(-)-△9-反-四氢大麻酚的纯化方法技术

公开了一种从大麻素混合物中分离出（－）－△↑［９］－反－四氢大麻酚的制造性分离方法。该方法包括至少一个其中流动相流过固定相的色谱步骤。该固定相含有一种衍生多糖，流动相含有二氧化碳。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及纯化(-)-Δ9-反-四氢大麻酚的方法。此化合物是用色谱方法从大麻素混合物中被分离出来。(-)-Δ9-反-四氢大麻酚是大麻烟的活性成分。它在治疗上作为吸入或口服药物使用，用于刺激艾滋病和癌症化疗患者的食欲。四氢大麻酚(THCs)可以从大麻烟(植物大麻的叶和花尖的混合物)中分离。或者是，THCs可以如WO 02/096899中所述地用合成方法得到。为了配制到药品之中，需要对映异构纯的THCs，但是不管是用分离法或是用合成法制备的THCs，其纯化都是一个难题。本专利技术人寻求提供一种得到对映异构纯的(-)-Δ9-反-四氢大麻酚((-)-Δ9-THC)的方法。色谱技术已被用来将(-)-Δ9-THC与其它大麻素化合物分离。采用超临界流体色谱法实现了药物样品中大麻产物的鉴别。下述文献描述了这些方法Bckstrm et al(Science & Justice，1997，37(2)，91-97)，Cole(“Analysis of Cannabisby Supercritical Fluid Chromatography with Ultraviolet Detection”，pages 145-148 in“Supercritical Fluid Methods and Protocols”ed.by Williams and Clifford)，Veress(Journal of Chromatography A，668(1994)，285-291)and Later et al(Journal ofChromatographic Science，1986，24，249-253)。在这些方法中，分析很少量的样品(一般为μg数量)，而且在检测步骤例如用火焰离子化检测或用化学电离质谱法)中(-)-Δ9-THC经常被破坏。这些色谱方法实现了(-)-Δ9-THC与其它大麻素化合物的分离，但完全不适合制备足够量的对映异构纯的(-)-Δ9-THC以便掺入到药物产品中。US 6,403,126研究了从大麻烟中制备(-)-Δ9-THC的问题。它建议利用色谱方法可以实现制备性分离，其中洗脱剂是一种超临界流体如二氧化碳，可以加或不加有机溶剂调节剂。但是，US 6,403,126没有实际证实能够用超临界流体色谱法制备(-)-Δ9-THC，仅有的实施例是使用乙腈和水或者甲醇和水作为流动相。Levin等(Journal of Chromatography A，654(1993)，53-64)发展了一种用于分离大麻素化合物的对映体混合物的分析方法。该色谱方法使用一个以载在大孔硅胶上的淀粉三(3，5-二甲基氨基甲酸酯)为基础的Daicel ChiralpakAD柱。流动相是含乙醇或丙醇的正己烷。这种对映选择性分析方法确定了样品的旋光纯度，但没有提供可用数量的分离的对映体。虽然已使用色谱法分析大麻素化合物样品，但尚未证实能有效地制备性分离对映异构纯的(-)-Δ9-THC。本专利技术人设计了一种色谱方法，它能用来制备大量对映异构纯的(-)-Δ9-THC，用以掺入到药物产品中。因此，本专利技术提供了一种将(-)-Δ9-反-四氢大麻酚自大麻素混合物中分离的制备性分离方法，该方法包括至少一个其中流动相流过固定相的色谱步骤，其特征在于，该固定相包含一种衍生的多糖，流动相包含二氧化碳。本专利技术人发现，将衍生的多糖固定相和含二氧化碳的流动相相结合的一种色谱方法提供了(-)-Δ9-THC的有效的制备性分离。“制备性分离”意味着一种方法，它能在合理的时限，即，一天之内，提供至少0.1g纯化的产物，优选至少1g纯化的产物。优选本专利技术中的流动相是二氧化碳和一种或多种调节剂的混合物。该调节剂可以是任何液体溶剂，例如醇、乙酸乙酯、乙腈或二氯甲烷。