一种炔类化合物及其制备方法和该化合物的用途技术

本发明专利技术提供了一种炔类化合物及其制备方法和该化合物的用途，属于炔类化合物和中药有效成分提取技术领域。具体是从伞形科柴胡属植物柴胡(Radix Bupleuri)干燥的根中提取分离得到了新化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ和已报道化合物Ⅲ。对上述化合物进行体外单胺类神经递质再摄取抑制实验，结果表明化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ对去甲肾上腺素(NA)的再摄取均具有抑制作用，抑制效果相当于阳性对照药物地西帕明，对5-羟基色氨酸(5-HT)的再摄取产生不同程度的抑制作用。上述四种化合物具有抗抑郁活性，有望开发为治疗和预防抗抑郁相关疾病的药物或其前体药物。

Alkyne compound, its preparation method and use of said compound

The invention provides a alkyne compound and a preparation method thereof and the application of the compound. In particular from Umbelliferae Bupleurum Bupleurum (Radix Bupleuri) dry root extracted a new compound I, II, III and IV compounds have been reported. The above compounds in vitro monoamine neurotransmitter reuptake inhibition test, the results showed that compounds I, II, III and IV of norepinephrine (NA) reuptake inhibition of inhibitory effect is equivalent to the positive control drug Xipaming, on 5- hydroxytryptophan (5-HT) reuptake inhibition effect of different the degree of. The four compounds have antidepressant activity and are expected to be developed as drugs or prodrugs for the treatment and prevention of antidepressant related diseases.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及炔类化合物和中药有效成分提取
，具体涉及一种炔类化合物和从柴胡中分离炔类化合物的方法，以及该炔类化合物的用途。
技术介绍
抑郁症是一种具有发病率高、复发率高和高致残的特点的常见精神疾病。现代医学研究表明，抑郁症发病机理复杂，诱发原因较多，临床症候多样。多数专家学者认为，抑郁症的单胺假说即抑郁症是由于人脑单胺类神经递质，5-HT、NA或DA缺损所致。现在临床上所用的主要的抗抑郁药物是通过抑制突触间隙5-HT和NA的再摄取增加突触间隙中单胺递质浓度。但合成抗抑郁药物存在抗抑郁谱窄，起效时间慢，以及毒副作用大等缺点。因此，国内外开始注意从传统药物和天然药物中研制与开发具有抗抑郁活性的药物。逍遥散为经典名方，至今已有近千年的应用历史。现代临床与药理研究已证实其具有明显的抗抑郁作用，且未发现毒副作用。本课题组前期对逍遥散各部位进行了体外和体内药理活性研究，筛选出了石油醚活性部位，发现其抗抑郁疗效方面明显优于原复方，甚至超过了西药的活性，已申请专利(ZL201010110283.7)，但仍存在物质基础不明确等问题。本研究基于对药效物质基础的研究，以血清药物化学为指导，对君药柴胡的化学成分进行研究，发现其中多炔类化合物的含量较高，且能够入血，可能为抗抑郁的有效成分，因此对其进行深入的研究。目前，从其他植物中分离得到的多炔类成分曾被研究者报道具有显著的活性。如人参炔三醇具有的抗肿瘤细胞的作用；苍术中已知20余种聚乙炔类化合物具有防止胃损伤、抗炎、利胆及黄嘌呤氧化酶阻碍等作用。近年来，相关研究者已从柴胡属的植物中提取分离得到17种多炔类的化合物，其中柴胡毒素和乙酰柴胡毒素具有显著的神经毒性和细胞毒性作用，其它化合物未见活性或毒性的报道。本专利技术在针对柴胡石油醚部位抗抑郁有效成分的研究中，经过乙醇提取、石油醚萃取、色谱技术分离纯化及活性实验检测相结合的方法，最终获得了具有抗抑郁活性的一组新化合物，并经过高分辨核磁共振等技术，确定了各个化合物的化学结构。上述化合物均具有较好的抗抑郁活性，可以开发制成适用于临床治疗抑郁症的药物。若作为先导新化合物，通过结构改造和对其构效关系进行进一步的研究，可合成一系列的抗抑郁药物和新的药物组合。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种从柴胡中分离炔类化合物的方法，以及该方法得到的炔类化合物，及其在制备抗抑郁药物中的应用。本专利技术提供的一种炔类化合物，其具有如下Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ或Ⅳ的结构式：上述炔类化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ的提取方法，包括如下步骤：(1)柴胡石油醚部位制备：将柴胡用95％乙醇浸泡，回流提取，提取液浓缩得浸膏，浸膏用石油醚萃取，得到柴胡石油醚部位；(2)柴胡石油醚部位的粗分离：将柴胡石油醚部位加入硅胶柱中分离，用石油醚-乙酸乙酯不同比例的混合液洗脱，硅胶薄层定性和高效液相示踪，分别收集石油醚-乙酸乙酯比例为100：6和100：30部分，得粗品B和粗品C；采用干法上样，将粗品B用石油醚-乙酸乙酯不同比例的混合液洗脱，收集石油醚-乙酸乙酯比例为100：1至100：2部分，得到含目标化合物粗品BA。采用湿法上样，将粗品C用石油醚-乙酸乙酯不同比例的混合液洗脱，收集石油醚-乙酸乙酯比例为100：30部分，得到粗品CE。采用湿法上样，将粗品CE用石油醚-乙酸乙酯不同比例的混合液洗脱，收集石油醚-乙酸乙酯比例为100：5部分，得到含目标化合物粗品CEB。(3)纯化：分别将粗品BA和粗品CEB经硅胶层析柱、ODS柱层析和SephadexLH-20凝胶柱除杂，溶解于9：1的甲醇-氯仿溶剂中，滤膜滤过，得样品BA-1和CEB-3，备用。(4)化合物的制备：取样品CEB-3，采用高效液相色谱法，以甲醇-水比例为88：12为流动相，分别收集保留时间为11.7-13.3min和17.5-18.9min的色谱峰浓缩至干，得到如权利要求1所述化合物Ⅰ和化合物Ⅱ。取样品BA-1，采用高效液相色谱法，以甲醇-水比例为87.5：12.5为流动相，分别收集保留时间为19.0-21.3min和22.0-23.9min的色谱峰浓缩至干，得到所述化合物Ⅲ和化合物Ⅳ。本专利技术所述的炔类化合物是从中药柴胡(RadixBupleuri)干燥根中提取分离得到，采用NMR(1H-NMR和13C-NMR)UV和MS等方法，对化合物的结构进行鉴定，本专利技术从柴胡石油醚部位中分离得到新化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ是未报道的化合物，化合物Ⅲ是已报道的化合物。这四种化合物化学成分明确，在植物中属低极性成分，且有明确的提取制备方法，有望开发成药效物质基础明确的抗抑郁新药或抗抑郁前体药物。经体外实验证明，化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ能抑制NA的再摄取行为，其抑制率与阳性对照药地西帕明相当；化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ对5-HT的再摄取行为虽弱于阳性药盐酸氟西汀，但也有不同程度的抑制作用。证明该炔类化合物均可以在制备预防和治疗抑郁症的药物中应用。具体实施方式实施例1：炔类化合物的制备(1)柴胡石油醚部位制备柴胡药材5kg，用95％乙醇浸泡12h，回流提取三次，每次2h，合并提取液浓缩得浸膏，浸膏用石油醚萃取，得到柴胡石油醚部位150g。(2)柴胡石油醚部位的粗分离将上述柴胡石油醚部位样品加入硅胶层析柱中，用石油醚-乙酸乙酯作为洗脱系统，依次用石油醚：乙酸乙酯比例为100:0～0:100进行梯度洗脱。以硅胶GF254薄层层析板、石油醚-乙酸乙酯为展开系统检测流份，薄层色谱监测组份有明显变化时，更换下一浓度洗脱梯度。结合高效液相色谱跟踪结果，收集石油醚：乙酸乙酯比例为100：6和100：30部分，得到粗品B和粗品C。取粗品B，采用干法上样，置于干燥硅胶粉(200-300目)层析柱(层析柱规格：直径3cm，高45cm)，依次用石油醚：乙酸乙酯比例为100：1～100：6进行梯度洗脱，结合高效液相色谱跟踪结果，收集石油醚：乙酸乙酯比例为100：1至100：2部分，得到含目标化合物粗品BA。取粗品C，采用湿法上样，置于ODS柱中制备，依次用石油醚：乙酸乙酯比例为100：6～100：30进行梯度洗脱，结合高效液相色谱跟踪结果，收集石油醚：乙酸乙酯比例为100：30部分，得到粗品CE。取粗品CE，采用湿法上样，置于ODS柱中制备，依次用石油醚：乙酸乙酯比例为100：3～100：15进行梯度洗脱，结合高效液相色谱跟踪结果，收集石油醚：乙酸乙酯比例为100：5部分，得到含目标化合物粗品CEB。(3)纯化取粗品BA，经氯仿：甲醇(1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种炔类化合物，其特征在于，具有如下Ⅰ、Ⅱ或Ⅳ的结构式：

