一种斑马鱼“基因组编辑”载体构建的试剂盒制造技术

本实用新型专利技术提供一种斑马鱼“基因组编辑”载体构建的试剂盒，包括第一EP管、凹槽、本体、第二EP管、第三EP管、第四EP管、衬垫和容器孔，本体上部设有四个凹槽，四个凹槽内部分别设有第一EP管、第二EP管、第三EP管和第四EP管，内壁底部均设有衬垫，衬垫上设有容器孔，该种斑马鱼“基因组编辑”载体构建的试剂盒，通过第一EP管、第二EP管、第三EP管和第四EP管，能够使得对斑马鱼基因组进行编辑工作变得更加简易高效。用户只需要根据目的基因设计合成SgRNA序列，经简单克隆后即可获得表达SgRNA的载体，能够对目的基因进行定点基因组编辑。

Kit for constructing zebrafish genomic editing vector

The utility model provides a kit for constructing \zebrafish genome editing\ vector, including the first EP pipe, groove, body, second EP tube, third EP tube, fourth EP tube, and the container liner hole, the upper part of the body is provided with four grooves and four grooves are respectively arranged inside the first tube, EP tube, EP second third fourth EP tube and EP tube, the inner wall are arranged at the bottom liner, liner container holes are arranged on the kit to build the \zebrafish genome editing\ carrier, through the first EP tube, second EP tube, third EP tube and EP tube fourth, can make the zebra fish genome editing work has become more simple and efficient. Users only need to design and synthesize SgRNA sequences according to the target genes. After simple cloning, users can obtain vectors expressing SgRNA, which can edit the target genes at fixed sites.

