本发明专利技术公开了一种赖氨酸芽孢杆菌，它是由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏的保藏号：CGMCC No.13142的赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.JX‑5。本发明专利技术保藏号为CGMCC No.13142的赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.JX‑5，可以有效降解拟除虫菊酯类农药和氨基甲酸酯类农药，可用于这些物质污染的土壤、水体的生物修复或生物净化，保护生态环境，应用前景优良。
Lysine bacillus and application thereof in degrading pesticide
The invention discloses a lysine bacillus, which is composed of a collection number of bacterial China microbe preservation management committee preserved: CGMCC No.13142 lysine Bacillus Lysinibacillus sp.JX 5. The preservation number is CGMCC No.13142 lysine Bacillus Lysinibacillus sp.JX 5, can effectively degrade pyrethroid pesticides and carbamate pesticides, these substances can be used for purifying contaminated water and soil bioremediation or biological, ecological environment protection, excellent prospects.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一株赖氨酸芽孢杆菌及其在降解农药中的应用。
技术介绍
氯氰菊酯(Cypermethrin，CY)是拟除虫菊酯类农药中最常用品种之一，其广泛应用于茶树、果蔬、人畜等虫害的防治。由于其具有疏水性强、对光热稳定等特性，因此自然降解速率慢，在环境中半衰期长达94.2d-1103d，易导致其在环境中残留蓄积，因此其在土壤、水体、农畜产品中常出现较高的检出率和超标率。氯氰菊酯对鱼类及其他水生动物有高毒性，其还能在动植物体内蓄积，对神经系统有急性毒性，并能损伤男性生殖系统发育，长期接触还可能引发多种慢性疾病，美国环境保护局已将其认定为一种致癌剂。在我国广泛应用于茶树、果蔬、人畜等虫害的防治，氯氰菊酯类农药的过量使用不仅造成了环境污染，同时由于食物链的传递，在动物性来源食品中也存在严重的残留现象，从而严重危害人体健康，随着人们生活质量的不断提高和环保意识的逐渐增强，该类农药的残留问题已越来越引起人们的关注。如何消除氯氰菊酯类农药对环境的危害，已经成为关系人类健康和国民经济发展的重大科学问题。以微生物降解为基础的生物修复是一种环境友好型污染物去除方法。氨基甲酸酯(Carbamate；通式RO(CO)NRR)类农药是在有机磷酸酯之后发展起来的合成农药，广泛应用于除虫，杀螨，除草等农业生产中。氨基甲酸酯类农药一般无特殊气味，在酸性环境下稳定，遇碱分解，在水中溶解度较高。大多数品种毒性较有机磷酸酯类低，并不是剧毒化合物，但具有致癌性，可经呼吸道、消化道侵入机体，也可经皮肤黏膜缓慢吸收。氨基甲酸酯类农药具有致突变、致畸和致癌作用。例如将西维因以各种方式处理小鼠和大鼠，均可引起癌变，并对豚鼠、狗、小鼠、猪、鸡和鸭有致畸作用。急性氨基甲酸酯类农药中毒是短时间内密切接触氨基甲酸酯类杀虫剂后，因体内胆碱酯酶活性下降而引起的毒蕈碱样，烟碱样和以中枢神经系统症状为主的全身性疾病。因此，国际癌症研究机构在2007年把氨基甲酸酯类列为2A类致癌物。如何消除这些危害，已经受到广泛关注，目前以微生物降解是较为行之有效的办法。拟除虫菊酯类农药和氨基甲酸酯类农药是常用的杀虫剂，在尚未找到新型替代化合物之前，未来几十年内仍将被广泛使用，因而迫切需要研究残留农药的降解。微生物降解是各种农药降解方法中较为绿色和高效的一种。然而，现有细菌对拟除虫菊酯类农药和氨基甲酸酯类农药的降解速度慢，如，公开号为CN101139559A的专利申请公开了一种不动杆菌，以10％的接种质量接种如20mg/L的氯氰菊酯溶液中，处理24h后，降解率仅77.8％；胡桂萍，氟氯氰菊酯降解菌FLQ-11-1分离鉴定、降解特性及降解机理，中国博士学位论文全文数据库工程科技Ⅰ辑2016年第08期中公开了一种细菌，其在作用5天后对100mg/L的甲氰菊酯的降解率也仅90.23％；公开号为CN1723276A公开的细菌作用于氨基甲酸酯化合物后10天时，降解率仅60％。急需提供一种可以快速、高效降解拟除虫菊酯类农药和氨基甲酸酯类农药的新的菌株。
技术实现思路
