α‑烯醇化酶特异性抗体及其在免疫疾病治疗中的使用方法技术

一种治疗炎性疾病或免疫疾病的方法，包括给予有需要的对象抗ENO1的拮抗剂。该拮抗剂结合ENO1并抑制ENO1血纤维蛋白溶酶原受体活性。该拮抗剂可以是抗人ENO1抗体或其scFv、Fab或F(ab)2片段，其特异性结合人ENO1(GenBank：AAH50642.1)，用于治疗炎性疾病或免疫疾病，所述疾病可以是多发性硬化、类风湿性关节炎、克罗恩病、溃疡性结肠炎、系统性红斑狼疮、慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘、过敏、牛皮癣、1型糖尿病、动脉粥样硬化或骨质疏松。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】专利技术背景相关申请的交叉参考本申请要求2013年12月20日提交的美国临时申请号61/919,391的权益，并将其全文以引用的方式纳入本文。专利
本专利技术涉及利用针对α-烯醇化酶的特异性抗体治疗多发性硬化、类风湿性关节炎、克罗恩病、溃疡性结肠炎、系统性红斑狼疮和相关的免疫疾病，包括慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘、过敏、牛皮癣、1型糖尿病和骨质疏松。多发性硬化(MS)是中枢神经系统的慢性炎性疾病。多发性硬化中，神经纤维的髓鞘被破坏，即神经纤维被自身抗体脱髓鞘。多发性硬化的症状相对地为非特异性的，例如疲劳的复发与减轻，麻木，步态及协调问题，肠/膀胱功能障碍，认知功能障碍及疼痛。迄今为止，对病因及病理生理所知有限，有可能是遗传背景、维生素D缺乏和地理环境造成。MS的流行率随地理位置不同而不同。世界上西欧和北美的发病率最高；在美国，每100000人中有100例有症状的MS患者，在英格兰该比例为118/100000。日本和台湾的发病率分别为8.57/10000和1.9/100000(Amino,MJ.等，(2009)纽约：麦格劳希尔医学(McGrawHillMedical.)，第848-911页；Tsai,C-P.等，(2004)，中国医学协会(ChineseMed.Assoc.)，67:500-505)。MS的发病机理中也涉及到遗传背景。如果家族成员患有MS，则其亲戚患MS的风险与他们与该病患之间的遗传相似性成正比。在环境因素中，已证实维生素D和EB病毒感染是与MS相关的因素。最近提出台湾的MS中有疱疹病毒V和VI型的参与。最早的对MS病理学的理解中，认为髓磷脂特异性CD4+T淋巴细胞从血液迁移至大脑中，结合抗原呈递细胞(包括大脑中小神经胶质细胞)呈递的抗原性肽，无限繁殖，攻击并损伤少突细胞，破坏髓磷脂。最近的假说提出，髓磷脂CD+4T细胞仅参与MS的早期。CNS中MCP-1诱导的循环中的单核细胞负责疾病进展的中后期。趋化因子受体CCR2(其配体为MCP-1)缺陷小鼠耐受实验性自身免疫脑脊髓炎(EAE)。用不同量的来自EAE诱导的CCRC2+小鼠的单核细胞输给CCRC2敲除小鼠时，受体小鼠的临床分值与所输入的来自供体EAE小鼠的单核细胞的量成正比。此结果表明单核细胞对EAE疾病进展非常重要。迄今为止，还未发现令人满意的对多发性硬化的治疗。美国FDA批准了8种药物，用于治疗MS患者。利比(Rebif)、干扰素β-1a粉针剂Avonex、干扰素β-1b(betaferon)和重组干扰素β-1b(Extavia)是不同类别的β干扰素，它们都是免疫调节剂。克帕松(Copaxon)是髓磷脂类似物，作为Th1CD4+抗原的诱饵受体起作用。芬戈莫德(Gilenya)是鞘氨醇1-磷酸盐(S1P-1)受体调节剂，结构与鞘氨醇非常接近。芬戈莫德在淋巴细胞S1P中作为功能性拮抗剂起作用，其免疫调节作用可能是抑制抗原特异性T细胞从淋巴结中流出。那他珠单抗(Tysabri)是一种抗胞外基质受体整联蛋白(α4β1)的单克隆抗体，对白细胞迁移相当重要。拉喹莫德是NFκB介导的炎症通路的抑制剂，其效应细胞包括T细胞、B细胞和树突细胞。Tecfidera(富马酸二甲酯BG12)是Nrf2转录通路抑制剂，其阻止免疫细胞分泌细胞因子，阻止上皮细胞表达CD62E。米托蒽醌是蒽二酮(anthracenedion)的类似物，对活化的免疫细胞有毒性。虽然这些药物中有一些非常有效，但这些药物仅使该疾病急性期的频率和强度降低。它们总是有些副作用，例如β干扰素相关的药物导致的感染，和那他珠单抗导致的进行性多灶性白质脑病。类风湿性关节炎(RA)是影响到患者关节的慢性炎性疾病。RA的症状包括关节的疼痛、肿胀、僵硬和变形。患者通常会感到发热和疲劳。RA的病因尚未完全理解。该疾病起源于针对患者结缔组织的自身抗体，接着发生白细胞(包括单核细胞、巨噬细胞和嗜中性粒细胞)的浸润。然后，淋巴细胞腐蚀和侵袭关节的骨头和软组织。传统的RA治疗药物被称为抗风湿药，包括如甲氨蝶呤和来氟米特。有时使用类固醇类药物。最近，可给予更有效的生物制剂，如RemicadeTM和HumiraTM，它们是TNF-α的抗体，或TNF-α的诱饵受体恩利(Enbrel)，或IL-1的受体拮抗剂AnakinraTM。