一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒及测定方法技术

本发明专利技术提供了一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒，本发明专利技术试剂盒中，通过将抗体和二抗包被于试纸上，并通过使用荧光颗粒或者彩色颗粒等信号颗粒为标记检测物，从而可以通过将待测样本与信号颗粒一次混合后，直接采用层析的方法将糖化血红蛋白在试纸上分离得到，并进一步通过荧光层析读数仪或者肉眼直接对照检测得到样本中糖化血红蛋白比例。本发明专利技术试剂盒具有成分结构稳定，检测便捷，操作方便，结果准确等优点。同时，本发明专利技术还提供了一种测定糖化血红蛋白比例的方法，本发明专利技术方法中，通过使用本发明专利技术试剂盒进行检测，因而具有操作便捷，检测方法简单，检测结果准确等优点。

Reagent kit and method for measuring glycosylated hemoglobin ratio

The present invention provides a kit for determination of glycosylated hemoglobin proportion, the kit of the invention, the anti antibody and two were wrapped in paper, and through the use of fluorescent particles or particles and other particles as color signal marker detection, which can be tested by this kind of signal and a mixture of particles the chromatographic methods, the glycosylated hemoglobin in the test were obtained, and further through the fluorescence tomography reading instrument or the naked eye detection control of glycosylated hemoglobin in the sample proportion. The kit of the invention has the advantages of stable structure, convenient detection, convenient operation and accurate result. At the same time, the invention also provides a method for the determination of glycosylated hemoglobin ratio, the method of the invention, were detected by using the kit of the invention, which has convenient operation, simple detection method, has the advantages of accurate detection results.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及糖化血红蛋白测定领域，具体的，本专利技术涉及一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒及测定方法
技术介绍
糖化血红蛋白(即HbA1c)，是人体血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物。一般临床上使用糖化血红蛋白占总血红蛋白的百分比作为衡量糖化血红蛋白含量是否正常的指标。糖化血红蛋白占总血红蛋白的百分比可以稳定可靠的反应出检测前4个月的平均血糖水平，且这种检测不会受到抽血时间，是否空腹，是否使用胰岛素等因素干扰，是国际上糖尿病监控的“金标准”。现有技术中，为了得到糖化血红蛋白的比例，往往需要分别检测总血红蛋白和糖化血红蛋白的含量，再进行计算得出糖化血红蛋白的比例。而目前主要的血红蛋白检测方法有：高效液相色谱法、硼酸亲和层析法、离子交换层析法、免疫比浊法、酶法。