一种筛选线粒体基因组编辑工具靶向目标序列的方法技术

本发明专利技术公开了一种筛选线粒体基因组编辑工具靶向目标序列的方法，属于基因组工程领域。所述筛选方法具体如下：利用转基因技术，构建了一个核基因组中含有线粒体DNA(mtDNA)序列片段或片段组合的转基因细胞系。将含有相应mtDNA靶向目标序列的基因组编辑技术作用质粒转染到该细胞系中，经合适作用时间，利用相应基因组编辑技术靶向剪切活性的鉴定方法检测待选mtDNA靶向目标序列的剪切活性，从中筛选合适mtDNA靶向目标序列。建立了一种筛选线粒体基因组编辑工具靶向目标序列的方法。该方法简便易行，具有普遍适用性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因组工程领域，具体地说，涉及一种筛选线粒体基因组编辑工具靶向目标序列的方法。
技术介绍
随着测序技术的不断发展，我们获得越来越多的遗传信息。研究人员试图通过对特定靶向基因的破坏或敲除来研究它们的相关功能。与传统基因打靶技术相比，新型基因组编辑技术应用范围更广、作用效率更高、所需成本更低，可用于模式动物构建、基因功能研究、基因治疗等方面。目前，常用的基因组编辑技术主要包括以下三种：锌指蛋白(zincfingerproteins，ZFPs)技术、转录激活因子样效应因子(transcriptionactivator-likeeffectors，TALEs)技术、CRISPR(clusteredregularlyinterspacedshortpalindromicrepeats)技术。它们的大致原理都是通过造成靶向DNA双链断裂(double-strandbreaks，DSBs)，引发细胞内固有的非同源末端连接(nonhomologousendjoining，NHEJ)或同源重组(homology-directedrepair，HDR)两种修复机制对DSBs处进行修复，引本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种筛选线粒体基因组编辑工具靶向目标序列的方法，其特征在于，构建一个核基因组中含有线粒体DNA(mtDNA)序列片段或片段组合的转基因细胞系，利用相应基因组编辑技术检测mtDNA靶向目标序列剪切活性，以筛选合适mtDNA靶向目标序列。

【技术特征摘要】
1.一种筛选线粒体基因组编辑工具靶向目标序列的方法，其特征在于，构建一个核基因组中含有线粒体DNA(mtDNA)序列片段或片段组合的转基因细胞系，利用相应基因组编辑技术检测mtDNA靶向目标序列剪切活性，以筛选合适mtDNA靶向目标序列。2.如权利要求1所述一种筛选线粒体基因组编辑工具靶向目标序列的方法，其特征在于适用范围广，基于ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9等基因组编辑技术改造而成的线粒体基因组编辑工具，或其它线粒体基因组编辑工具，均可使用此方法筛选合适靶向目标序列。3.如权利要求1、2所述一种筛选线粒体基因组编辑工具靶向目标序列的方法，其特征在于，转基因细胞系中的mtDNA靶向目标序列剪切活性，可通过相应基因组编辑技术靶向剪切活性的鉴定方法进行检测。4.如权利要求1～3所述mtDNA靶向目标序列剪切活性的检测，其特征在于，可将含有相应mtDNA靶向目标序列的基因组编辑技术作用质粒转染到所构建的转基因细胞系中，经合适作用时间，利用相应基因组编辑技术靶向剪切活性的鉴定方法进行检测。5.如权利要求1～4所述利用相应基因组编辑技术靶向剪切活性的鉴定方法进行检测，其特征在于，可利用相应基因组编辑技术靶向剪切该细胞株的核基因组，通过...

【专利技术属性】
技术研发人员：聂凌云，魏迪，池振奋，程东庆，
申请(专利权)人：聂凌云，
类型：发明
国别省市：北京;11