本发明专利技术涉及抗体，其包括人抗体及其抗原结合部分，其结合Ｐ－钙黏着蛋白，并且发挥抑制Ｐ－钙黏着蛋白的作用。本发明专利技术还涉及来自人Ｐ－钙黏着蛋白抗体的重链和轻链免疫球蛋白，以及编码这类免疫球蛋白的核酸分子。本发明专利技术还涉及制造人Ｐ－钙黏着蛋白抗体的方法、包含这些抗体的组合物和使用所述抗体和组合物的方法。本发明专利技术还涉及包含本发明专利技术核酸分子的转基因动物或植物。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及结合P-钙黏着蛋白的抗体及其抗原结合部分。本专利技术还涉 及编码这类抗体和抗原结合部分的核酸分子、制造P-钙黏着蛋白抗体和抗 原结合部分的方法、包含这些抗体和抗原结合部分的组合物以及使用这些 抗体、抗原结合部分和组合物的方法。
技术介绍
钙黏着蛋白是在发育和组织稳态中调节细胞-细胞黏附的跨膜糖蛋白超 家族(Gumbiner乂 0 〃.所o/" 148:399-404 (2000); Yagi, et al.， Ge"^ Dev,， 14:1169-1180 (2000))。钙黏着蛋白的细胞内结构域与细胞质蛋白质(如 链蛋白和pl20)相互作用，这形成了钙黏着蛋白附着在肌动蛋白细胞骨架 上的基础。钙黏着蛋白具有五个细胞外C^+结合结构域和一个在经典钙黏 着蛋白中高度保守的小细胞质结构域。经典的钙黏着蛋白家族成员包括P-钙黏着蛋白、E-钙黏着蛋白和N-钙黏着蛋白。细胞黏附分子(如钙黏着蛋 白)被认为在癌细胞和转移细胞的细胞联络中起重要作用(Furukawa, et al.， Af/mMco"i 仏rec/mi，e 38 (4):343-352 (1997))。正常成人组织中P-钙黏着蛋白低表达，并基本上限于肌上皮细胞和复层上皮的基底层 (Shimoyama, et al. C匿er L 49:2128-33 (1989))。在炎性肠疾病如 Crohn's疾病和结肠炎中P-钙黏着蛋白被上调(Hardy, et al., 50:513-519 (2002))。目前大量证据表明异常的P-钙黏着蛋白表达与细胞增殖 和结肠、胸、肺、甲状腺和子宫颈肿瘤相关(Gamallo, A/o^ r"尸W/w/ogy, 14:650-654, (2001);和Stefansson, et al., C//". Owco/. 22(7): 1242-1252 (2004))。人P-钙黏着蛋白被报导为是能被NCC-CAD-299单克隆抗体识 别的抗原，所述抗体是针对外阴表皮样癌产生的(Shimoyama, et al.， C""ceri e乂， 49:2128-2133 (1989))。对P-钙黏着蛋白介导的粘附和细胞内 信号转导的调节预期能导致体内肿瘤细胞的增殖和存活降低。因此，考虑 到P-钙黏着蛋白看起来具有控制细胞增殖和实体瘤发展的关键作用，产生 针对P-钙黏着蛋白的、能够给多种癌症患者提供治疗益处的抗体是人们需 要的。
技术实现思路
在一个方面，本专利技术是P-钙黏着蛋白抗体或其抗原结合部分，其中抗 体或其抗原结合部分具有下文A)到K)中所述的若干功能特征的至少一 种。A)例如在一个实施方案中，抗体或其抗原结合部分具有与E-钙黏着 蛋白(Kd(E))相比対P-钙黏着蛋白(kd(P))更大的结合亲和力。在一个实施方 案中，本专利技术的抗体或抗原结合部分具有大于或等于1.5的KD(E)/KD(P)。 在另一实施方案中，本专利技术的抗体或其抗原结合部分具有大于或等于2、 大于或等于3、大于或等于5、大于或等于10、大于或等于20、大于或等 于50、大于或等于100、大于或等于200、大于或等于500或大于或等于 1000的KD(E)/KD(P)。典型地，Kd(E)/Kd(P)値不存在上限，因为K"E)值 可以非常小，例如是0。