【技术实现步骤摘要】
一种斑马鱼“基因组编辑”载体构建的试剂盒
本技术涉及一种试剂盒，具体为一种斑马鱼“基因组编辑”载体构建的试剂盒，属于生物

技术介绍
基因组编辑(GenomeEditing)技术是利用核酸酶与RNA核酸序列对生物体基因组进行剪切的技术，包括第一代的ZFN锌指酶技术，第二代的TALEN技术，以及第三代的CRISPRCas9技术。目前第三代的CRISPRCas9技术已经成为基因组编辑的主流技术。CRISPRCas9是细菌(Bacteria)与古细菌(archaea)中免疫系统的重要组成部分，主要包含具有DNA酶活性的Cas9蛋白，以及CrRNA与TracrRNA，能够结合并剪切外源噬菌体的DNA。利用经序列优化过的Cas9酶以及改造过SgRNA(兼具CrRNA与TracrRNA功能)，可以对斑马鱼的基因组进行定点的基因敲除或基因敲入(基因敲入时需提供供体)。CRISPRCas9技术可以快速高效地编辑斑马鱼基因组，在基因功能研究、疾病模型构建、基因治疗、生物遗传育种等诸多方面具有重要的应用价值。
技术实现思路
本技术要解决的技术问题是克服现有的缺陷，提供一种斑马鱼“基因组编辑”载体构建的试剂盒。为了解决上述技术问题，本技术提供了如下的技术方案：本技术提供一种斑马鱼“基因组编辑”载体构建的试剂盒，包括第一EP管、凹槽、本体、第二EP管、第三EP管、第四EP管、衬垫和容器孔，所述本体上部设有四个所述凹槽，四个所述凹槽内部分别设有所述第一EP管、所述第二EP管、所述第三EP管和所述第四EP管，内壁底部均设有所述衬垫，所述衬垫上设有所述容器孔，所述第一EP管、所述第二EP管、所述第三EP管和所述第四EP管内部分别装有pHMG-SgRNAz线性化质粒、pHMG-SgRNAz测序引物、pHMG-SgRNAzG的参照质粒和pHMG-Cas9z线性化质粒。作为本技术的一种优选技术方案，所述容器孔设置有4个，且分别均匀排布在四个所述衬垫上。作为本技术的一种优选技术方案，所述衬垫和所述凹槽螺栓连接。本技术所达到的有益效果是：该种斑马鱼“基因组编辑”载体构建的试剂盒，通过第一EP管、第二EP管、第三EP管和第四EP管，能够使得对斑马鱼基因组进行编辑工作变得更加简易高效。用户只需要根据目的基因设计合成SgRNA序列，经简单克隆后即可获得表达SgRNA的载体，能够对目的基因进行定点基因组编辑。附图说明附图用来提供对本技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本技术的实施例一起用于解释本技术，并不构成对本技术的限制。在附图中：图1是本技术的整体结构示意图；图中标号：1、第一EP管；2、凹槽；3、本体；4、第二EP管；5、第三EP管；6、第四EP管；7、衬垫；8、容器孔。具体实施方式以下结合附图对本技术的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本技术，并不用于限定本技术。实施例：如图1所示，本技术提供一种斑马鱼“基因组编辑”载体构建的试剂盒，包括第一EP管1、凹槽2、本体3、第二EP管4、第三EP管5、第四EP管6、衬垫7和容器孔8，本体3上部设有四个凹槽2，四个凹槽2内部分别设有第一EP管1、第二EP管4、第三EP管5和第四EP管6，内壁底部均设有衬垫7，衬垫7上设有容器孔8，通过第一EP管1、第二EP管4、第三EP管5和第四EP管6，能够使得对斑马鱼基因组进行编辑工作变得更加简易高效。用户只需要根据目的基因设计合成SgRNA序列，经简单克隆后即可获得表达SgRNA的载体，能够对目的基因进行定点基因组编辑。第一EP管1、第二EP管4、第三EP管5和第四EP管6内部分别装有pHMG-SgRNAz线性化质粒、pHMG-SgRNAz测序引物、pHMG-SgRNAzG的参照质粒和pHMG-Cas9z线性化质粒，可快速获得表达SgRNA的载体，能够对目的基因进行定点基因组编辑。容器孔8设置有4个，且分别均匀排布在四个衬垫7上，保证试剂盒的整体美观，而且方便操作。衬垫7和凹槽2螺栓连接，使衬垫7更牢固稳定。本技术在使用时，第一EP黄1的pHMG-SgRNAz线性化质粒的浓度为0.5μg/μl，共20μl，第二EP管4的pHMG-SgRNAzGFP的参照质粒的浓度为0.5μg/μl，共20μl，第三EP管5的pHMG-SgRNAz测序引物为10μM，共20μl，第四EP管6的pHMG-Cas9z线性化质粒的浓度为0.5μg/μl，共20μl，经过反应和一些加热冷却措施后，可获得表达SgRNA的载体，能够对目的基因进行定点基因组编辑以及测序鉴定插入片段是否正确。该种斑马鱼“基因组编辑”载体构建的试剂盒，通过第一EP管1、第二EP管4、第三EP管5和第四EP管6，能够使得对斑马鱼基因组进行编辑工作变得更加简易高效。用户只需要根据目的基因设计合成SgRNA序列，经简单克隆后即可获得表达SgRNA的载体，能够对目的基因进行定点基因组编辑。最后应说明的是：以上所述仅为本技术的优选实施例而已，并不用于限制本技术，尽管参照前述实施例对本技术进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本技术的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种斑马鱼“基因组编辑”载体构建的试剂盒，包括第一EP管(1)、凹槽(2)、本体(3)、第二EP管(4)、第三EP管(5)、第四EP管(6)、衬垫(7)和容器孔(8)，其特征在于，所述本体(3)上部设有四个所述凹槽(2)，四个所述凹槽(2)内部分别设有所述第一EP管(1)、所述第二EP管(4)、所述第三EP管(5)和所述第四EP管(6)，内壁底部均设有所述衬垫(7)，所述衬垫(7)上设有所述容器孔(8)，所述第一EP管(1)、所述第二EP管(4)、所述第三EP管(5)和所述第四EP管(6)内部分别装有pHMG‑SgRNAz线性化质粒、pHMG‑SgRNAz测序引物、pHMG‑SgRNAzG的参照质粒和pHMG‑Cas9z线性化质粒。

【技术特征摘要】
1.一种斑马鱼“基因组编辑”载体构建的试剂盒，包括第一EP管(1)、凹槽(2)、本体(3)、第二EP管(4)、第三EP管(5)、第四EP管(6)、衬垫(7)和容器孔(8)，其特征在于，所述本体(3)上部设有四个所述凹槽(2)，四个所述凹槽(2)内部分别设有所述第一EP管(1)、所述第二EP管(4)、所述第三EP管(5)和所述第四EP管(6)，内壁底部均设有所述衬垫(7)，所述衬垫(7)上设有所述容器孔(8)，所述第一EP管(1)、所述第二EP管(4...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱江，
申请(专利权)人：仁源生物技术上海有限公司，
类型：新型
国别省市：上海,31