一种胶原蛋白自组装的方法技术

本发明专利技术公开了一种胶原蛋白自组装的方法，属于蛋白质加工技术领域。本发明专利技术利用分子量为250‑350kDa的胶原蛋白进行自组装，加入聚乙二醇，调节pH值为8.0，在恒温条件下，利用红外辐照，并利用摇床摇动自组装3‑6h。胶原蛋白的浓度为6‑8mg/mL。聚乙二醇的添加量为胶原蛋白溶液体积的2‑5％。红外辐照所述红外辐照处理功率200‑400W，波长范围40‑60μm。本发明专利技术提供的胶原蛋白自组装方法，简单快捷，显著提高了胶原蛋白自组装程度，缩短了胶原蛋白自主装时间，将胶原蛋白的自组装程度提高至93％，组装时间缩短至3‑6h。

Self assembling method of collagen

The invention discloses a method for self assembly of collagen, which belongs to the technical field of protein processing. The invention uses molecular self-assembly, polyethylene glycol 250 350kDa collagen, the pH value is adjusted to 8, under the condition of constant temperature by infrared irradiation, and the use of self assembled 6h 3 shaking. The collagen concentration was 6 8mg/mL. Add the amount of polyethylene glycol is 2 of the volume of 5% collagen solution. The infrared radiation infrared irradiation power 200 400W wavelength range of 60 m 40. The present invention provides collagen self-assembly method, simple and quick, can significantly improve the degree of collagen self-assembly, shorten the time of collagen self assembly, the self-assembly degree of collagen increased to 93%, the assembly time is shortened to 3 6h.