然而，高效液相色谱法、硼酸亲和层析法以及离子交换层析需要使用专业的大型仪器，且仪器价格昂贵，其实际应用并不便捷；同时，免疫比浊法需要使用大量抗体，且需要使用大型生化分析仪器才能进行检测，也无法实现小型化，便捷化的检测；同样的，酶法也需要使用多种酶配合进行反应，并经过大型生化分析仪仪器进行检测，才能得到最终结果。为了解决无法实现小型化、便捷化测定糖化血红蛋白比例的问题，现有技术中也进行了一定的尝试与实验。例如现有技术(CN101915849A，公开日：2010年12月25日)就公开了一种便捷化测定糖化血红蛋白的方法，其包括如下步骤：a.将全血样本与溶血液混合均匀；b.取适量溶血后的样本加入悬浮在甘氨酸缓冲液中的乳胶；c.经预定时间后再分别加入抗体B试剂及抗体A试剂；d.混合均匀后在单波长光照射条件下,通过特定蛋白分析仪读取散射值；e.最后根据散射值从标准曲线图中读取糖化血红蛋白的百分比。然而，这种方法仍然存在不便之处，例如其检测过程中，需要额外加入较大量的抗体A和抗体B试剂，这不仅提高了检测成本，同时由于需要额外加入抗体试剂，所以也进一步带来了抗体试剂运输和储存的问题；进一步的，单波长光照检测和蛋白分析仪读取都需要价格较为昂贵的设备，其操作也较为繁琐，需要进行大量的培训以保证检测结果准确，而这也进一步提高了检测的成本和不便捷性。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的在于，提供一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒，本专利技术试剂盒中，本专利技术提供了一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒，本专利技术试剂盒中，通过将抗体和二抗包被于试纸上，并通过使用荧光颗粒为标记检测物，从而可以通过将待测样本与荧光颗粒一次混合后，直接采用层析的方法将糖化血红蛋白在试纸上分离得到，并进一步通过荧光层析读数仪直接对照检测得到样本中糖化血红蛋白比例。而这也同时解决了现有技术中需要多仪器配合使用所带来的操作不便捷的技术问题。本专利技术试剂盒具有成分结构稳定，检测便捷，操作方便，结果准确等优点。本专利技术的第二个目的在于，提供一种测定糖化血红蛋白比例的方法。本专利技术方法中，通过使用本专利技术试剂盒进行检测，因而可以解决现有技术中方法由于特异性抗体储存运输以及大量使用所带来的操作不便捷等技术问题，也可以解决现有技术中检测需要多仪器配合使用所带来的操作不方便的技术问题。本专利技术方法具有操作便捷，检测方法简单，检测结果准确等优点。为了实现本专利技术上述目的，本申请特采用如下技术方案：一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒，所述试剂盒包括试剂瓶和试纸。其中，所述试剂瓶中装有可与血红蛋白反应或可吸附血红蛋白的荧光颗粒或彩色颗粒；其中，所述试纸由一端起，依次为冲洗区、样品区、糖化血红蛋白抗体结合区、检测区、对照区以及吸水区。进一步的，所述糖化血红蛋白抗体结合区包被有鼠抗人糖化血红蛋白抗体，所述检测区包被有可与鼠抗人糖化血红蛋白抗体结合的二抗，所述对照区包被有抗血红蛋白抗体。本专利技术中，通过使用荧光颗粒为标记检测物，并通过将荧光颗粒与样本一次混合后，并通过在试纸上将糖化血红蛋白固定分离，并通过检测荧光度数即能够实现糖化血红蛋白比例的测定，具有检测方法便捷准确的优点。可选的，本专利技术中，所述二抗为羊抗鼠抗体。可选的，本专利技术中，所述荧光颗粒或彩色颗粒为具有疏水性表面的聚合物荧光颗粒/彩色微球；或荧光无机颗粒/彩色微球，也可以是表面具有环氧基，氯甲基，甲苯磺酰基，醛基等高活性基团可以和蛋白进行反应的荧光/彩色微球。可选的，本专利技术中，所述试纸包括底板以及与其粘合的硝基纤维素膜，所述硝基纤维素膜的宽度与底板宽度相同；其中，所述冲洗区、样品区、糖化血红蛋白抗体结合区以及吸水区分别设置有冲洗液加样垫、防水垫、样品抗体结合垫和吸水垫；其中，所述样品抗体结合垫包括样品区以及糖化血红蛋白抗体结合区，并与所述硝基纤维素膜紧贴，所述样品抗体结合垫的宽度分别与冲洗区、样品区以及糖化血红蛋白抗体结合区三个区域的宽度相同，并覆盖所述三个区域；所述吸水垫的宽度与吸水区宽度相同；其中，所述冲洗液加样垫和防水垫分别与所述样本抗体结合垫紧贴，所述冲洗液加样垫和防水垫的宽度与冲洗区相同，且冲洗液加样垫和防水垫覆盖冲洗区；其中，所述鼠抗人糖化血红蛋白抗体包被于所述样品抗体结合垫上。本专利技术中，通过对所述试纸结构和材料的进一步选择、调整以及优化，从而可以进一步提高检测的效率。