本专利技术提供了一种新的赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillussp.)及其在降解拟除虫菊酯类农药和氨基甲酸酯类农药中的应用。本专利技术提供了一种赖氨酸芽孢杆菌，它是由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏的保藏号：CGMCCNo.13142的赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillussp.JX-5。本专利技术赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillussp.JX-5，于2016年10月24日保藏在于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地点为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏号为CGMCCNo.13142。本专利技术还提供了赖氨酸芽孢杆菌在降解拟除虫菊酯类农药和/或氨基甲酸酯类农药中的用途。其中，所述赖氨酸芽孢杆菌是保藏号为CGMCCNo.13142的赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillussp.JX-5。其中，所述拟除虫菊酯类农药是氰戊菊酯、溴氰菊酯或氟氯氰菊酯。其中，所述氨基甲酸酯类农药是(1-萘基)-N-甲基氨基甲酸酯。本专利技术还提供了一种降解农药的方法，包括如下步骤：(1)取赖氨酸芽孢杆菌，复苏制备种子液；(2)将种子液加入待处理的样品中，混匀，即可。步骤(1)中，所述赖氨酸芽孢杆菌是保藏号CGMCCNo.13142的赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillussp.JX-5。步骤(1)中，所述种子液的浓度不低于106cfu/mL。优选地，所述种子液的浓度为106～109cfu/mL。所述种子液的按照如下方法制备：取赖氨酸芽孢杆菌，用LB培养基培养，调整浓度，即可。本专利技术赖氨酸芽孢杆菌JX-5(Lysinibacillussp.JX-5)，其可以高效、快速降解拟除虫菊酯类农药和氨基甲酸酯类农药，用于这些物质污染的土壤、水体的生物修复或生物净化，保护生态环境，具有极好的应用前景。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图1为本专利技术菌株JX-5培养48h的菌落培养特征。图2为本专利技术菌株JX-5的细胞形态图。图3为本专利技术降解菌株JX-5对西维因的降解能力。图4为本专利技术降解菌株JX-5对氯氰菊酯的降解能力。图5为本专利技术降解菌株JX-5降解西维因及其产物的色谱图。具体实施方式本专利技术培养基：Luria-Bertani培养基(LB)：酵母浸膏(Yeastextract)5.0g；胰蛋白胨(Caseintryptone)10g；氯化钠(Sodiumchloride)10g；蒸馏水(H2O)1000mL；调pH至7.0，此固体培养基是在液体培养基中再加20g/L琼脂(Agar)制成的。培养基于121℃，灭菌20min备用。实施例1本专利技术赖氨酸芽孢杆菌的分离鉴定1、分离取醋赔样品，以温度、pH值、农药浓度和培养基为富集条件，经过多种农药梯度驯化，筛选得到的一株农药降解菌，编号为JX-5。2、鉴定(1)形态、生理生化特征形态：挑取菌株JX-5至LB固体培养基平板培养，记录其菌落形态特征，挑取单菌落进行涂片、革兰氏染色，于10×100倍油镜下观察记录颜色、大小、形状、排列等。生理生化鉴定参见《伯杰细菌鉴定手册》第八版。菌株JX-5的形态鉴定(如图1、图2所示)：革兰氏染色阳性，芽孢杆菌，菌落近圆形，扁平，不透明，微黄色，表面皱褶，边缘不整齐。表1菌株JX-5生理生化鉴定结果(2)16SrDNA鉴定对菌株16SrDNA基因的PCR扩增，PCR条件：94℃预变性5min；然后94℃、45s，56℃、45s，72℃、90s，循环30次；最后72℃延伸10min；PCR产物经电泳检测，扩增产物由成都擎科梓熙生物技术有限公司测序，菌株JX-5的16SrDNA序列如SEQIDNO.1所示:TTGACTGGCGGCGTGCTATACATGCAGTCGAGCGAACAGAGAAGGAGCTTGCTCCTTTGACGTTAGCGGCGG本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种赖氨酸芽孢杆菌，其特征在于：它是由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏的保藏号：CGMCC No.13142的赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp.JX‑5。
【技术特征摘要】
1.一种赖氨酸芽孢杆菌，其特征在于：它是由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏的保藏号：CGMCCNo.13142的赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillussp.JX-5。2.赖氨酸芽孢杆菌在降解拟除虫菊酯类农药和/或氨基甲酸酯类农药中的用途。3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于：所述赖氨酸芽孢杆菌是保藏号为CGMCCNo.13142的赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillussp.JX-5。4.根据权利要求2所述的用途，其特征在于：所述拟除虫菊酯类农药是氰戊菊酯、溴氰菊酯或氟氯氰菊酯。5.根据权利要求2所述的用途，其特征在于：所述氨基甲酸酯类农药是(1-萘基)-N-甲基氨基甲酸酯。6.一种...
【专利技术属性】
技术研发人员：李建龙，代敏，龙娜娜，蒋蔓，
申请(专利权)人：成都医学院，
类型：发明
国别省市：四川;51
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