制备分离色谱仪制造技术

提供一种制备分离色谱仪，包括：具有检测器(15)的色谱仪10；馏分收集器(20)；控制器(34)，用于参考当来自检测器(15)的输出信号的变化率超过正参考值时的点，命令馏分收集器发起收集操作，并且参考变化率的绝对值在变化率转向负之后变得比负参考值的绝对值小的点，中止操作；存储部(31)，用于存储采样率信息，采样率信息将输出信号的值与控制器确定变化率的时间间隔关联；以及采样率确定器(33)，用于基于采样率信息和输出信号的实际值，确定用于计算变化率的时间间隔。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及制备分离色谱仪，其中，通过色谱仪中的柱所分离的目标成分由馏分收集器分别地收集。
技术介绍
作为用于将包含在样品中的成分分离并将这些成分分别地收集的系统，制备分离色谱仪是公知的，其中，成分通过高性能液相色谱仪或者类似设备中的柱在时间上被分离，并且每一成分随后由馏分收集器收集(例如，参见专利文献1和2)。制备分离色谱仪包括具有送液泵和柱的分离单元、位于分离单元后面的检测器、馏分收集器、以及用于控制那些装置的控制器。已经以时间上分离的形式从柱中洗脱出来的样品成分依序由检测器(例如，紫外可见分光光度计)检测，并且被引入随后阶段的馏分收集器。在馏分收集器中，根据来自控制器的命令，内部通道被切换，以使得目标成分被分别收集进入馏分容器，诸如，小瓶。许多制备分离色谱仪具有所谓的“自动分馏”的能力，“自动分馏”即从柱中洗脱出的成分的自动收集。在自动分馏中，控制器基于来自检测器的输出信号，定位每一成分的洗脱的开始点和结束点。控制馏分收集器，以便在从一个成分的洗脱的开始起的预定时间量之后，发起收集操作，并且在从该成分的洗脱的结束起的预定时间量之后，中止操作。“预定时间量”与已经经过检测器的成分到达馏分收集器的收集部分所需的时间量对应，由从检测器到馏分收集器的通道的长度、流动相的流速、以及其它因素确定。自动分馏被大致划分为两个类型：使用阈值的“水平法”，以及使用变化率的“斜率法”。在水平法中，来自检测器的输出信号超过阈值的时间点被定位为色谱峰的开始点(成分的洗脱的开始)，而信号降至低于阈值以下的时间点被定位为峰的结束点(成分的洗脱的结束)。然而，如在流动相的组成随时间改变的梯度洗脱法的情况下，如果色谱的背景水平随时间改变，那么通过水平法来正确地定位成分的洗脱的开始点和结束点是困难的。此外，如果背景水平超过阈值，那么定位那些点将完全是不可能的。在斜率法中，来自检测器的输出信号在预定时间间隔被获取，并且从以前获取的输出信
号的变化率被计算。变化率的大小变得比正的预定斜率值大的时间点被定位为色谱峰的开始点(即，成分的洗脱的开始)，而变化率的绝对值变得比负的预定斜率值的绝对值小的时间点被定位为色谱峰的结束点(即，成分的洗脱的结束)。例如，如果正斜率值是200μV/秒并且负斜率值是–200μV/秒，那么检测器的信号强度上的变化的斜率超过200μV/秒的时间点被定位为峰的开始点。在经过峰顶之后，信号强度上的变化率转向负。随后，变化率的绝对值变得比负斜率值的绝对值(200μV/秒)小的时间点被定位为峰的结束点。以这种方式，根据斜率法，峰的开始点和结束点通过检验输出信号的变化率而被定位，而不是信号的绝对值。即使背景水平随时间变化，这个方法也可以被使用。引用列表专利文献专利文献1：JP 2000—214151A专利文献2：JP 2007—183173A
技术实现思路
技术问题在先前描述的制备分离色谱仪中，控制器在预定时间间隔从检测器获取输出信号。时间间隔被设置成近似等于当平均含量的成分被检测到时出现的峰(标准峰)的半高宽的十分之一，即，一个峰将由近似20个测量点表示。这是因为为一个峰设置太小的测量点数目使得峰的再现性变差，而设置太大的测量点数目要求峰值数据的平滑处理以缓和测量点之间的变化的影响。然而，实际包含在样品中的各种成分的量是不均匀的。也就是说，由低量成分在质谱图上形成的峰比标准峰更窄且更低，而由高量成分形成的峰比标准峰更宽且更高。如已经描述的，传统的制备分离色谱仪在预定时间间隔从检测器获取输出信号而不管成分的量，并且进行用于定位该成分的洗脱的开始点和结束点的处理。因此，由低量成分形成的低峰可能被遗漏，允许该成分避免收集处理，或者相反地，由高量成分形成的峰上的检测信号的波动可能被误认为是峰的结束，导致该成分的收集被错误地中止。本专利技术要解决的问题是提供一种制备分离色谱仪，该制备分离色谱仪能够精确地定位包含在样品中的成分的洗脱的开始点和结束点，并且收集相同的成分，而不管化合物的量。
