含异羟肟酸片段的2-芳胺基嘧啶类衍生物及制备和应用制造技术

本发明专利技术提供两种如式Ⅰ、Ⅱ所示的含异羟肟酸片段的2-芳胺基嘧啶类衍生物，主要是以含羧基片段的2-芳胺基嘧啶为母核，通过与THP保护的羟胺一步缩合及相关的修饰得到目标化合物。实验证明，该系列化合物在细胞水平对与EGFR酪氨酸激酶活性相关的肿瘤细胞(过表达EGFR的人表皮癌细胞株A431、对Gefitinib耐药的人肺腺癌细胞株H1975)和对与HDAC组蛋白乙酰化酶活性相关的肿瘤细胞(人宫颈癌细胞株Hela、人肝癌细胞株HepG2、人早幼粒急性白血病细胞株HL60、人口腔表皮样癌细胞株KB、人结肠癌细胞株SW620)具有增殖抑制作用，可制备相应抗肿瘤细胞药物。结构通式如下：

2- arylamino pyrimidine derivatives and preparation and application of hydroxamic acid containing fragments

The present invention provides hydroxamic acid containing fragments of 2- aromatic amino pyrimidine derivatives such as two kinds of type I and II shown, mainly containing carboxyl fragment of 2- aromatic amino pyrimidine as a parent nucleus, the target compound was obtained by THP and the protection of hydroxylamine one-step condensation and related modification. Experiments show that the compounds at the cellular level of EGFR tyrosine kinase activity associated with tumor cells (EGFR overexpression of human epidermal carcinoma cell line A431, Gefitinib resistant human lung adenocarcinoma cell line H1975 and HDAC) and the histone deacetylase activity related to tumor cells (human cervical carcinoma cell line Hela, human hepatoma cell line HepG2, human promyelocytic HL60, human oral epidermoid carcinoma cell line KB, human colon cancer cell line SW620 was acute leukemia cell line) can inhibit the proliferation, can prepare corresponding anti-tumor drugs. The general structure is as follows:

