一种甲苯磺酸索拉非尼有关物质的检测方法技术

本发明专利技术涉及分析化学领域，具体公开了一种甲苯磺酸索拉非尼有关物质的检测方法。本发明专利技术所述检测方法取甲苯磺酸索拉非尼待测品配制供试品溶液，将供试品溶液稀释100倍作为对照溶液，然后pH3.0磷酸盐缓冲液(取1.36g磷酸二氢钾，加水溶解并稀释至1000ml，以磷酸调节pH值至3.0)为流动相A，以乙腈‑乙醇(60:40)为流动相B，按下表进行梯度洗脱；检测波长为250nm，柱温为35℃。分别进行HPLC检测，按照加校正因子的主成分自身对照法测得有关物质的含量。本发明专利技术采用乙腈‑乙醇‑磷酸盐缓冲液梯度洗脱体系，使得甲苯磺酸索拉非尼的色谱峰可以和其他有关物质峰分离度更高，且峰型对称性较高，利于有关物质的检出，具有较高系统适应性，同时在专属性、定量限、检测限、线性范围以及重复性上都表现出无可比拟的优势，具有较高的精密度。

A detection method of sorafenib tosylate related substances

The present invention relates to the field of analytical chemistry, specifically discloses a detection method of sorafenib tosylate related substances. The detection method of sorafenib tosylate test preparation for the test solution, the sample was diluted 100 times as the control solution, and then pH3.0 phosphate buffer (1.36g potassium dihydrogen phosphate, dissolved in water and diluted to 1000ml, adjusted to pH 3 with phosphoric acid) as mobile phase A, acetonitrile ethanol (60:40) as mobile phase B, press the table by gradient elution; the detection wavelength was 250nm, the column temperature is 35 DEG C. The content of related substances was measured by the HPLC method and the principal component self comparison method. The invention adopts ethanol acetonitrile phosphate buffer gradient elution system, the chromatographic peak of sorafenib tosylate and other related substances can peak separation degree is higher, and the peak type high symmetry, facilitate the detection of related substances, at the same time in the system has high adaptability, specificity, limit of quantification, detection limit, linear range and repeatability have shown the advantages of There is nothing comparable to this with high precision.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分析化学领域，更具体的说是涉及一种甲苯磺酸索拉有关物质的检测方法。
技术介绍