虽然这些药物有效，但存在副作用，例如感染和发热。此外，在许多病例中仍无法令人满意地治疗该疾病及避免对关节的损伤，这甚至会导致关节固定。在两种疾病(MS和RA)中，文献中的数据表明，血液中的炎性单核细胞和巨噬细胞参与到两种免疫疾病的发展。α-烯醇化酶(烯醇化酶-1，ENO1)是一种多功能蛋白，最初发现是糖酵解通路中的一个关键的酶。在正常条件下，ENO1表达在细胞溶质中。但是，文献中的最新数据也支持，ENO1可表达在许多癌细胞和活化的造血细胞如嗜中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞的细胞表面上，作为血纤维蛋白溶酶原的受体。已知血纤维蛋白溶酶原受体蛋白的上调可诱导尿激酶血纤维蛋白溶酶原活化信号(uPAS)的级联反应，并导致胞外基质降解。结果导致癌细胞的转移和免疫细胞的浸润增加。使用如LPS进行的炎性刺激，会通过翻译后修饰和移位至细胞表面而上调人血液单核细胞和U937单核细胞的细胞表面上ENO1的表达。据信ENO1的移位受到MAP激酶信号传导通路的调节。这意味着细胞表面上ENO1表达的增加可能在炎症疾病中起到重要作用。已在不同自身免疫和炎性疾病中发现抗ENO1的自身抗体，包括红斑狼疮、系统性硬化、白塞氏病、溃疡和克罗恩病。Saulot等(ArthritisAheum.,46:1196-1201(2002))和Wkui等(Clin.Exp.Immunol.,118:445-450(1999))的研究表明，25-66％的RA患者的血清中抗ENO1抗体的水平升高。Bae的研究(J.Immunology,189:365-372(2013))表明，当用抗ENO1抗体处理RA患者的PBMC以刺激ENO1血纤维蛋白溶酶原受体活性时，来自PBMC的单核细胞和巨噬细胞经由p38MAPK和NF-κB通路产生较大量的促炎介体，如TNFα、IL1-α/β、IFN-γ和PGE2。该研究表明，ENO1通过其血纤维蛋白溶酶原受体活性增加单核细胞和巨噬细胞的侵袭活性而在RA患者的疾病进展中起到关键作用。总之，其细胞表面上作为血纤维蛋白溶酶原受体的ENO1的表达上调的单核细胞对于MS、RA以及相关的免疫疾病的疾病进展是非常重要的。因此，靶向单核细胞细胞表面上的ENO1对治疗炎性疾病如MS、RA、克罗恩病、溃疡性结肠炎、和系统性红斑狼疮或相关的免疫疾病，如慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘、过敏、牛皮癣、1型糖尿病、动脉粥样硬化和骨质疏松，具有良好的潜力。
技术实现思路
本专利技术的实施方案涉及炎性疾病或免疫疾病如多发性硬化、类风湿性关节炎、克罗恩病、溃疡性结肠炎、系统性红斑狼疮或相关的免疫疾病，如慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘、过敏、牛皮癣、1型糖尿病、动脉粥样硬化和骨质疏松的新疗法。根据本专利技术的任一实施方案，治疗炎性疾病或免疫疾病的方法可包括给予有需要的对象抗ENO1的拮抗剂，其中，该拮抗剂结合ENO1并抑制ENO1的血纤维本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗炎性疾病或免疫疾病的方法，包括给予有需要的对象抗ENO1的拮抗剂，其中，所述拮抗剂结合ENO1并抑制ENO1血纤维蛋白溶酶原受体活性。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.12.20 US 61/919,3911.一种治疗炎性疾病或免疫疾病的方法，包括给予有需要的对象抗ENO1的拮抗剂，其中，所述拮抗剂结合ENO1并抑制ENO1血纤维蛋白溶酶原受体活性。2.权利要求1所述的方法，其中所述抗ENO1的拮抗剂是抗ENO1抗体或其scFv、Fab或F(ab)2片段。3.权利要求1-2中任一项所述的方法，其中，所述对象是人，所述抗ENO1抗体结合人ENO1蛋白。4.权利要求1-3中任一项所述的方法，其中，所述抗ENO1抗体是单克隆抗体。5.权利要求1-4中任一项所述的方法，其中，所述抗ENO1抗体选自嵌合抗体、人源化抗体、亲和力成熟抗体、人抗体、双特异性抗体和抗体药物偶联物(ADC)。6.权利要求1-5中任一项所述的方法，其中，所述抗ENO1抗体可特异性结合单核抗体或白细胞的ENO1血纤维蛋白溶酶原受体。7.权利要求1-6中任一项所述的方法，其中，所述炎性疾病或免疫疾病选自对象中的多发性硬化、类风湿性关节炎、克罗恩病、溃疡性结肠炎、系统性红斑狼疮、慢性...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡士昌，张铭一，阮大同，曾世祺，陈锡洲，贾维焯，王欣韵，施能耀，刘柯俊，陈立宗，
申请(专利权)人：财团法人生物技术开发中心，DCB美国有限责任公司，国家卫生研究院，
类型：发明
国别省市：中国台湾;71