制备麦考酚酸和其酯衍生物的方法技术

提供了制备麦考酚酸的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及麦考酚酸的分离。
技术介绍
麦考酚酸，化学名6--4-甲基-己-4-烯酸，6--4-甲基-己-4-烯酸，分子式C17H20O6，分子量320.35，CAS登记号24280-93-1，结构为 麦考酚酸(MPA)由Gosio于1893年分离，是第一种良好鉴定的抗生素(Bentley 2001)。它由若干种青霉菌所产生，包括短密青霉(P.brevicompactum)、P.scabrum、P.nagemi、娄地青霉(P.roqueforti)、P.patris-mei和纯绿色青霉(P.viridicatum)(Clutterbuck et al.1932，Jens和Filtenborg 1983)。MPA除了抗菌活性(Abraham 1945)，也具有抗真菌(Gilliver1946)、抗病毒(Ando et al.1968)和抗肿瘤性质(Noto et al.1969)，在临床上已被用于治疗牛皮癣(Johnson 1972)。最近，认识到其是一种强效的免疫抑制剂(Bentley 2000)。MPA药理性质的至少一个原因是，在若干生物系统中它在单磷酸次黄嘌呤核苷脱氢酶(IMPD)水平上干扰鸟嘌呤的生物合成。因此，MPA对核酸合成具有显著的抑制效应(Franklin和Cook 1969)。IMPD的抑制作用也是MPA的淋巴细胞特异性免疫抑制效应的基础。因为淋巴细胞主要依赖于鸟嘌呤的从头生物合成，这种途径的减少导致抑制T和B淋巴细胞增殖。MPA被撤出是因为它副作用的高发生率(原发感染如带状疱疹和胃肠副作用如胃部不适)。2-吗啉代乙酯衍生物麦考酚酸吗乙酯(CellCept)没有这些缺点，并比麦考酚酸具有更好的生物利用度。麦考酚酸吗乙酯最近被批准(1995年在美国，1996年在欧洲)用于预防接受同种肾脏移植患者的器官排斥(Shaw和Nowak 1995，Sollinger1995)。经口服给药后，酯形式快速水解为游离酸。然后MPA主要转化为非活性的葡萄糖醛酸代谢产物，其通过尿排泄被清除(Bentley2001，Wiwattanawongsa et al.2001)。在WO 01/21607、WO 01/64931和GB 1158387中从发酵液中分离MPA。然而从发酵液中分离MPA是无效的。通过常规过程分离到的MPA具有很多的杂质。本专利技术提供了分离麦考酚酸的有效方法。专利技术概述本专利技术涉及麦考酚酸及其酯。本专利技术的一个实施方案涉及分离麦考酚酸的方法，包括提供含有麦考酚酸的浓缩碱性混合物；将该混合物与第一水不混溶溶剂混合，形成水相和第一水不混溶相；分离水相；在pH小于约7下将水相与第二水不混溶溶剂混合，形成水相和第二水不混溶相；分离第二水不混溶相；浓缩第二水不混溶相；结晶麦考酚酸。优选含有麦考酚酸的浓缩碱性混合物通过包括以下步骤的方法制备碱化含有麦考酚酸的发酵液，并去除菌丝体，获得碱性混合物；酸化碱性混合物获得酸性混合物；过滤和碱化酸性混合物获得浓缩碱性混合物。含有麦考酚酸的浓缩碱性混合物也可通过全发酵液萃取制备。优选浓缩的碱性混合物与第一水不混溶溶剂在pH约8至约11下混合。优选使用氨水或氢氧化钠调节pH。优选的是，第一或第二水不混溶溶剂至少为C4-C7酯或C4-C7酮的一种。更优选的是，第一或第二水不混溶溶剂至少为乙酸乙酯、乙酸异丁酯或乙酸丁酯的一种。最优选乙酸乙酯。浓缩的碱性混合物与第一水不相溶相混合后形成水相，优选在与第二水不混溶溶剂混合之前再萃取至少一次。优选的是，水相和第二水不混溶溶剂在pH约5至6.5下混合。优选使用硫酸、磷酸或盐酸的至少一种调节pH。在与第二水不混溶溶剂混合后形成的水相优选再萃取至少一次。所得的来自萃取液的水不混溶相在结晶之前优选通过蒸馏浓缩，更优选通过过滤，最优选通过膜过滤。优选的过滤膜为塑料过滤膜。麦考酚酸的结晶优选通过冷却浓缩物实现。