提供用于检测川崎病的方法及试剂盒。具体而言，提供用于测序或测量miRNA的试剂在制备用于检测川崎病(KW)的试剂、微阵列或试剂盒中的用途，其中，所述miRNA选自miR‑941、miR‑182‑5p和miR‑183‑5p的至少一种；以及用于检测川崎病的微阵列或试剂盒，该微阵列或试剂盒包含用于在检测样本内测序或测量下列miRNA：miR‑941、miR‑182‑5p或miR‑183‑5p的至少一个的表达水平的试剂。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种检测方法及试剂盒，特别是一种利用测量特定miRNA的表达水平来检测川崎病的方法及试剂盒。
技术介绍
在先前技术章节中讨论的标的主题不应当被假定为先前技术，仅作为在先前技术章节中提及的结果。相似地，在先前技术章节中陈述的问题以及对该问题的原因的理解不应被假定为之前在先前技术中已习知。在先前技术章节中之标的主题可仅仅代表不同的方法，于该些方法中及该些方法本身亦可能作为专利技术。川崎病(Kawasaki disease，KD)是造成血管发炎作用的小儿疾病。虽然川崎病在所有种族和族群中都有报告，然而此疾病主要影响的还是亚太族裔的孩童。川崎病初期和最明显的症状是发烧至少五天。如果没有治疗，大约百分之20至25的受影响孩童会导致冠状动脉动脉瘤，且川崎病在已开发国家中是年轻孩童后天性心脏疾病的主要元凶。在开始发烧的前面10天内成功地检测川崎病，且接续高剂量静脉注射免疫球蛋白(IVIG)可大幅地降低冠状动脉损伤的发生率。根据美国心脏协会(American Heart Association，AHA)于2004年的诊断基准，目前针对川崎病并没有决定性的实验室诊断测试，且川崎病的诊断大多数为临床诊断。这些诊断基准包括发烧超过5日、两侧非化脓性结膜炎、粘膜变化、手脚的硬结性血管性水肿、畸形皮疹(dysmorphous skin rashes)以及直径大于1.5cm的急性非化脓性颈部淋巴结肿大(acute nonpurulent cervical lymphadenopathy)。然而，AHA基准与日本循环器学会的指导方针略微不同，其使得川崎病的临床诊断复杂化。此外，传染性疾病，像是葡萄球菌或链球菌的感染，可能会拟似川崎病。在受感染的孩童中，临床医师难以精确地诊断川崎病且迅速地给药IVIG以防止冠状动脉疾病。针对川崎病之经济且精确的实验室诊断测试的需求未被满足，而本专利技术满足此需求与其他需求。
技术实现思路
在一个实施例中，本专利技术揭露用于在受试者上检测川崎病的方法，其包含：在受试者的检测样本中测量miR-182-5p(SEQ ID No:2)的表达水平的步骤，其中，相对于在没有川崎病或控制组样本中的miR-182-5p表达水平，在该受试者的检测样本中较高的miR-182-5p表达水平指示受试者患有川崎病。在另一个实施例中，本专利技术揭露用于在受试者上检测川崎病的方法，其包含：在受试者的检测样本中测量miR-941(SEQ ID NO:8)的表达水平的步骤，其中相对于在无川崎病或控制组样本中的miR-941表达水平，受试者的较高的miR-941表达水平指示受试者患有川崎病。在又另一个实施例中，本专利技术也揭露用于在受试者内检测川崎病的方法，其包含：在受试者的检测样本中测量miR-183-5p(SEQ ID NO:3)的表达水平的步骤，其中相较于无川崎病或控制组样本中的miR-183-5p表达水平，受试者的检测样本中有较高的miR-183-5p表达水平指示受试者患有川崎病。根据本专利技术的一些实施例，提供用于在受试者内检测川崎病的方法，其包含测量受试者的检测样本内下列miRNAs：miR-182-5p、miR-183-5p或miR-941的至少一个的表达水平的步骤，其中，相对于在无川崎病或控制组样本中相应miRNA的表达水平，在检测样本中下列miRNA：miR-182-5p、miR-183-5p或miR-941的至少一个的较高表达水平是指示受试者患有川崎病。根据一个实施例，提供的是用于在受试者上检测川崎病的方法，包含在受试者的检测样本中测量下列miRNA：miR-182-5p、miR-183-5p、或miR-941的至少两个的表达水平的步骤，其中相对于在无川崎病或控制组样本中相应的miRNAs的表达水平，在测试样本中上述miRNAs的至少两个的较高miRNA表达水平指示受试者患有川崎病。本专利技术也揭露用于在受试者上检测川崎病的试剂盒，其包含在检测样本中用于测序或测量下列miRNAs：miR-941、miR-182-5p或miR-183-5p的至少一个的表达水平的试剂。在一实施例中，试剂盒进一步包含指示用于测量miRNA的试剂是用于检测川崎病的标记。本专利技术也提供用于测序或测量miRNAs试剂在制备用于检测川崎病(KW)的试剂、微阵列或试剂盒中的用途，其中，所述miRNAs选自：miR-941、miR-182-5p或miR-183-5p的至少一个。