一种火力楠组织培养快速繁殖育苗方法，包括如下步骤：种子消毒、丛芽诱导、继代培养、生根培养、练苗培养、生根苗移植，其中，丛芽诱导培养基、继代基本培养基、生根基本培养基均经过改良，本发明专利技术通过调整五个大量元素配比、微量元素浓度、添加抗氧化剂等技术方法，解决了部分胚系苗木在0.7MS上，由于营养元素不平衡，苗木生长不良，甚至玻璃化、褐化死亡的问题，生产出1.5‑4.0cm高度的健壮苗木，实现高质量继代苗木生产，适应于多数种胚使用，减少壮苗培养环节，节约成本、同时实现了高效产业化生产，降低培养成本，减少管理难度及培养时间过长，苗木出现褐化死亡。移植成活率达90%以上。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及热带林木的良种选育及苗木繁殖
，尤其是涉及火力楠组织培养快速繁殖育苗方法。
技术介绍
火力楠（Micheliamacclurei Dandy）为木兰科（Dagnoliaceae）含笑属常绿阔叶乔木，分布于我国广东、海南和广西北部以及越南北部，生长速度快，适应性强，是世界珍稀优良树种，也是我国南方主要用材造林树种和优良的改土树种。其树干通直，木材切面装饰光滑美观，硬度较高且耐腐，易干燥，有香气，少开裂，不反翘，是优良的家具和建筑用材。其花朵艳丽、树型美观、林分燃烧性差，是优良的木本花卉、园林风景树和行道树，同时也是防火林带的莺要树种，火力楠为乡土珍稀多用途造林树种。近年来，随着桉树造林面积的不断扩大，保护生态平衡、生物多样性、发展乡土珍稀造林树种的呼声越来越高，加上市场对高档珍贵用材的需求日益增长和对天然林的禁伐。火力楠作为速生珍贵乡土阔叶用材树种受到广泛的关注。很多省份及研究部门开展了火力楠种源区域化筛选、优良种源筛选、优树筛选等研究，因此，开展火力楠组培快繁技术研究，对加快火力楠生产的良种化进程，提高火力楠林的单位面积产量具有重要的意义。由于火力楠的选优研究才开始，没有确定的优良母株，而林木间的个体差异性大，外采不经确定的母株，组培成功后，苗木不能有效的发挥无性系苗的作用，潜在存在着病害、生长不良等风险，同时潜在存在着方法、配方落点不落面的风险。申请号为201410297285X，专利名称为“一种火力楠的组织培养快繁方法”的申请文件公开了的方法为：该方法选取火力楠的嫩茎或顶芽作为外植体, 经消毒后接种到诱导培养基上，诱导培养基以1/2MS 为基本培养基，配加2.0% ～ 3.5% 蔗糖、0.35% ～ 0.5% 琼脂、0.05% ～0.1% 活性炭、0.03% ～ 0.1% 蛋白胨、50 ～ 100ml/L 椰子汁以及0.8 ～ 1.2mg/L 6-BA 和0.3 ～0.5mg/L NAA，pH 值为5.4 ～ 5.8；将不定芽转入继代培养基上进行增殖培养，继代培养基以MS 为基本培养基，配加1.5% ～ 2.5% 蔗糖、0.35% ～ 0.5% 琼脂、0.05% ～ 0.1% 活性炭以及0.4 ～ 0.8mg/L 6-BA、0.1 ～ 0.3mg/L IBA 和0.1 ～ 0.4mg/L NAA，pH 值为5.4 ～ 5.8 ；将高度约为3 ～ 5cm 的丛生芽分切接种到生根培养基上进行生根培养，生根培养基以SH为基本培养基，配加1.0% ～ 1.5% 蔗糖、0.35% ～ 0.45% 琼脂、0.05% ～ 0.1% 活性炭、30 ～50ml/L 椰子汁以及0.3 ～ 0.6mg/L IBA 和0.1 ～ 0.3mg/L NAA，pH 值为5.4 ～ 5.8 ；然后进行炼苗移栽试。该培养方法均能取得较高的成活率，但是也有不足的地方，其不定芽诱导、丛芽诱导、生根培养、均需要经过暗培养，且用到蛋白胨、椰子汁、其生根培养时间为30-45天内生根，练苗时间30天，存在着以下几方面的不足：1、操作环节多而复杂且蛋白胨、椰子汁培养成本高。