【技术特征摘要】
1.一种炔类化合物，其特征在于，具有如下Ⅰ、Ⅱ或Ⅳ的结构式：
2.一种从柴胡中分离炔类化合物的方法，包括以下步骤：
(1)柴胡石油醚部位制备：将柴胡用95％乙醇浸泡，回流提取，提取液浓缩得浸膏，浸膏
用石油醚萃取，得到柴胡石油醚部位；
(2)柴胡石油醚部位的粗分离：将柴胡石油醚部位加入硅胶柱中分离，用石油醚-乙酸
乙酯不同比例的混合液洗脱，硅胶薄层定性和高效液相示踪，分别收集石油醚-乙酸乙酯比
例为100：6和100：30部分，得粗品B和粗品C；
采用干法上样，将粗品B用石油醚-乙酸乙酯不同比例的混合液洗脱，收集石油醚-乙酸
乙酯比例为100：1至100：2部分，得到含目标化合物粗品BA；
采用湿法上样，将粗品C用石油醚-乙酸乙酯不同比例的混合液洗脱，收集石油醚-乙酸
乙酯比例为100：30部分，得到粗品CE；
采用湿法上样，将粗品CE用石油醚-乙酸乙酯不同比例的混合液洗脱，收集石油...

【专利技术属性】
技术研发人员：高晓霞，周玉枝，方媛，张峰，秦雪梅，张丽增，
申请(专利权)人：山西大学，
类型：发明
国别省市：山西;14