【技术实现步骤摘要】
一种胶原蛋白自组装的方法
本专利技术专利涉及一种胶原蛋白自组装的方法，属于蛋白质加工

技术介绍
分子自组装现象在生物界中普遍存在，大分子物子的自组装或者大分子与其它大分子之间的自组装能够形成各种各样复杂的生物结构。具体自组装过程是由于非共价键的作用，系统内的分子自行聚集，组装成具有一定规则的结构，分子自组装并不是大量分子简单地相加在一起，而是一种十分复杂的整体协同作用。胶原的结构复杂，给研究胶原自组装机理研究带来了很大的困难，研究发现，生物体内以自组装模式形成的胶原纤维在热稳定性、耐酶降解性和生物力学性能等方面均显著优于胶原单体分子的体外性能表现，但是由于自组装的机理研究还不完善，胶原蛋白的自组装还是一项难以攻克的技术问题，往往存在检测不到组装体或者自组装程度低的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种胶原蛋白自组装的方法，解决现有技术中胶原蛋白自组装程度低的技术问题。一种胶原蛋白自组装的方法，利用分子量为250-350kDa的胶原蛋白进行自组装，加入聚乙二醇，调节pH值为8.0，在恒温条件下，利用红外辐照，并利用摇床摇动自组装3-6h。所述胶原蛋白的浓度为6-8mg/mL。所述聚乙二醇的添加量为胶原蛋白溶液体积的2-5％。所述红外辐照所述红外辐照处理功率200-400W，波长范围40-60μm。所述恒温条件为温度30-35℃。摇床摇动速度为10r/min。用0.1mol/L的NaOH调节体系pH值。本专利技术的有益效果在于：(1)本专利技术提供的胶原蛋白自组装方法，简单快捷，显著提高了胶原蛋白自组装程度，缩短了胶原蛋白自主装时间，将胶原蛋白的自组装程度提高至93％，组装时间缩短至3-6h。具体实施方式自组装程度测定以L-羟脯氨酸为对照标准品，以二甲氨基苯甲醛为显色剂采用分光光度法定量测定离心上清液中羟基脯氨酸含量，测定标准曲线为：y＝0.19301x+0.01521，R2＝0.9997，式中：y为羟脯氨酸含量/(mg/mL)，x为测定吸光度。按式(1)计算胶原自组装程度。式中：m1为组装前胶原样品中的羟脯氨酸总量/mg；m2是组装后样品上清液中的羟脯氨酸总量/mg。实施例1一种胶原蛋白自组装的方法，利用分子量为300kDa上下的胶原蛋白进行自组装，调节pH值为8.0，在恒温条件下自组装4h。所述胶原蛋白的浓度为7mg/mL。所述聚乙二醇的添加量为胶原蛋白溶液体积的4％。所述恒温条件为温度30℃。用0.1mol/L的NaOH调节体系pH值。4h组装完毕后，检测自组装程度为45％。实施例2一种胶原蛋白自组装的方法，利用分子量为300kDa上下的胶原蛋白进行自组装，调节pH值为8.0，在恒温条件下自组装16h。所述胶原蛋白的浓度为7mg/mL。所述聚乙二醇的添加量为胶原蛋白溶液体积的4％。所述恒温条件为温度30℃。用0.1mol/L的NaOH调节体系pH值。4h组装完毕后，检测自组装程度为82％。实施例3一种胶原蛋白自组装的方法，利用分子量为300kDa上下的胶原蛋白进行自组装，加入聚乙二醇，调节pH值为8.0，在恒温条件下，利用摇床摇动自组装4h。所述胶原蛋白的浓度为7mg/mL。所述聚乙二醇的添加量为胶原蛋白溶液体积的4％。所述恒温条件为温度30℃。摇床摇动速度为10r/min。用0.1mol/L的NaOH调节体系pH值。4h组装完毕后，检测自组装程度为64％。实施例4一种胶原蛋白自组装的方法，利用分子量为300kDa上下的胶原蛋白进行自组装，加入聚乙二醇，调节pH值为8.0，在恒温条件下，利用红外辐照，并利用摇床摇动自组装4h。所述胶原蛋白的浓度为7mg/mL。所述聚乙二醇的添加量为胶原蛋白溶液体积的3％。所述红外辐照所述红外辐照处理功率300W，波长范围40μm。所述恒温条件为温度30℃。摇床摇动速度为10r/min。用0.1mol/L的NaOH调节体系pH值。4h组装完毕后，检测自组装程度为87％实施例5一种胶原蛋白自组装的方法，利用分子量为350kDa上下的胶原蛋白进行自组装，加入聚乙二醇，调节pH值为8.0，在恒温条件下，利用红外辐照，并利用摇床摇动自组装6h。所述胶原蛋白的浓度为8mg/mL。所述聚乙二醇的添加量为胶原蛋白溶液体积的5％。所述红外辐照所述红外辐照处理功率400W，波长范围40μm。所述恒温条件为温度35℃。摇床摇动速度为10r/min。用0.1mol/L的NaOH调节体系pH值。6h组装完毕后，检测自组装程度为93％。实施例6一种胶原蛋白自组装的方法，利用分子量为60kDa上下的胶原蛋白进行自组装，加入聚乙二醇，调节pH值为8.0，在恒温条件下，利用红外辐照，并利用摇床摇动自组装6h。所述胶原蛋白的浓度为8mg/mL。所述聚乙二醇的添加量为胶原蛋白溶液体积的5％。所述红外辐照所述红外辐照处理功率400W，波长范围40μm。所述恒温条件为温度35℃。摇床摇动速度为10r/min。用0.1mol/L的NaOH调节体系pH值。6h组装完毕后，检测自组装程度为44％。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种胶原蛋白自组装的方法，其特征在于，利用分子量为250‑350kDa的胶原蛋白进行自组装，加入聚乙二醇，调节pH值为8.0，在恒温条件下，利用红外辐照，并利用摇床摇动自组装3‑6h。

【技术特征摘要】
1.一种胶原蛋白自组装的方法，其特征在于，利用分子量为250-350kDa的胶原蛋白进行自组装，加入聚乙二醇，调节pH值为8.0，在恒温条件下，利用红外辐照，并利用摇床摇动自组装3-6h。2.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白自组装的方法，其特征在于，所述胶原蛋白的浓度为6-8mg/mL。3.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白自组装的方法，其特征在于，所述聚乙二醇的添加量为胶原蛋白溶液体积的2-5％。4.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白自组装...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹书华，
申请(专利权)人：曹书华，
类型：发明
国别省市：江苏,32