问题的解决方案根据本专利技术的制备分离色谱仪已经被开发用于解决先前描述的问题，包括：a)色谱仪，所述色谱仪具有柱和检测器，所述柱用于时间分离包含在样品中的一个或者多个目标成分，所述检测器用于检测从所述柱中被洗脱出的每一个目标成分；b)馏分收集器，所述馏分收集器用于收集从所述检测器离开的目标成分；c)控制器，所述控制器用于基于所述输出信号来确定来自所述检测器的输出信号上的变化率，参考所述变化率变得比正的预定参考值大的时间点，命令所述馏分收集器对于所述目标成分发起收集操作，以及参考所述变化率的绝对值在所述变化率转向负之后变得比负的预定参考值的绝对值小的时间点，中止对于所述目标成分的所述收集操作；d)存储部，所述存储部用于存储采样率信息，在所述采样率信息中，来自所述检测器的所述输出信号的值与所述控制器确定所述输出信号的所述变化率的时间间隔相关；以及e)采样率确定器，所述采样率确定器用于基于所述采样率信息和通过所述控制器从所述检测器获取到的所述输出信号的所述值，确定所述控制器确定所述输出信号的所述变化率的所述时间间隔。采样率信息的一个实例是其中检测器的动态范围被划分为段(segment)的表格，每一段与时间间隔的一个值相关。另一个实例是用于从来自检测器的输出信号的值计算时间间隔的数学公式。“参考所述变化率变得比正的预定参考值大的时间点，命令所述馏分收集器对于所述目标成分发起收集操作”的操作指的是在从变化率已经变得比正的预定参考值大的时间点(目标成分的洗脱的开始点)延迟预定时间量的时间点，命令馏分收集器对于目标成分发起收集操作。“预定时间量”对应于已经经过检测器的成分到达馏分收集器的收集部分所需的时间量(延迟时间)，其通过从检测器到馏分收集器的通道的长度、目标成分的移动速度(流动相的流速)、以及其它因素而被确定。对于目标成分的收集操作的中止同样类似地被进行：馏分收集器在从变化率转向负之后变化率的绝对值已经变得比负的预定参考值的绝对值小的时间点(即，目标成分的洗脱的结束点)延迟预定时间量的时间点，被命令中止对于目标成分的收集操作。控制器从检测器获取输出信号的时间间隔只需要等于或者短于控制器确定输出信号的变化率的时间间隔；该两个间隔不需要总是彼此相等。例如，控制器可以被配置成在等于或者小于用于确定变化率的最短的可能的时间间隔的预定时间间隔从检测器获取输出信号，并且仅使用获取的输出信号的一部分来确定输出信号上的变化率。由低量成分形成的峰比标准峰更窄且更低，而由高量成分形成的峰比标准峰更宽且更高。为了处理这种取决于成分的量的在峰的宽度和高度上的变化，采样率信息被准备，以使得对于来自检测器的较低的输出信号的水平，用于确定变化率的较短的时间间隔将被设置，而对于较高的输出信号的水平，用于确定变化率的较长的时间间隔将被设置。这个设置防止由低量成分形成的低峰被遗漏，从而允许该成分避免采集处理的情况，以及在由高量成分形成的峰上的检测信号的波动被误认为峰的结束的情况。因此，不管样品中的成分的量，目标成分的洗脱的开始点和结束点可以被精确地定位，并且该成分可以由馏分收集器收集。被开发用于解决先前描述的问题的本专利技术的另一个方面是用于使用制备分离色谱仪收集本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备分离色谱仪，其特征在于，包括：a)色谱仪，所述色谱仪具有柱和检测器，所述柱用于时间地分离包含在样品中的一个或者多个目标成分，所述检测器用于检测从所述柱中被洗脱出的每一个目标成分；b)馏分收集器，所述馏分收集器用于收集从所述检测器离开的目标成分；c)控制器，所述控制器用于基于所述输出信号来确定来自所述检测器的输出信号的变化率，参考所述变化率变得比正的预定参考值大的时间点，来命令所述馏分收集器对于所述目标成分发起收集操作，以及参考所述变化率的绝对值在所述变化率转向负的之后变得比负的预定参考值的绝对值小的时间点，来中止对于所述目标成分的所述收集操作；d)存储部，所述存储部用于存储采样率信息，在所述采样率信息中，来自所述检测器的所述输出信号的值与所述控制器确定所述输出信号的所述变化率的时间间隔相关；以及e)采样率确定器，所述采样率确定器用于基于所述采样率信息和通过所述控制器从所述检测器获取到的所述输出信号的所述值，来确定所述控制器确定所述输出信号的所述变化率的所述时间间隔。

【技术特征摘要】
2015.04.03 JP 2015-0764221.一种制备分离色谱仪，其特征在于，包括：a)色谱仪，所述色谱仪具有柱和检测器，所述柱用于时间地分离包含在样品中的一个或者多个目标成分，所述检测器用于检测从所述柱中被洗脱出的每一个目标成分；b)馏分收集器，所述馏分收集器用于收集从所述检测器离开的目标成分；c)控制器，所述控制器用于基于所述输出信号来确定来自所述检测器的输出信号的变化率，参考所述变化率变得比正的预定参考值大的时间点，来命令所述馏分收集器对于所述目标成分发起收集操作，以及参考所述变化率的绝对值在所述变化率转向负的之后变得比负的预定参考值的绝对值小的时间点，来中止对于所述目标成分的所述收集操作；d)存储部，所述存储部用于存储采样率信息，在所...

【专利技术属性】
技术研发人员：大古场努，入来隆之，
申请(专利权)人：株式会社岛津制作所，
类型：发明
国别省市：日本;JP