可选的，本专利技术中，所述底板为硬质聚氯乙烯板。可选的，本专利技术中，所述冲洗液加样垫和样品抗体结合垫为一体式结构。可选的，本专利技术中，所述样本抗体结合垫为玻璃纤维垫。本专利技术中，通过对样本抗体结合垫材料的选择和优化，选择具有高比表面积能吸附大量抗体的样本的和玻璃纤维为结合垫材料，从而可以在实现抗体有效吸附的同时，还不会由于吸附性过好所导致的检测结果不准确。可选的，本专利技术中，所述荧光颗粒/彩色颗粒的粒径为50-500nm；优选的，本专利技术中，所述荧光颗粒/彩色颗粒的直径为80-100nm。本专利技术中，通过对荧光颗粒粒径的调整和优化，从而使得荧光颗粒在与抗体接触后，能够进一步通过纤维素膜并进行固定和检测。可选的，本专利技术中，所述试剂盒还进一步包括用于糖化血红蛋白检测的微量红细胞采集装置。本专利技术中，通过进一步在试剂盒中添加微量红细胞采集装置，从而可以实现由压积红细胞采集到糖化血红蛋白检测的一体化操作流程，进一步便捷了糖化血红蛋白检测的整体流程步骤。可选的，本专利技术中，所述用于糖化血红蛋白检测的微量红细胞采集装置包括：固件，血液去除装置、多孔粘合层，吸血垫；其中，所述吸血垫设置在所述固件的一端；所述多孔粘合层通过包裹所述吸血垫以及设置有吸血垫的端部将所述吸血垫固定于所述固件上；所述血液去除装置设置在所述固件上，并与所述固件滑动连接。本专利技术中，通过设置吸血垫以及覆盖其的多孔粘合层，从而可以对吸血垫进行位置固定，并直接进行血样的吸取和进一步压积红细胞的固定，通过进一步设置血液去除装置，从而可以在同一装置上进一步实现未固定的多余血液的去除，进而实现了压积红细胞提取的一体化装置操作步骤，使得检测更加方便快捷。同时，本专利技术还提供了一种测定糖化血红蛋白比例的方法，所述方法中使用本专利技术所述的试剂盒进行检测。具体的，所述方法包括如下步骤：将压积红细胞置于含溶血剂和荧光颗粒/彩色颗粒的试剂瓶中，并与所述荧光颗粒/彩色颗粒反应，然后将反应后荧本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括试剂瓶和试纸；其中，所述试剂瓶中装有可与血红蛋白反应或可吸附血红蛋白的荧光颗粒或彩色颗粒；其中，所述试纸由一端起，依次为冲洗区、样品区、糖化血红蛋白抗体结合区、检测区、对照区以及吸水区；其中，所述糖化血红蛋白抗体结合区包被有鼠抗人糖化血红蛋白抗体，所述检测区包被有可与鼠抗人糖化血红蛋白抗体结合的二抗，所述对照区包被有抗血红蛋白抗体。

【技术特征摘要】
1.一种用于测定糖化血红蛋白比例的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括试剂瓶和试纸；其中，所述试剂瓶中装有可与血红蛋白反应或可吸附血红蛋白的荧光颗粒或彩色颗粒；其中，所述试纸由一端起，依次为冲洗区、样品区、糖化血红蛋白抗体结合区、检测区、对照区以及吸水区；其中，所述糖化血红蛋白抗体结合区包被有鼠抗人糖化血红蛋白抗体，所述检测区包被有可与鼠抗人糖化血红蛋白抗体结合的二抗，所述对照区包被有抗血红蛋白抗体。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试纸包括底板以及与其粘合的硝基纤维素膜，所述硝基纤维素膜的宽度与底板宽度相同；其中，所述冲洗区、样品区、糖化血红蛋白抗体结合区以及吸水区分别设置有冲洗液加样垫、防水垫、样品抗体结合垫和吸水垫；其中，所述样品抗体结合垫包括样品区以及糖化血红蛋白抗体结合区，并与所述硝基纤维素膜紧贴，所述样品抗体结合垫的宽度分别与冲洗区、样品区以及糖化血红蛋白抗体结合区三个区域的宽度相同，并覆盖所述三个区域；所述吸水垫的宽度与吸水区宽度相同；其中，所述冲洗液加样垫和防水垫分别与所述样本抗体结合垫紧贴，所述冲洗液加样垫和防水垫的宽度与冲洗区相同，且冲洗液加样垫和防水垫覆盖冲洗区；其中，所述鼠抗人糖化血红蛋白抗体包被于所述样品抗体结合垫上。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述样本抗体结合垫为玻璃纤维垫。4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述荧光颗粒的粒径为50-500nm。5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：王保丹，肖江群，江应玲，钟乾兴，
申请(专利权)人：安邦厦门生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：福建;35