猪血中提取免疫球蛋白ＩｇＧ的方法，涉及一种从哺乳动物血液中提取免疫球蛋白ＩｇＧ的加工方法。方法中采用了抗凝处理，防止血液凝固和血细胞破裂。采用低温保鲜、低温运输和制冷贮藏，保证了血液不变质，不溶血，便于运输。采用多级盐析、超滤、离子交换、降膜蒸发浓缩和低温喷雾干燥，既操作简单又节约了成本，适于工业化生产。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种从哺乳动物血液中提取免疫球蛋白IgG的加工方法。
技术介绍
目前免疫球蛋白的分离方法有硫酸铵分级沉淀法，乙醇分离法、辛酸沉淀法，这些方法都用于免疫球蛋白的粗提，进一步纯化的方法主要包括离子交换法，凝聚过滤法、亲合色谱法和超滤法。有时，采用几种方法结合使用。现有的从动物血液中提取免疫球蛋白IgG的加工方法都停留在实验室的研究和运用上。中国轻工业联合会和北京市食品工业研究所联合出版的《食品工业科技》杂志2003年第6期“工艺技术”专栏发表的由卜春文、贾建波撰写的文章《猪血中IgG的分离、纯化放大试验工艺研究》，其工艺过程采用了离心、盐析、分离沉淀、渗析、超滤、冷冻干燥六个重要工序。该工艺是可行的，并且充分考虑了废液的综合利用，但不能运用于工业化连续生产。专利技术目的 本专利技术的目的是针对上述现状，旨在提供一种适用于工业化从猪血中提取免疫球蛋白的加工方法。专利技术技术方案 本专利技术的目的是通过如下措施达到的收集健康的猪血，进行抗凝处理、低温保鲜、低温运输、制冷贮藏，然后通过高速离心分离，得到血浆液体，血浆液体通过多级盐析，得到含IgG的固形物，固形物加超纯水溶解，通过超滤、离子交换、降膜蒸发浓缩和低温喷雾干燥，得到免疫球蛋白IgG的成品。收集健康的猪血是指加工的动物血液全部来自定点大型屠宰场，所有的猪只必须经过国家动物检疫部门检验无疫病。抗凝处理本专利技术采用的抗凝剂为食品级柠檬酸钠和葡萄糖的混合物(比例7∶3)，添加量4g/kg猪血。低温保鲜、低温运输和制冷贮藏的温度保持在4±1℃，制冷贮藏时搅拌机的转速为28-30转/分钟。高速离心分离的转速6000-9000转/分钟。多级盐析是通过50％硫酸铵饱和溶液、不同浓度的乙醇和PH值，得到含IgG的固形物，含免疫球蛋白IgG固形物的盐析条件为硫酸铵饱和溶液的浓度为50％，乙醇的浓度为1％，PH为6.7-6.9，温度40℃，盐析时间1小时。采用超滤和离子交换，除掉NH4+和小分子杂质。超滤是用12组并联HFS系列生物膜装置组成。降膜蒸发浓缩的温度为T≤55℃。低温喷雾干燥的温度为T≤160℃。专利技术的积极效果 本专利技术为了防止血液凝固和血细胞破裂进行了抗凝处理。本专利技术采用了低温保鲜、低温运输和制冷贮藏，血液的温度保持在4±1℃，保证了血液不变质，不溶血，便于长途运输。本专利技术采用多级盐析，没有采用常规的盐析和渗析的工序，这样操作简单，适于工业化生产。本专利技术采用先超滤后进行离子交换，提高了浓缩液中免疫球蛋白IgG的浓度。本专利技术采用降膜蒸发浓缩和低温喷雾干燥，不同于常见的冷冻干燥，节约了成本。附图说明图1猪血中提取免疫球蛋白IgG的加工工艺流程图。专利技术的实施实例 参照图1 为了确定最佳抗凝剂，专利技术人作了如下实验 从上述结果可见，每公斤猪血添加4克食品级柠檬酸钠和葡萄糖的混合物是最佳剂量。挥发性盐基氮是反映血液新鲜度的重要标志，挥发性盐基氮越低，表明血液越新鲜，参照图1，专利技术人在不同的温度条件下，对血液的挥发性盐基氮进行了测定，结果如下 从上述结果可见，不同的温度条件血液的挥发性盐基氮差异很大，通过低温保鲜、保温运输和制冷贮藏处理的血液与新鲜的血液的挥发性盐基氮十分接近，表明血液新鲜，没有变质。参照图1，本专利技术采用了多级盐析，通过不同的条件得到不同的浓缩液，测定结果如下 从上述结果可见，通过调整PH和乙醇浓度，得到含不同免疫球蛋白的浓缩液，γ-球蛋白即免疫球蛋白IgG。参照图1，按照本专利技术的工艺流程在安徽恩彼蛋白质有限公司进行工业化试生产，并采用高效液相色谱法测定免疫球蛋白IgG的含量，结果如下 从测试结果可见，采用本专利技术的加工方法，得到的免疫球蛋白IgG含量为IgG＞35％，且适合工业化连续生产。权利要求1.与现有的加工方法都采用了高速离心分离、盐析和超滤，的特征在于血液收集后，采用抗凝处理、低温保鲜、低温运输、制冷贮藏、多级盐析、离子交换、降膜蒸发浓缩和低温喷雾干燥，得到IgG成品。2.根据权利要求1所述的，其特征在于抗凝处理采用的抗凝剂为食品级柠檬酸钠和葡萄糖的混合物(比例7∶3)，添加量4g/kg猪血。3.根据权利要求1所述的，其特征在于低温保鲜、低温运输、制冷贮藏的温度保持在4±1℃，制冷贮藏时搅拌机的转速为28-30转/分钟。4.根据权利要求1所述的，其特征在于多级盐析是通过50％硫酸铵饱和溶液、不同浓度的乙醇和PH值，得到含IgG的固形物，含免疫球蛋白IgG固形物的盐析条件为硫酸铵饱和溶液的浓度为50％，乙醇的浓度为1％，PH为6.7-6.9，温度40℃，盐析时间1小时。5.根据权利要求1所述的，其特征在于采用先超滤后进行离子交换。超滤是用12组并联HFS系列生物膜装置组成。6.根据权利要求1所述的，其特征在于降膜蒸发浓缩的温度在55℃以下(T≤55℃)。7.根据权利要求1所述的，其特征在于低温喷雾干燥的温度在160℃以下(T≤160℃)。全文摘要，涉及一种从哺乳动物血液中提取免疫球蛋白IgG的加工方法。方法中采用了抗凝处理，防止血液凝固和血细胞破裂。采用低温保鲜、低温运输和制冷贮藏，保证了血液不变质，不溶血，便于运输。采用多级盐析、超滤、离子交换、降膜蒸发浓缩和低温喷雾干燥，既操作简单又节约了成本，适于工业化生产。文档编号C07K1/14GK1824679SQ20051001830公开日2006年8月30日 申请日期2005年2月25日 优先权日2005年2月25日专利技术者周增太 申请人:周增太本文档来自技高网...
【技术保护点】
猪血中提取免疫球蛋白ＩｇＧ的方法与现有的加工方法都采用了高速离心分离、盐析和超滤，猪血中提取免疫球蛋白ＩｇＧ的方法的特征在于血液收集后，采用抗凝处理、低温保鲜、低温运输、制冷贮藏、多级盐析、离子交换、降膜蒸发浓缩和低温喷雾干燥，得到ＩｇＧ成品。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：周增太，
申请(专利权)人：周增太，
类型：发明
国别省市：83[中国|武汉]
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