一种防治心血管病的番红花甙的提取方法技术

本发明专利技术公开了一种用价格低廉，来源广泛的栀子果实替代价格昂贵药源紧缺的番红花制备番红花甙（Ⅰ）、番红花甙↓［１］及其甙元番红花酸的药物组合物及其制备方法。该方法成本低、工艺简便、易于工业化生产，尚公开了所述药物组合物在防治心血管病方面的诸多药理功效。（*该技术在2014年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种防治心血管病的药物组合物及其制备方法与用途，具体地说，该药物组合物可用于防治因缺血、缺氧引起的各种心脑血管疾病。番红花为鸢尾科植物，是一种古老名贵的植物药，在我国医药名著《本草纲目》中记述番红花“甘平无毒，主治心忧郁积，气闷不散；久食令人心喜，又治惊悸。”国内外大量研究说明番红花主要成份为水溶性胡萝卜素，亦称番红花总甙、番红花素、西红花总甙、西红花素或栀子黄素，大量的动物实验研究证明，如美国专利U.S.4,176,179；U.S.4,070,460，番红花甙及其甙元能降低胆固醇、甘油三酯、防治动脉粥样硬化，冠心病、治疗脑水肿、骨髓损伤，乳头瘤、关节炎及高血压等。八十年代前，我国所用的番红花主要依赖进口，其国际市场价格一直成上升的势头，由15年前的200美元，突破至2000美元大关，故药源奇缺，目前尚不能在工业生产中利用该物质。尽管栀子果实中含番红花甙(中药大辞典下册1980页)，但数十年来，从未有人想到利用栀子果实代替番红花提取番红花甙或将番红花甙用于临床，药学界只是在番红花的引种、栽培方面做了大量工作，时至今日，仍有人怀疑栀子中真正含有番红花甙，这可能与从栀子中提取番红花甙的方法有关。以往食品制造领域技术人员通常用水或酒精水溶液从栀子果实中提取分离番红花甙，经过滤后，进行浓缩干燥，作为栀子色素而制造销售，广泛用于食品着色剂，但采用这类方法提取分离的番红花甙含量低，杂质多，常常引起变色，通常含量为5～10％(日本特许公开昭和52-1397，特许公开昭和58-27537)为了除去栀子色素中的不纯物，如多酚和环烯萜苷等，日本有关专家又研制使用苯乙烯加防腐剂(特许公开56-27753)和聚酰胺树脂二种吸附剂及使用半硬质聚乙烯类胶体(特许公开昭和61-50981)，然而前种方法繁琐、耗时；后者成本高。为了进一步克服上述不足，还有人采用酸性白土或活性白土，将其加入提取的黄色素溶液，分离出白土后，用水和酒精溶液洗脱，收集洗脱液，喷雾干燥(特许公开昭和52-129921)，但该方法番红花甙的含量仍然不够高，一般在10～15％，也费时费工。用上述所有的提取、分离、精制方法均不能得到番红花甙1单体。本专利技术的目的在于避免上述现有技术中的不足之处而提供一种对心血管系统疾病的预防、治疗作用显著，毒性低的药物组合物；从原药材中提取的甙类成分除可制备各种制剂外，尚可用于保健品、药品色素或食用色素。本专利技术的目的还在于利用国内大量生产、价格便宜的药材来代替依赖进口、价格昂贵的药材作为制备所述药物组合物的原料。本专利技术的目的尚在于利用成本低、操作简单、宜于工业化生产的制备方法、生产纯度较高因而适宜于制备药品的番红花甙、番红花甙1番红花酸成分。本专利技术的目的可以通过以下措施来达到一种防治心血管病的药物组合物其特征在于其中包括从栀子果实中提取的番红花甙，通式(I)，番红花酸及其盐作为活性成分。番红花甙1R1＝R2＝D-龙胆双糖番红花甙2R1＝D-龙胆双糖，R2＝D-葡萄糖番红花甙3R1＝D-龙胆双糖，R2＝H番红花甙4R1＝D-葡萄糖，R2＝-CH3番红花酸R1＝R2＝H同时还包括所述活性成分可用的载体。本专利技术还提供了制备含番红花甙、番红花甙1或其甙元番红花酸的药物组合物的方法，其包括下述步骤1.将市售或自采的成熟的栀子果实粉碎后，按常规方法脱脂；脱脂溶剂采用石油醚、乙醚、汽油或其它混合液。2.脱脂后的药材用含醇量为30～80％水醇溶液提取，醇液可选自甲醇、乙醇、丙醇或正丁醇。3.提取液经常压、减压或薄膜蒸发浓缩成浸膏，通常采用减压浓缩。4.将浸膏中加入2～5倍量的乙醇进行沉淀。5.滤除浸膏中的醇沉淀物后，保留滤液，将其浓缩成浓缩液。浓缩可以在减压或常压下按常规进行。6.浓缩液可采取A、B二种方法处理。A法，浓缩液用树脂柱层析分离，先用水冲柱洗掉杂质，再用含醇量30～95％水醇液梯度洗脱。