调节剂应该与固定相匹配，例如，乙酸乙酯和二氯甲烷不能与Chiralpak AD柱一起使用，因为它们会破坏柱子。调节剂宜为C1-C5醇，最好是乙醇。已发现二氧化碳和乙醇流动相特别优越。当按照WO02/096899中概述的合成路线制备(-)-Δ9-THC时，一种杂质是“DPA-iso”(其化学结构见附图说明图1)。当流动相为二氧化碳/乙醇时，DPA-iso在(-)-Δ9-THC之前被洗出。由于顶替色谱的作用，在主组分之前流出的少量杂质通常是集中的，因此可以除掉所有的DPA-iso。使用替代的庚烷/乙醇流动相对，DPA-iso在(-)-Δ9-THC之后流出。拆分开尾随主组分流出的次要组分要困难得多，因此二氧化碳/乙醇流动相构成了比庚烷/乙醇明显改进的方法。二氧化碳容易除去，因此(-)-Δ9-THC产物可以以含有调节剂作为溶剂的溶液形式提供。所以最好是选择一种(-)-Δ9-THC在其中稳定的调节剂。二氧化碳与调节剂的重量(g)与体积(cm3)比在100∶1至50∶50的范围内，优选为95∶5至75∶25，最优选是85∶15至75∶25。二氧化碳与调节剂之比在色谱过程中可以改变。固定相包含一种衍生的多糖，是一种固体手性固定相。衍生的多糖适合固定在诸如硅胶、锆、氧化铝、陶瓷或其它硅石等载体上，优选固定在硅胶上。衍生的多糖包括淀粉、纤维素、壳聚糖、木聚糖、凝胶多糖、葡聚糖和异二果聚糖类多糖。优选淀粉类多糖。一种特别优选的固定相是载在大孔硅胶上的淀粉三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)，它由Daicel Chemical Co.制造，作为ChiralpakAD销售。另一类优选的固定相是ChiralpakIA，它与ChiralpakAD相似，但是有一种固定的手性选择剂，因此可以使用范围更广的溶剂。固定相优选是一种包封的衍生多糖；多糖基团没有与载体结合。一般认为包封的固定相可以防止(-)-Δ9-THC分解成(-)-Δ8-THC。在本专利技术的一项优选的实施方案中，该方法包括另一个色谱步骤，其中一个流动相流过一个固定相，该固定相是非手性固定相并由硅胶及衍生硅胶中适当选择，硅胶是用氨基丙基硅氧烷、二醇取代的丙基硅氧烷或2-乙基吡啶硅氧烷基团衍生转化的。固定在硅胶载体上的2-乙基吡啶硅氧烷(见下图)是一种优选的非手性固定相，因为(-)-Δ9-THC不会像用某些非手性静止相所观察到的降解成(-)-Δ8-THC。 这个进一步的色谱步骤保证了从大麻素混合物中除去杂质(-)-Δ9-abn-THC(化学结构见图1)。在该进一步的色谱步骤中，流动相宜含有二氧化碳，优选二氧化碳与一种或多种调节剂的混合物。调节剂可以是任何有机溶剂，但宜为C1-C5醇，最优选乙醇。二氧化碳与调节剂的重量(g)对体积(cm3)比宜在100∶1至50∶50的范围内，优选为100∶1至75∶25，最优选为95∶5至90∶10。二氧化碳与调节剂之比在色谱过程中可以变化。第一个色谱步骤宜使用非手性的固定相，优选固定在二氧化硅载体上的2-乙基吡啶硅氧烷，第二个色谱步骤宜使用衍生的多糖固定相，最优选承载在大孔硅胶上的淀粉(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)。优选在2-乙工吡啶硅氧烷相之后使用淀粉类固定相，因为已发现淀粉相会被粗制的大麻素原料中可能存在的溶剂杂质破坏，而2-乙基吡啶硅氧烷更为坚固。然而，将两个步骤颠倒，即，在淀粉相之后使用2-乙基吡啶硅氧烷相，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制造性分离方法，其中由大麻素混合物中分离出（－）－△↑［９］－反－四氢大麻酚，该方法包括至少一个其中流动相流过固定相的色谱步骤，其特征在于，该固定相包含衍生的多糖，流动相含有二氧化碳。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：FO盖泽尔，JJ基南，R罗西，A桑切斯，JM惠兰，
申请(专利权)人：约翰逊马西有限公司，
类型：发明
国别省市：GB[英国]