GLP-1与胰高血糖素样肽/肠高血糖素平行分泌，因此对肠高血糖素分泌的许多研究(6,7)在某些程度上也可用于GLP-1分泌，但GLP-1代谢更快，其在人血浆中的半衰期为2分钟(19)。富含糖类或脂肪的膳食能促进分泌(20)，推测这是未吸收的养分与肠粘膜开放型L-细胞的微绒毛直接相互作用的结果。可能存在促进GLP-1分泌的内分泌或神经机理，但在人体内还未得到证实。用GLP-1受体拮抗剂exendin 9-39进行的实验已清楚地说明了GLP-1的肠降血糖素作用(29-31)，在此实验中，exendin 9-39惊人地降低大鼠口服葡萄糖后的肠降血糖素作用(21,22)。激素经由属于G-蛋白耦联的7-跨膜穿越受体的胰高血糖素/VIP/降钙素家族的GLP-1受体与β-细胞直接相互作用(23)。最近的实验证明了GLP-1受体在调节胰岛素分泌方面的重要性，在此实验中，对小鼠进行了GLP-1受体基因的定向破坏。具有这种破坏的纯合动物有显著退化的葡萄糖耐受性和快速出现的高血糖，甚至杂合动物也不能耐受葡萄糖(24)。信号转导机理主要包括腺苷酸环化酶活化，但也必须有细胞内Ca2+的升高(25,26)。该激素的作用最好地描述为能增强葡萄糖刺激的胰岛素释放作用(25)，但尚不知道葡萄糖与GLP-1刺激之间的耦联机理。它可能包括一个钙诱发的钙释放(26,27)。如已经提到的，糖尿病人的β-细胞有GLP-1的促胰岛素作用。也不知道GLP-1与其赋予分离的胰岛素分泌细胞(26,28)“葡萄糖感应性”的能力之间的关系，这种分离的胰岛素分泌细胞几乎不对单独的葡萄糖或GLP-1起反应，而是对二者的结合起反应。然而，同等重要的是，该激素也有效地抑制胰高血糖素分泌(29)。其机理还不清楚，但似乎是通过相邻胰岛素或促生长素抑制素细胞的旁分泌(25)。抑胰高血糖素作用(glucagonostatic action)也是葡萄糖依赖性的，所以当血糖降低时，抑制效应即降低。由于这种双重效应，如果通过增加分泌或通过外源性灌输增加血浆中的GLP-1浓度，通过门脉循环达到肝的血液中胰岛素与胰高血糖素之间的摩尔比将显著增加，而肝糖生成量降低(30)。结果，血糖浓度降低。由于促胰岛素作用和抑胰高血糖素作用的葡萄糖依赖性，葡萄糖降低的效果是自限性的，因此，无论剂量如何，该激素均不导致低血糖(31)。有糖尿症的病人仍存在这些效应(32)，尽管有弱的代谢控制和磺酰脲类附属性障碍(33)，给这些病人灌输稍微超出生理剂量的GLP-1可能使血糖值完全正常化。已发现GLP-1在无残余β-细胞分泌能力的Ⅰ型糖尿病人中也能降低血糖(34)，这说明了抑胰高血糖素效应的重要性。除它对于胰岛的作用外，GLP-1对胃肠道也具有有力的作用。灌输生理剂量的GLP-1，能显著抑制五肽胃泌素诱发的及膳食诱发的胃酸分泌(35,36)。GLP-1也抑制胃排空速率和胰酶分泌(36)。人回肠灌输含有糖或脂的溶液可能对胃、胰分泌和运动性具有相似本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：L·B·克努德森，P·O·胡斯菲尔德，P·F·尼尔森，
申请(专利权)人：诺沃挪第克公司，
类型：发明
国别省市：