2、生根培养及练苗时间过长，长达60-75天的生根练苗培养，不仅大大提高培养成本，而且会增加污染率，降低生产效益；长时间的生根练苗培养，增加管理难道，对容易褐化的火力楠芽苗，不仅容易出现褐化死亡，同时也容易出现营养耗尽而死。另有中国文献（李雪，王淑芬，蒋雄辉.醉香含笑的组织培养与植株再生[J]. 植物生理学通讯.2005(06)）公开了醉香含笑，即火力楠的组培，诱导培养基为1/3MS+6BA0.2mg.L（单位下同）+NAA0.02；增殖培养基：1/3MS+活性炭0.3%；生根培养基：1/4MS+IBA2.0+NAA3.0，以上培养基均加2.0g.L~Gelrite，除生根培养基加1.5%蔗糖外，其余加2.5%蔗糖，pH5.8，培养温度为26±1℃，光照12h/d，诱导培养时光强为6μmol.m-2.s-1左右，其他为50μmol.m-2.s-1左右。该培养方法:最佳增殖培养基40 d继代转接一次，长新芽的方式是“芽生芽”，芽的高度在0.5~2.0cm，新芽未抽出，基部呈现出黑色，偶尔也有白色呈晶体状的愈伤组织产生。继代单芽太小时，易褐化死亡。存在着以下不足：增殖培养基存在缺陷，造成芽苗转接周期长，高度生长不高，繁殖倍数低，有效苗低，需通过壮苗才能生根培养的问题，不利于效益化产业生产。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种操作简单，生产成本低、繁殖高、成苗高，繁殖育苗时间短、移植成活率高的火力楠组织培养快速繁殖育苗方法。为了实现上述目的，本专利技术采用了如下的技术方案：一种火力楠组织培养快速繁殖育苗方法，包括如下步骤：S1、种子消毒人工去除种壳，并尽可能保持胚的完整，在超净工作台上对种子进行消毒得到去壳种胚；S2、丛芽诱导将消毒好的种胚，接入丛芽诱导培养基中进行诱导丛芽，丛芽诱导培养基的pH值为5.8-6.2，包括0.7倍MS的大量元素、MS的微量元素、MS的有机质、6BA 0.35-0.75mg/L、NAA 0.2-0.4mg/L、30-40mg/L蔗糖；S3、继代培养丛芽诱导出来后，转入火力楠基本培养基，培养条件同S2，培养周期为30-35天，得到继代芽苗，火力楠继代基本培养基：大量元素NH4NO3 150-500mg/l、KH2PO4 340-680mg/l、MgSO4555-800mg/l、KNO3 1900mg/l、CaCl2 332mg/l、Ca (NO3)2 85mg/L，微量元素2 倍MS、有机质MS、激素6BA 0.15-0.3mg/L、NAA 0.1-0.2mg/L、30-40mg/L蔗糖、PVP 4-7g/L；S4、生根培养继代芽苗长到3.0cm以上，选取高度在3.0cm以上最少带3片充分展开叶，节间长度短的上代芽苗接入生根培养基，培养45天，芽苗开始生根；S5、练苗培养芽苗生根培养30天后，在光照强度为5000-10000LX的练苗棚中练苗，练苗时间为7-15天，及时移植，练苗时间不适过长，过长容易造成生根苗褐化，影响苗木质量；S6、生根苗移植移植前用0.5%高锰酸钾消毒介基，移植后一个星期内全盖薄膜，并适当遮阴，一个星期后打开薄膜一日6次清水喷雾，每次10秒，两个星期后一日5次喷雾，每次10秒，3个星期后一日5次喷雾，每次10秒，移植后第7天、第14天，第21天轮流喷托不津或多菌灵，一个月后，一日4次喷雾，每次10秒，移植成活率在90%以上。进一步地，S1中，对种子进行消毒的方法为用0.01%升汞消毒5-9分钟后，无菌水清洗后浸泡5分钟，在用无菌水清洗，重复清洗浸泡4-5次后，可以接入丛芽诱导培养基中，消毒成功率62%以上。进一步地，生根基本培养基为：五个大量元素0.4MS、Ca(NO3)2 380mg/L，微量MS、有机质MS，3.5-11.5mg/L NAA、0.2mg/L IBA、0.2mg/L ABT生根二号。