二步树脂法制备河豚毒素的方法及河豚毒素制剂技术

本发明专利技术公开了一种工厂规模化生产河豚毒素的制备方法。原料为河豚鱼内脏，采用一种提取罐提取、二步树脂法纯化和二次结晶生产工艺，得以使河豚毒素产品达到工厂规模化生产。生产过程中操作安全、简便，获得的产品质量高，产品收率高，产品纯度达到９６％－９９％。符合作为医学临床应用和生物试剂应用所需的品质质量。二步树脂法生产河豚毒素的制备方法，适用河豚毒素产品的批量生产。其产品可作为临床戒断生物碱类成瘾性依赖药物综合症（戒毒）用药，以及可作为镇痛用药替代吗啡、度冷丁等。还可作为解痉、镇静、局部麻醉、抗瘙痒、及心动过速和降血压等临床用药。同时也可作为离子通道阻断作用研究的生物试剂。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种以河豚鱼内脏为原料规模化生产河豚毒素的制备方法。其产品可作为临床用于戒毒和镇痛之药剂。作为离子通道阻断作用研究的生物试剂。
技术介绍
河豚毒素(简称TTX)是一种由河豚鱼内脏提取的低分子量生物碱类物质。由于其独特的化学结构使其成为细胞钠离子通道专一阻断剂。因此其在生物学研究领域作为生物试剂有着不可替代的位置。河豚毒素在医学临床上所显示的药理学作用，早在上世纪30年代就已有用于临床戒断生物碱类成瘾性病症的报道。在镇痛治疗方面也不断有报道推出。因此，其无论在生物学研究领域还是在医学临床应用方面，都显示了十分重要的地位。河豚毒素虽然在生物学研究领域和医学临床应用有着重要的作用，但其自身是一个具有极强毒性的剧毒物质。同时，由于河豚毒素在河豚鱼内脏的单位含量极低，给提取纯化带来相当大的困难。所以选择一种安全、操作简便、有较高收率的规模化生产制备河豚毒素的方法，就显示出极为重要的作用。目前提取河豚毒素的方法有许多种，但这些方法都在不同程度上存在着某些缺点。如高效液相法使用设备昂贵(高压液相仪)，且产品一次产出率低，难于满足规模化生产；膜过滤法众所周知膜过滤原理是在某一分子量区本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种二步树脂法制备河豚毒素的方法，其特征是该方法包括下述步骤：１）将河豚鱼内脏破碎，加去离子水低温搅拌下提取，得提取混合液，将其加热以凝固蛋白、吊滤去除固形物，获得微黄色初毒液；２）初毒液经非极性吸附树脂树脂搅拌吸附，搅拌速度１０－３０转／分钟，吸附５小时；吸附完毕后，滤出树脂，获无杂质粗毒液；３）将粗毒液上树脂柱，经离子交换型树脂树脂吸附，吸附完毕经水洗后，以４％醋酸溶液ｐＨ＝３．５为洗脱液，进行洗脱；收集高浓馏份，获得的液体，即河豚毒素粗品；４）将所得的液体河豚毒素粗品进行低温减压浓缩，浓缩至小体积，得高浓度河豚毒素液；５）调节所得高浓度河豚毒素液ｐＨ＝７．５－９．０，使达到等电点，置低温...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈家童，苏同芳，梁同春，孙存祯，林平生，贺秉军，王同顺，
申请(专利权)人：南开大学，天津南大日月生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]