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于制药领域，具体涉及一种含异羟肟酸片段的2-芳胺嘧啶衍生物、其制备方法、中间体、及其应用。
技术介绍
蛋白酪氨酸激酶在信号转导过程中发挥着重要的作用，参与调控细胞的生长、增殖与凋亡等生物过程。其异常表达可导致细胞功能紊乱。表皮生长因子受体(EGFR)是典型的具有酪氨酸激酶活性的受体，是表皮生长因子(ErbB/HER)家族的一员。目前研究表明，EGFR的过高表达或突变存在于肺癌、成胶质细胞瘤(脑瘤)、乳腺癌、结肠直肠癌、胃癌、头颈癌和胰腺癌等多种实体肿瘤中。EGFR过表达可使下游信号通路信号增强。EGFR与肿瘤细胞的血管生成、肿瘤侵袭、转移及凋亡都有关系，已有大量文献报道，抑制EGFR酪氨酸激酶的活性可有效抑制肿瘤的生长。小分子EGFR酪氨酸激酶抑制剂与ATP竞争，结合到EGFR胞内区的磷酸化位点，能抑制EGFR自磷酸过程并阻断下游信号通路，达到抑制肿瘤细胞的目的。根据抑制剂与EGFR的结合机制，目前将小分子EGFR抑制剂可分为第一代可逆型EGFR酪氨酸激酶抑制剂、第二代非可逆型EGFR酪氨酸激酶抑制剂和第三代非可逆型突变选择性EGFR酪氨酸激酶抑制剂。包括吉非替尼在内的第一代可逆型EGFR抑制剂对非小细胞肺癌患者有较好的疗效，然而，第一代EGFR抑制剂在临床使用中出现获得性耐药。EGFR的获得性突变是40％-45％非小细胞肺癌患者的恶性肿瘤发展的主要动力，而EGFRT790M突变是较常见的突变。不可逆EGFR抑制剂靶向EGFRT790M的治疗策略取得一定的成果。第二代不可逆EGFR抑制剂对EGFR高表达的人表皮癌细胞A431WT,overexpression、Gefitinib耐药的人非小细胞肺癌细胞株H1975L858R/T790M之间的增殖抑制作用选择性不强。因为第一代和第二代抑制剂对皮肤和肠道的野生型EGFR有较强的抑制作用，所以引发皮炎、腹泻等副作用，使接受治疗的患者生活质量下降。这促使研究者们研究在野生型EGFR与T790M突变型之间选择性更好的EGFR抑制剂。由阿斯利康公司(AstraZeneca)研发的第三代非可逆突变选择型EGFR抑制剂塔格瑞斯(Tagrisso)对已有EGFR-TKI抗性和T790M突变的NSCLC患者有很好的治疗效果。AZD9291对外显子19缺失的EGFR、EGFRT790M/L858R、EGFRWT的IC50分别为12.92nM、11.4nM和493.8nM，与野生型EGFR相比，其在突变EGFR细胞系中有很强的增殖抑制作用。体内研究中，AZD9291(5mg/kg，p.o.)能引起整个EGFRm+(PC90)与EGFRm+/T790M(H1975)肿瘤模型中的肿瘤显著消退，并能显著抑制体内的EGFR磷酸化和下游关键信号通路(AKT、ERK等)。其在临床阶段的治疗效果明显。[]美国FDA与于2015年11月已批准AZD9291上市。最近研究报道了NSCLC患者在使用第三代不可逆EGFR抑制剂治疗过程中EGFR外显子20中发现新的C797S突变。耐药问题已经成为必须解决的难题。传统的化疗联合用药在临床上取得一定的成效，与单一靶点药物相比，在临床治疗上几个靶点的药物联合用药治疗效果更好。但是联合用药可能因为药物相互作用而引起药物不良反应。合理设计的多靶标药物能够提高疗效，同时降低药物耐药发生率，多靶标药物已成为抗耐药的对策之一。HDAC抑制剂能够影响细胞周期进程、细胞凋亡、分化和肿瘤血管发生，因此对多种肿瘤都具有抑制作用。处于临床HDAC抑制剂用于实体瘤与血液病的治疗，现在很多临床研究趋向于将HDACIs与其他的抗肿瘤药物联用，以获得更好的治疗效果。HDAC抑制剂直接作用与核小体，对多种肿瘤细胞都有着很强的增殖抑制能力。HDAC抑制剂与其他酪氨酸激酶抑制剂的联合使用也被广泛的研究。CUDC-101是进入临床Ⅰ期研究的EGFR/HER2/HDAC多靶点抑制剂，XiongCai等人使用适当的连接基将已上市的EGFR抑制剂厄洛替尼和HDAC抑制剂SAHA的异羟肟酸片段进行连接。他们合成了一系列化合物，并对其进行构效关系研究。体外实验中，该系列化合物对EGFR酶，HER2酶和HDAC酶的IC50值分别为2.4nM，15.7nM，4.4nM。CUDC-101对厄洛替尼敏感和耐药肿瘤细胞的增殖株抑制活性比SAHA、厄洛替尼、拉帕替尼、SAHA与厄洛替尼联合用药、SAHA与拉帕替尼联合用药强。临床研究结果表明，HDACIs能与其他酪氨酸激酶抑制剂产生相加或协同作用，增强药物的治疗效果，且有利于克服耐药。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种含异羟肟酸片段的2-芳胺嘧啶类衍生物，是一种与现有技术完全不同的嘧啶类衍生物，具有较佳的抗肿瘤活性，同时具有EGFR/HDAC抑制活性。本专利技术提供的一种含异羟肟酸片段的2-芳胺嘧啶类衍生物结构式如式Ⅰ所示：其中：R1为氢原子或氯原子，R2为氢原子、氟原子或N,N-二甲基。本专利技术提供的一种含异羟肟酸片段的2-芳胺嘧啶类衍生物结构式如式Ⅱ所示：其中：R1为氢原子或氯原子。所述的式Ⅰ化合物为如下任一化合物：N1-2-氟-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基)氨基)苯基)-N4-羟基马来酰胺盐酸盐(化合物1)；N1-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基)氨基)苯基)-N4-羟基马来酰胺盐酸盐(化合物2)；N1-(2-(二甲氨基)-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基)氨基)苯基)-N4-羟基马来酰胺盐酸盐(化合物3)；N1-5-((5-氯-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基)氨基)-2-(二甲氨基)苯基)-N4-羟基马来酰胺盐酸盐(化合物4)；N1-2-氟-5-((5-氯-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基)氨基)苯基)-N4-羟基马来酰胺盐酸盐(化合物5)。所述的式Ⅱ化合物为如下任一化合物：4-(4-(2-丙烯酰基-氨基-4-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶基-2-基)氨基)苯基)哌嗪-1-基)-N-羟基丁酰胺盐酸盐(化合物6)；4-(4-(2-丙烯酰基-氨基-4-((5-氯-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶基-2-基)氨基)苯基)哌嗪-1-基)-N-羟基丁酰胺盐酸盐(化合物7)。本专利技术的另一个目的是提供所述的式Ⅰ化合物的制备方法，通过以下步骤实现：以2,4-二氯嘧啶A和1-甲基吲哚为起始原料，在1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种如式Ⅰ所示的含异羟肟酸片段的2‑芳胺基嘧啶类衍生物，其结构通式为：其中：R1为氢原子或氯原子。R2为氢原子、氟原子或N,N‑二甲基。