在另一个例示性实施例中，提供一种用于建立川崎病特异的机器学习演算法的方法，其包含：(a)测定下列来自无川崎病的受试者的参考样本池以及患有川崎病的受试者的参考样本池的miRNAs：miR-223-3p(SEQ ID NO:1)、miR-182-5p(SEQ ID NO:2)、miR-183-5p(SEQ ID NO:3)、miR-378a-3p((SEQ ID NO:4)、miR-30c-5p(SEQ ID NO:5)、miR-148a-3p(SEQ ID NO:6)、miR-27a-3p(SEQ ID NO:7)、miR-941(SEQ ID NO:8)、miR-140-3p(SEQ ID NO:9)或miR-30e-3p(SEQ ID NO:10)的至少一个的ΔCt值；以及(b)将从步骤(a)来自无川崎病的受试者的该参考样本池的至少一个ΔCt值，以及来自有川崎病的受试者的该参考样本池的至少一个ΔCt值存取(registering)进入机器学习演算法；以及(c)使用在步骤(b)的机器学习演算法建立二元分类模型(binary classification model)。在又另一个例示性实施例亦提供使用本文描述的川崎病特异机器学习演算法以诊断川崎病的方法。此专利中使用的术语”专利技术”、”该专利技术”、”此专利技术”、以及”本专利技术”是旨在广泛地指称本专利以及以下专利的申请专利范围的全部适格标的。包含这些术语的陈述应该被理解成非对本文描述的主题标的之限制，或是非对以下专利的申请专利范围的意义或范畴之限制。被此专利涵盖的专利技术的实施例是藉由以下申请专利范围所定义，而非被此
技术实现思路
所定义。
技术实现思路
是本专利技术的各种态样的上位总览，并且介绍一些将在以下实施方式章节中进一步描述的概念。此
技术实现思路
非旨在界定所主张之专利标的之主要或必要技术特征，也非旨在独立使用以决定所主张的专利标的之范畴。专利标的应藉由参考整份说明书的合适部分、任意或全部的图式以及每一项申请专利范围来理解。在与附图及下列实施方式一同阅读下，本专利技术将变得更显而易知。附图说明本专利技术的描述性实施例将参考以下图式于下文中更详细地说明：图1是描述使用qPCR分析31个发热的控制组样本(在X轴上标记为”C”)中以及37个川崎病样本(在X轴上标记为”D”)中的10个miRNA：miR-223-3p、miR-182-5p、miR-183-5p、miR-378a-3p、miR-30c-5p、miR-148a-3p、miR-27a-3p、miR-941、miR-140-3p或miR-30e-3p的表达水平(ΔCt)的长条图。****、***、**、以及*分别代表p<0.0001、p<0.001、p<0.01以及p<0.05。图2是根据第1图中10本文档来自技高网...
【技术保护点】
用于测序或测量miRNA的试剂在制备用于检测川崎病(KW)的试剂、微阵列或试剂盒中的用途，其中，所述miRNA选自miR‑941、miR‑182‑5p和miR‑183‑5p的至少一种。
【技术特征摘要】
2015.04.03 US 62/142,7421.用于测序或测量miRNA的试剂在制备用于检测川崎病(KW)的试剂、微阵列或试剂盒中的用途，其中，所述miRNA选自miR-941、miR-182-5p和miR-183-5p的至少一种。2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述miRNA为miR-182-5p及miR-183-5p。3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述miRNA为miR-183-5p及miR-941。4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述miRNA为miR-182-5p及miR-941。5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述miRNA为miR-182-5p及miR-183-5p及miR-941。6.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述用于测序或测量miRNA的试剂还包括用于测序或测量miR-27a-3p、miR-148a-3p、miR-30c-5p、miR-30e-3p、miR-378a-3p、miR-233-3p和hsa-miR-140-3p中的至少一种miRNA的试剂。7.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述miRNA表达水平藉由实时PCR来测定。8.一种用于检测川崎病的微阵列或试剂盒，其特征在于，包含：用于在一检测样本内测序或测量下列miRNA：miR-941、miR-182-5p或miR-183-5p的至少一个的表达水平的试剂。9.如权利要求8所述的微阵列或试剂盒，其特征在于，所述检测样本是血清。10.如权利要求8所述的微阵列或试剂盒，其特征在于，所述试剂是实时PCR。11.如权利要求8所述的微阵列或试剂盒，其特征在于，所述试剂是特异于miR-941、miR-182-5p或miR-183-5p的探针寡核苷酸。12.如权利要求8所述的微阵列或试剂盒，其...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭和昌，李松洲，詹文庆，
申请(专利权)人：长庚医疗财团法人高雄长庚纪念医院，
类型：发明
国别省市：中国台湾;71
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