【技术实现步骤摘要】
一种果胶酶及其应用
本专利技术涉及一种果胶酶及其应用，属于酶工程领域。
技术介绍
碱性果胶酶(E.C.4.2.2.2，简称PGL)，全称聚半乳糖醛酸裂解酶，在碱性条件下具有高活性，可以利用反式消去作用切断聚乳糖醛酸的α-1,4-糖苷键，将果胶质分解为不饱和的寡聚半乳糖醛酸。该酶广泛存在于细菌、酵母菌、真菌、植物以及和某些寄生线虫。不同来源的碱性果胶酶同源性差异较大。碱性果胶酶广泛应用于食品、纺织、造纸、环境、生物技术等各个领域，在茶和咖啡发酵、纺织和植物纤维加工、油提取、含果胶工业废水处理等发挥巨大作用。在棉纤维初生细胞壁的最表面含有很多伴生杂质，如：果胶质、蜡质、含氮物质以及蛋白质等非纤维素类物质，互相包结成为复杂庞大的疏水网状结构。纺织工业中包含精炼步骤，其目的就是去除棉纤维上的杂质，提高棉织物的吸湿功能性，再进行后续加工。传统的化学纺织精炼方法即热碱法，其需要消耗大量的化学品与水资源，环境污染严重，据统计，印染过程中约70％的废水是在这个步骤中产生的。除此之外，热碱处理将对纤维造成严重损伤，机械强度将大幅下降。近十几年来，随着分子生物学与工业微生物研究的迅猛...
【技术保护点】
一种热稳定性提高的碱性果胶酶突变体，其特征在于，是将氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的碱性果胶酶的第230位的天冬酰胺N突变为脯氨酸P、第231位的甘氨酸G突变为赖氨酸K。
【技术特征摘要】
1.一种热稳定性提高的碱性果胶酶突变体，其特征在于，是将氨基酸序列如SEQIDNO.2所示的碱性果胶酶的第230位的天冬酰胺N突变为脯氨酸P、第231位的甘氨酸G突变为赖氨酸K。2.编码权利要求1所述突变体的基因。3.携带权利要求2所述基因的载体或细胞。4.一种获得权利要求1所述碱性果胶酶突变体的方法，是通过设计引物对编码碱性果胶酶的基因进行定点突变后表达。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，是以质粒pET-20b(+)-pgl为模板设计引物进行突变并将突变后的质粒转化进入E.coliJM109进行扩增，然后以E.coliBL21(DE3)表达含突变基因的重组质粒，得到热稳定性增强的碱性果胶酶突变体。6.应用基因工程菌发酵生产权利要求1所述碱性果胶酶突变体的方法，其特征在于，是将含有突变碱性果胶酶基因的重组菌活化培养后接种到含有100μ...
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