甲苯磺酸索拉非尼，英文名为Sorafenib Tosylate，适应症为适用于治疗不能手术的晚期肾细胞癌；治疗无法手术或远处转移的原发肝细胞癌。根据我们前期研发经验，甲苯磺酸索拉非尼目前已知的主要有关物质为杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G和杂质H，来自于合成原料、中间体以及降解产物，结构式如下：鉴于当前对甲苯磺酸索拉非尼产品的严格要求，在合成甲苯磺酸索拉非尼后需要进行有关物质含量的检测，以期达到标准要求。另参考相关文献，采用pH2.4磷酸盐缓冲盐-乙腈-乙醇梯度洗脱，但对甲苯磺酸峰与杂质A峰之间、主峰与其峰前相邻杂质F峰之间分离度较差，影响杂质的检查。现有的检测方法，由于存在色谱条件和方法欠佳，使得其在系统适用性、重复性、线性范围、定量限、检测限等方面较差。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种甲苯磺酸索拉非尼有关物质的检测方法，使其在系统适用性、专属性、重复性、线性范围、定量限、检测限等方面完全符合标准并具有较高的精密度。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种甲苯磺酸索拉非尼有关物质的检测方法，包括：取甲苯磺酸索拉非尼待测品配制供试品溶液，将供试品溶液稀释1000倍作为对照溶液，然后以磷酸二氢钾溶液为流动相A、以乙醇-乙腈(6:4)混合溶液为流动相B分别进行HPLC检测，，按照加校正因子的主成分自身对照法计算公式：有关物质的含量＝F×(A供/A对)×0.1％，计算获得有关物质的含量；针对现有检测方法色谱条件不够优化，致使影响甲苯磺酸索拉非尼有关物质杂质A和杂质F的检测，本专利技术调整色谱条件，以不加校正因子的主成分自身对照法为基础，提供了一种在系统适用性、重复性、线性范围、定量限、检测限等方面完全符合标准的新检测方法。作为优选，本专利技术所述检测方法包括：取甲苯磺酸索拉非尼待测品配制供试品溶液，将供试品溶液稀释1000倍作为对照品溶液，然后以磷酸二氢钾溶液溶液为流动相A、以乙醇-乙腈(6:4)混合溶液为流动相B分别进行HPLC检测，按照加校正因子的主成分自身对照法计算公式：有关物质的含量＝F×(A供/A对)×1％，计算获得有关物质的含量；其中，F为有关物质的相对校正因子，A供为供试品溶液有关物质的峰面积，A对为对照溶液主峰峰面积，所述相对校正因子为主成分线性回归方程的斜率和有关物质的线性回归方程的斜率的比值。所述相对校正因子是相对值，理论上不会变，但因实验误差的存在，会有微小变化，对最终的结果无影响。优选地，所述杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E和杂质F的相对校正因子分别为1.05、0.88、0.80、0.67、0.69和0.71。作为优选，梯度洗脱程序如下表：时间(min)流动相A(％)流动相B(％)06535105050265050276535456535作为优选，所述磷酸二氢钾溶液中磷酸二氢钾的物质的量为0.02mol/L；作为优选，所述乙腈乙醇混合溶液中乙腈乙醇的体积百分比为60:40；作为优选，所述HPLC检测的Waters Symmetry C18色谱柱的规格为100×4.6mm，5μm，它采用较小的粒径和长度是甲苯磺酸索拉非尼片现有技术中所采用的色谱柱2倍的色谱柱，使甲苯磺酸索拉非尼与其有关物质及各有关物质之间的分离度更高。作为优选，所述配制供试品溶液为采用混合溶液(洗脱相A:洗脱相B＝1:3)配制成浓度为0.2mg/mL的供试品溶液。更优选地，所述配制供试品溶液为：取甲苯磺酸索拉非尼约27.4mg，置100ml量瓶中，加混合溶液适量，超声是其溶解，放冷，用混合溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；作为优选，所述HPLC检测的检测波长为250nm；作为优选，所述HPLC检测的流速为1.0mL/min；作为优选，所述HPLC检测的进样量为20μl；作为优选，所述HPLC检测的柱温为35℃；作为优选，本专利技术所述检测方法还包括在HPLC检测之前进行系统适用性检测步骤：按照正式检测的色谱条件，分别进样空白溶液、系统适用性溶液，记录色谱图，通过调整色谱柱和色谱仪使空白溶液色谱图中无干扰峰，系统适用性溶液色谱图中索拉非尼与对甲苯磺酸、杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、与杂质F之间的分离度不得小于1.5；所述空白溶液为洗脱相A:洗脱相B体积比为1:3的混合溶液，所述系统适用性溶液由以下方法配制而成：另取杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F对照品各约10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加溶剂适量，超声使溶解，放冷，用溶剂稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置50ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备溶液；再取甲苯磺酸索拉非尼对照品适量(约相当于索拉非尼20mg)，精密称定，置100ml量瓶中，加溶剂适量，超声使溶解，放冷，再精密加入上述对照品贮备溶液1ml，用溶剂稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性试验溶液。