【技术特征摘要】
1.一种如式Ⅰ所示的含异羟肟酸片段的2-芳胺基嘧啶类衍生物，其结构通式为：
其中：
R1为氢原子或氯原子。
R2为氢原子、氟原子或N,N-二甲基。
2.一种如式Ⅱ所示的含异羟肟酸片段的2-芳胺基嘧啶类衍生物，其结构通式为：
其中：R1为氢原子或氯原子。
3.如权利要求1所述的含异羟肟酸片段的2-芳胺基嘧啶类衍生物，其特征在于，所述的
式Ⅰ化合物为如下任一化合物：
N1-2-氟-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基)氨基)苯基)-N4-羟基马来酰胺盐酸盐(化合
物1)；
N1-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基)氨基)苯基)-N4-羟基马来酰胺盐酸盐(化合物2)；
N1-(2-(二甲氨基)-5-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基)氨基)苯基)-N4-羟基马来酰胺盐
酸盐(化合物3)；
N1-5-((5-氯-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基)氨基)-2-(二甲氨基)苯基)-N4-羟基马来酰胺
盐酸盐(化合物4)；
N1-2-氟-5-((5-氯-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-嘧啶-2-基)氨基)苯基)-N4-羟基马来酰胺盐酸盐
(化合物5)。
4.如权利要求2所述的含异羟肟酸片段的2-芳胺基嘧啶类衍生物，其特征在于，所述的式
Ⅱ化合物为如下任一化合物：
4-(4-(2-丙烯酰基-氨基-4-((4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶基-2-基)氨基)苯基)哌嗪-1-基)-N-
羟基丁酰胺盐酸盐(化合物6)；
4-(4-(2-丙烯酰基-氨基-4-((5-氯-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶基-2-基)氨基)苯基)哌嗪-1-
基)-N-羟基丁酰胺盐酸盐(化合物7)。
5.根据权利要求1或3所述的式Ⅰ化合物的制备方法，其特征在于，通过以下步骤实现：
以2,4-二氯嘧啶A和1-甲基吲哚为起始原料，在1,2-二氯乙烷、80℃条件下反应生成3-(2-氯
嘧啶-4-基)-1-甲基-1-H-吲哚B，中间体B与4-氟-3-硝基苯胺在仲丁醇,1NHCl催化条件下反
应得到2-(3-硝基苯基)-4-(N-甲基吲哚)-2-氨基嘧啶C，中间体C在还原条件下硝基还原生成

\t2-(3-氨基苯基)-4-(N-甲基吲哚)-2-氨基嘧啶D，中间体D与顺丁烯二酸酐在二氯甲烷条件下
生成4-氧代-2-丁烯酸E，中间体E与O-(四氢-2H-吡喃-2-基)羟基胺缩合生成化合物F，最后
F在酸性条件下脱掉保护基生成目标化合物Ⅰ；试剂和反应条件：a)无水氯化铝，二氯...

【专利技术属性】
技术研发人员：俞永平，罗婧，陈文腾，刘星雨，舒可，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33