然而对于实践目的而言，Kd(E)/Kd(P)的上限可以 是1 x 106。对P-钙黏着蛋白和E-钙黏着蛋白而言，这类Ko值可通过本领 域技术人员已知的任何技术测量，例如通过ELISA、 RIA、流式细胞仪或 表面等离振子共振，例如BIACORETm。B)在另一实施方案中，通过表面等离振子共振测量，抗体或其部分 以1000 nM或更小的Kd与P-钙黏着蛋白结合。在另一实施方案中，通过 表面等离振子共振测量，抗体或其部分以小于500 nM、小于100 nM、小 于50 nM、小于20 nM、小于10 nM、小于1 nM、小于500 pM或小于100 pM的Kd与P-钙黏着蛋白结合。典型地，不存在Ko值的下限。然而对于 实践目的而言，下限可假定为约1 pM。C) 在另一实施方案中，如通过表面等离振子共振所测量的，抗体或 其部分对P-钙黏着蛋白具有小于或等于0.01 S—4勺清除率(k。ff)。例如，在某些实施方案中抗体或其部分对P-钙黏着蛋白具有小于0.005 s—\小于0.004 s—1、小于0.003 s—1、小于0.002 "或小于0.001 "的k。ff。典型地，不存在 k。ff值的下限。然而对于实践的目的而言，下限可假定为约1x10—7s—]。D) 在另一实施方案中，如通过P-钙黏着蛋白依赖性细胞粘附测定法 所测量的，P-钙黏着蛋白抗体或其部分具有100nM或更小的IC,在另一 实施方案中，如通过P-钙黏着蛋白依赖性细胞粘附测定法所测定的，所述 ICso小于50 nM、小于40 nM、小于20 nM、小于10 nM、小于1 nM、小 于500pM、小于200pM、小于100pM或小于10pM。典型地，如通过P-钙黏着蛋白依赖性细胞粘附测定法所测定的，不存在ICm)値的下限。然而 对于实践的目的而言，下限可假定为约1 pM。E) 在另一实施方案中，如通过P-钙黏着蛋白依赖性细胞聚集测定法 所测量的，P-钙黏着蛋白抗体或其部分具有100nM或更小的ICso。在另一 实施方案中，如通过P-钙黏着蛋白依赖性细胞聚集测定法所测定的，所述 ICso小于50 nM、小于40 nM、小于20 nM、小于10 nM、小于1 nM、小 于500 pM、小于200 pM、小于100 pM或小于1 pM。典型地，如通过P-钙黏着蛋白依赖性细胞聚集测定法所测定的，不存在IQo值的下限。然而 对于实践的目的而言，下限可假定为约1 pM。F) 在另一实施方案中，在P-钙黏着蛋白依赖性球状体破坏测定法 中，与不存在IgG的对照样品相比，P-钙黏着蛋白抗体或其部分以至少2 的因数提高球状体破坏。在另一实施方案中，在P-钙黏着蛋白依赖性球状 体破坏测定法中，与不存在IgG的对照样品相比，P-钙黏着蛋白抗体或其 部分以至少3、至少4、至少6、至少10或至少15的因数提高球状体破 坏。G) 在另一实施方案中，P-钙黏着蛋白抗体或其部分与选自194-e06; 194-a02; 194-b09; 195-ell; 194-g09; 196-h02; 194-eOl; 196-dl0; 196-g03; 196層e06; 195-a09; 198-a09; 200-h06; g-194-b09; g-194-g09; g-196-g03; g-196- h02; g-194-e01; g-194-e06; 129-lc4;和g-129-lc4的抗体竞争结合P4丐黏着 蛋白。H) 在另一实施方案中，P-钙黏着蛋白抗体或其部分与选自194-e06; 194-a02; 194-b09; 195-ell; 194-g09; 196陽h02; 194-eOl; 196-dl0; 196-g03; 196-e06; 195-a09; 198-a09; 200-h06; g-194-b09; g-194-g09; g-196-g03; g-196-h02;本文档来自技高网...