在系统适用性的试验中，和索拉非尼最接近的有关物质F，其和索拉非尼的分离度为1.8左右，大于标准要求的1.5，和对甲苯磺酸最接近的有关物质A，其和对甲苯磺酸的分离度为1.9左右，大于标准要求的1.5，表明本专利技术所述检测方法可以完好的分离出各有关物质峰和索拉非尼主成分峰，各峰之间无干扰，利于检测。在专属性的试验中，在经酸、碱、氧化、高温、光照降解后的样品图谱中，主峰的纯度因子均大于阈值，符合标准要求。在定量限的试验中，相当于样品浓度0.02％的有关物质样品信噪比在10以上，保证样品中0.02％以上的有关物质可以定量检测；在检测限的试验中，相当于样品浓度0.007％的杂质样品信噪比在3以上，保证样品中0.007％以上的有关物质可以被检测到，证明本专利技术的灵敏度很高。在线性范围的试验中，本专利技术所述检测方法针对各有关物质的线性范围均符合至少在LOQ值～指标150％的范围内的标准，且回归系数均在0.9998-1.000之间，证明呈良好的线性关系。在重复性试验中，6次测定的杂质峰数一致，杂质之和的绝对偏差为1.26％，不超过质量标准限度的50％，证实本专利技术所述检测方法具有良好的精密度。在回收率试验中，本专利技术所述检测方法针对各有关物质的平均回收率结果均在98％-105％之间，符合验证方案要求，证明该方法具有良好的精密度。在中间精密度试验中，本专利技术所述检测方法针对不同分析人员不同分析仪器的三组6次测得的各有关物质个数一致，各杂质含量的RSD均不大于2％，杂质之和的RSD为1.38％，符合验证方案要求，证明该方法具有良好的中间精密度。在耐用性试验中，当流动相A的pH值、流动相B比例或柱温来评估当测定条件有微小的变动时，测定结果不受影响的承受程度。证明该方法具有良好的耐用性。由以上技术方案可知，本专利技术采用乙腈-乙醇-磷酸二氢钾溶液梯度洗脱体系，使得索拉非尼的色谱峰可以和其他有关物质峰分离度更高，且峰型对称性较高，利于有关物质的检出，具有较高系统适应性，同时在专属性、定量限、检测限、线性范围以及重复性上都表现出无可比拟的优势，具有较高的精密度。附图说明图1、甲苯磺酸索拉非尼有关物质检查空白溶液液相色谱图；图2、甲苯磺酸索拉非尼有关物质检查系统适用性溶液液相色谱图本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种甲苯磺酸索拉非尼有关物质的检测方法，其特征在于，包括：取甲苯磺酸索拉非尼待测品配制供试品溶液，将供试品溶液稀释1000倍作为对照溶液，然后以pH3.0磷酸盐缓冲液(取2.72g磷酸二氢钾，加水溶解并稀释至1000ml，以磷酸调节pH值至3.0)为流动相A，以乙腈‑乙醇(60:40)为流动相B分别进行HPLC检测，按照加校正因子的主成分自身对照法测得有关物质的含量；所述HPLC检测的色谱柱为C18色谱柱；所述磷酸盐缓冲液中磷酸二氢钾的物质的量为0.02mol/L；所述HPLC检测的洗脱程序为：时间(min)流动相A(％)流动相B(％)06535105050265050276535456535所述HPLC检测的检测波长为250nm。

【技术特征摘要】
1.一种甲苯磺酸索拉非尼有关物质的检测方法，其特征在于，包括：取甲苯磺酸索拉非尼待测品配制供试品溶液，将供试品溶液稀释1000倍作为对照溶液，然后以pH3.0磷酸盐缓冲液(取2.72g磷酸二氢钾，加水溶解并稀释至1000ml，以磷酸调节pH值至3.0)为流动相A，以乙腈-乙醇(60:40)为流动相B分别进行HPLC检测，按照加校正因子的主成分自身对照法测得有关物质的含量；所述HPLC检测的色谱柱为C18色谱柱；所述磷酸盐缓冲液中磷酸二氢钾的物质的量为0.02mol/L；所述HPLC检测的洗脱程序为：时间(min)流动相A(％)流动相B(％)06535105050265050276535456535所述HPLC检测的检测波长为250nm。2.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，包括：取甲苯磺酸索拉非尼待测品配制供试品溶液，将供试品溶液稀释1000倍作为对照溶液，然后以磷酸盐缓冲液为流动相A、以乙腈-乙醇(60:40)混合溶液为流动相B分别进...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈丽，何勇，高永好，吴宗好，彭扶云，
申请(专利权)人：合肥华方医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽;34