在一个优选的实施方案中，通过本专利技术方法分离的麦考酚酸经HPLC面积百分比测量的纯度至少为约99.5％。本专利技术也包括制备含有麦考酚酸的浓缩碱性混合物的方法，包括碱化含有麦考酚酸的发酵液，并去除菌丝体，获得碱性混合物；酸化碱性混合物获得酸性混合物；在碱性pH下过滤酸性混合物获得浓缩的碱性混合物。优选使用膜过滤进行过滤。优选的过滤膜为陶瓷膜或塑料微滤膜。优选的是，通过过滤去除菌丝体。去除菌丝体的优选方法包括微滤膜、真空过滤器、带式过滤机、压滤器、真空吸滤过滤器(nutsfilter)、离心或无孔转鼓式离心机。本专利技术还包括制备麦考酚酸酯的方法，包括提供含有麦考酚酸的浓缩碱性混合物；将该混合物与第一水不混溶溶剂混合形成水相和第一水不混溶相；分离水相；在pH小于约7下将该水相与第二水不混溶溶剂混合，形成水相和第二水不混溶相；分离第二水不混溶相；浓缩第二水不混溶相；结晶麦考酚酸；以及将麦考酚酸转化为酯。优选该酯为吗啉代乙酯。也优选该酯为C1-C4烷基酯，更优选为甲酯或叔丁酯。在一个实施方案中，本专利技术包括固态麦考酚酸，经HPLC面积百分比测量其纯度至少为约99.5％，优选至少约99.9％。本专利技术也包括固态麦考酚酸，经HPLC面积百分比测量其总杂质含量少于约0.1％，优选小于约0.08％。本专利技术还包括固态麦考酚酸，其熔点为约141.6℃至约144.6℃，更优选熔点为约143.1℃。在另一个实施方案中，本专利技术包括包含本专利技术麦考酚酸或其酯和药物可接受赋形剂的药物组合物。优选的酯为吗啉代乙酯。本专利技术也包括通过给予有需要的哺乳动物治疗有效量的本专利技术组合物，抑制哺乳动物的免疫系统的方法。附图简述附图说明图1A是由实施例9产生的麦考酚酸样品的粉末X射线衍射图。图1B是对应图1A的粉末XRD值的表。图2A是由实施例10产生的麦考酚酸样品的粉末X射线衍射图。图2B是对应图2A的粉末XRD值的表。专利技术详述本专利技术包括分离麦考酚酸的方法。本专利技术的分离方法可产生各种杂质小于约0.1％的MPA。具体而言，本专利技术包括从麦考酚酸的浓缩碱性混合物中纯化麦考酚酸的方法。也提供了从发酵液制备含有麦考酚酸的浓缩碱性混合物的方法。本文使用的术语“混合物”包括异质和同质混合物，例如溶液、悬浮液或淤浆。异质混合物，例如，可在萃取期间形成，其中麦考酚酸通过碱化溶于溶剂中。因为异质混合物也可含有其它杂质，不经过滤可能不产生澄清溶液。本文使用的术语“碱”或“碱性”是指pH大于约7。本文使用的术语“酸性”是指pH小于约7。本申请各处的pH值是指水相的pH。本文使用的术语“浓缩”涉及分离之前的麦考酚酸混合物时是指麦考酚酸的浓度为约5g/l或更高。从发酵液体积计算，从1体积发酵液获得大约1/3体积或更少的浓缩溶液或异质混合物。可试验通常为本领域已知的发酵方法，从青霉菌菌株中获得MPA，如GB 1,157,099或JP 59091891中所阐述，获得发酵液。可通过各种方法，例如全发酵液萃取，从发酵液中制备浓缩的混合物，其中将全发酵液的萃取物浓缩成残留物。在另外一个实施方案中，本专利技术提供了获得麦考酚酸的浓缩碱性混合物的方法。最初碱化发酵液，随后通过过滤去除菌丝体获得滤液。接着酸化滤液导致MPA的固化。在这个步骤中，形成结晶或悬浮液。通过使用技术人员已知的过滤器如真空鼓式过滤器、微滤膜、带式过滤机、压滤本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离麦考酚酸的方法，所述方法包括以下步骤：ａ）提供含有麦考酚酸的浓缩碱性混合物；ｂ）将所述混合物与第一水不混溶溶剂混合，形成水相和第一水不混溶相；ｃ）分离水相；ｄ）在ｐＨ小于约７下将水相与第二水不混溶溶剂 混合，形成水相和第二水不混溶相；ｅ）分离第二水不混溶相；ｆ）浓缩第二水不混溶相；和ｇ）结晶麦考酚酸。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：V克里，Z措维克，
申请(专利权)人：特瓦药厂私人有限公司，
类型：发明
国别省市：HU[匈牙利]