【技术保护点】
具有至少一个选自以下组的特征的抗体或其抗原结合部分，所述组由： ａ）具有大于或等于１．５的Ｋ↓［Ｄ］（Ｅ）／Ｋ↓［Ｄ］（Ｐ）； ｂ）通过表面等离振子共振测量以５０ｎＭ或更小的Ｋ↓［Ｄ］与Ｐ－钙黏着蛋白结合； ｃ）对Ｐ－钙黏着蛋白而言，通过表面等离振子共振测量的ｋ↓［ｏｆｆ］小于或等于０．０１↑［ｓ－１］； ｄ）通过Ｐ－钙黏着蛋白依赖性细胞黏着测定法测量的ＩＣ↓［５０］为５０ｎＭ或更小； ｅ）通过Ｐ－钙黏着蛋白依赖性细胞聚集测定法测量的ＩＣ↓［５０］为５０ｎＭ或更小； ｆ）在Ｐ－钙黏着蛋白依赖性球状体破坏测定法中，与无ＩｇＧ的对照样品相比球状体破坏增加因数为２或更多； ｇ）与选自１９４－ｅ０６；１９４－ａ０２；１９４－ｂ０９；１９５－ｅ１１；１９４－ｇ０９；１９６－ｈ０２；１９４－ｅ０１；１９６－ｄ１０；１９６－ｇ０３；１９６－ｅ０６；１９５－ａ０９；１９８－ａ０９；２００－ｈ０６；ｇ－１９４－ｂ０９；ｇ－１９４－ｇ０９；ｇ－１９６－ｇ０３；ｇ－１９６－ｈ０２；ｇ－１９４－ｅ０１；ｇ－１９４－ｅ０６；１２９－１ｃ４；和ｇ－１２９－１ｃ４的抗体竞争结合Ｐ－钙黏着蛋白； ｈ）与选自１９４－ｅ０６；１９４－ａ０２；１９４－ｂ０９；１９５－ｅ１１；１９４－ｇ０９；１９６－ｈ０２；１９４－ｅ０１；１９６－ｄ１０；１９６－ｇ０３；１９６－ｅ０６；１９５－ａ０９；１９８－ａ０９；２００－ｈ０６；ｇ－１９４－ｂ０９；ｇ－１９４－ｇ０９；ｇ－１９６－ｇ０３；ｇ－１９６－ｈ０２；ｇ－１９４－ｅ０１；ｇ－１９４－ｅ０６１２９－１ｃ４；和ｇ－１２９－１ｃ４的抗体交叉竞争结合Ｐ－钙黏着蛋白； ｉ）与选自１９４－ｅ０６；１９４－ａ０２；１９４－ｂ０９；１９５－ｅ１１；１９４－ｇ０９；１９６－ｈ０２；１９４－ｅ０１；１９６－ｄ１０；１９６－ｇ０３；１９６－ｅ０６；１９５－ａ０９；１９８－ａ０９；２００－ｈ０６；ｇ－１９４－ｂ０９；ｇ－１９４－ｇ０９；ｇ－１９６－ｇ０３；ｇ－１９６－ｈ０２；ｇ－１９４－ｅ０１；ｇ－１９４－ｅ０６；１２９－１ｃ４；和ｇ－１２９－１ｃ４的抗体结合在Ｐ－钙黏着蛋白上相同的表位； ｊ）与选自１９４－ｅ０６；１９４－ａ０２；１９４－ｂ０９；１９５－ｅ１１；１９４－ｇ０９；１９６－ｈ０２；１９４－ｅ０１；１９６－ｄ１０；１９６－ｇ０３；１９６－ｅ０６；１９５－ａ０...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：克里斯托弗托德保尔，莫琳杰瑞鲍内，孟拉尼波耶勒，杰拉尔德菲尔斯加斯波森，大卫威廉格里格斯，理查德大卫汉德，威廉迪恩卓恩，理查德艾伦玛扎艾勒，拉尔夫雷蒙德米特尔，马克艾伦莫法特，巴雷特理查德思伊拉，托德李瓦纳斯达勒，
申请(专利权)人：辉瑞有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]
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