所用树脂为市售人工合成的大孔型树脂，多孔型树脂或弱酸性阳离子交换树脂。所用醇为甲醇或乙醇，合并含番红花甙的洗脱组分，浓缩或喷雾干燥后，得番红花甙的混合物，即番红花甙，得率以重量计为0.4～1％。番红花甙即为暗棕色固体，呈粉末状，味微苦。本品易溶于0.1mol/L NaOH溶液，溶解于水和甲醇，略溶于无水乙醇，极微溶于氯仿。本品可使硫酸溶液显兰色，显示出番红花甙及其甙元的反应；本品溶液的最大可见吸收波长分别在458±1nm和432±1nm，吸收度比值为0.893；本品用KBr法测定红外光谱与番红花提取物的图谱完全一致，本提取物的柱层析带和高效液相图谱与番红花提取物的相一致，主要有四种甙番红花甙1、番红花甙2、番红花甙3和番红花甙4、但番红花提取物中甙2高于栀子提取物甙2，而甙3则低于栀子提取物。根据上述方法制备的番红花甙，能进一步分离番红花各甙。将番红花甙上硅胶柱层析，用甲醇∶乙酸乙脂∶水作为洗脱剂，按极性从小到大比例，常规梯度洗脱，合并相同组分，浓缩、干燥，重结晶，得番红花甙110～50％、番红花甙24～6％、番红花甙3和甙4微量。所得到番红花甙1纯度好，经高效液相色谱仪测定，含量在75～98％；番红花甙1为深红色针状结晶，熔点为176～178℃，溶解度和显色反应与番红花提取物一致。两种提取物分离纯化的甙1的薄层层析和高效液相层析图谱相一致。本品可见和红外光谱与番红花萨得拉标准光谱完全一致。根据核磁共振氢谱分析，元素分析和化学定量分析推测结构为上所示，分子式为C44H64O24，分子量为977。B法，也可将浓缩液直接用硅胶柱层析，用甲醇∶乙酸乙酯∶水作为洗脱剂，按极性从小到大配成不同比例的洗脱液，作为常规梯度洗脱，合并相同组分，分别浓缩、干燥、重结晶，得番红花甙110～50％、番红花甙24～6％、番红花甙3和甙4微量。7.将番红花甙溶于水，进行常规酸水解或碱水解，得到番红花酸，经高效液相色谱仪测定，番红花酸含量在75～98％，得率为10.0～30.0％。将番红花酸与医药上可接受的碱作用，即得番红花酸盐。常用的碱为1.0mol/L的氢氧化钠，氢氧化钾或氢氧化钙。番红花酸为褐色粉末，味微苦，气味特殊，熔点为284～286℃；溶于稀碱溶液，微溶于水及有机溶媒；显色反应与番红花提取制备的相一致；本品可见和红外光谱与其萨得拉标准光谱相一致。根据核磁碳谱分析、元素分析和化学定量分析，推证其结构为上所示，分子式为C20H24O4，分子量为368。8.番红花甙、番红花甙1、番红花酸及其盐可用常规制剂方法制成片剂、冲剂、胶囊剂、丸剂、注射剂、控释剂或缓释剂。常用的药用载体有(a)填料和增溶剂，如淀粉、乳糖、葡萄糖、甘露糖醇和二氧化硅；(b)粘合剂，例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮；(c)致湿剂，如甘油；(d)崩解剂，琼脂、碳酸氢钙、碳酸氢钠；(e)溶解延缓剂；(f)再吸收加速剂，如季铵化合物；(g)润湿剂，如十六醇，硬脂酸单甘油酯；(h)吸附剂，如高岭土和膨润土；(i)润滑剂。丸剂的制作方法取番红花甙1.25～20.09克，加炼蜜100克，糯米粉200克，以熟知的方法制成小蜜丸100克或大蜜丸每丸3克。胶囊的制作方法取番红花甙1.25～20克，淀粉5.0克，乳糖5.0克，分别过四号筛，加入1％羧甲基纤维素钠适量制成软材，经二本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种防治心血管病的药物组合物，其特征在于：其中包括从栀子果实提取番红花甙，通式（Ⅰ），番红花甙↓［１］、番红花酸及其盐作为活性成分，＊＊＊ （Ⅰ）番红花甙↓［１］：Ｒ↓［１］＝Ｒ↓［２］＝Ｄ－龙胆双糖番红花甙↓［２］：Ｒ↓［１］ ＝Ｄ－龙胆双糖，Ｒ↓［２］＝Ｄ－葡萄糖番红花甙↓［３］：Ｒ↓［１］＝Ｄ－龙胆双糖，Ｒ↓［２］＝Ｈ番红花甙↓［４］：Ｒ↓［１］＝Ｄ↓［５］葡萄糖，Ｒ↓［２］＝－ＣＨ↓［３］番红花酸：Ｒ↓［１］＝Ｒ↓［２］＝Ｈ同时还包括所述活性 成分可药用的载体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：钱之玉，江声华，刘璇，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]