作为另一种技术方案，生根基本培养基为：五个大量元素0.4MS、Ca(NO3)2 380mg/L，微量MS、有机质MS， 0.2mg/L IBA、本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种火力楠组织培养快速繁殖育苗方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、种子消毒人工去除种壳，并尽可能保持胚的完整，在超净工作台上对种子进行消毒得到去壳种胚；S2、丛芽诱导将消毒好的种胚，接入丛芽诱导培养基中进行诱导丛芽，丛芽诱导培养基的pH值为5.8‑6.2，包括0.7倍MS的大量元素、MS的微量元素、MS的有机质、6BA 0.35‑0.75mg/L、NAA 0.2‑0.4mg/L、30‑40mg/L蔗糖；S3、继代培养丛芽诱导出来后，转入火力楠基本培养基，培养条件同S2，培养周期为30‑35天，得到继代芽苗，火力楠继代基本培养基：大量元素NH4NO3 150‑500mg/l、KH2PO4 340‑680mg/l、MgSO4 555‑800mg/l、KNO3 1900mg/l、CaCl2 332mg/l、Ca (NO3)2 85mg/L，微量元素2 倍MS、有机质MS、激素6BA 0.15‑0.3mg/L、NAA 0.1‑0.2mg/L、30‑40mg/L蔗糖、PVP 4‑7g/L；S4、生根培养继代芽苗长到3.0cm以上，选取高度在3.0cm以上最少带3片充分展开叶，节间长度短的上代芽苗接入生根培养基，培养20‑25天，芽苗开始生根；S5、练苗培养芽苗生根培养30天后，在光照强度为5000‑10000LX的练苗棚中练苗，练苗时间为7‑15天，及时移植，练苗时间不适过长，过长容易造成生根苗褐化，影响苗木质量；S6、生根苗移植移植前用0.5%高锰酸钾消毒介基，移植后一个星期内全盖薄膜，并适当遮阴，一个星期后打开薄膜一日6次清水喷雾，每次10秒，两个星期后一日5次喷雾，每次10秒，3个星期后一日5次喷雾，每次10秒，移植后第7天、第14天，第21天轮流喷托不津或多菌灵，一个月后，一日4次喷雾，每次10秒，移植成活率在90%以上。...
【技术特征摘要】
1. 一种火力楠组织培养快速繁殖育苗方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、种子消毒人工去除种壳，并尽可能保持胚的完整，在超净工作台上对种子进行消毒得到去壳种胚；S2、丛芽诱导将消毒好的种胚，接入丛芽诱导培养基中进行诱导丛芽，丛芽诱导培养基的pH值为5.8-6.2，包括0.7倍MS的大量元素、MS的微量元素、MS的有机质、6BA 0.35-0.75mg/L、NAA 0.2-0.4mg/L、30-40mg/L蔗糖；S3、继代培养丛芽诱导出来后，转入火力楠基本培养基，培养条件同S2，培养周期为30-35天，得到继代芽苗，火力楠继代基本培养基：大量元素NH4NO3 150-500mg/l、KH2PO4 340-680mg/l、MgSO4555-800mg/l、KNO3 1900mg/l、CaCl2 332mg/l、Ca (NO3)2 85mg/L，微量元素2 倍MS、有机质MS、激素6BA 0.15-0.3mg/L、NAA 0.1-0.2mg/L、30-40mg/L蔗糖、PVP 4-7g/L；S4、生根培养继代芽苗长到3.0cm以上，选取高度在3.0cm以上最少带3片充分展开叶，节间长度短的上代芽苗接入生根培养基，培养20-25天，芽苗开始生根；S5、练苗培养芽苗生根培养30天后，在光照强度为5000-10000LX的练苗棚中练苗，练苗时间为7-15天，及时移植，练苗时间不适过长，过长容易造成生根苗褐化，影响苗木质量；S6、生根苗移植移植前用0.5%高锰酸钾消毒介基，移植后一个星期内全盖薄膜，并适当遮阴，一个星期后打开薄膜一日6次清水喷雾，每次10秒，两个星期后一日5次喷雾，每次10秒，3个星期后一日5次喷雾，每次10秒，移植后第7天、第14天，第21天轮流喷托不津或多菌灵，一个月后，一日4次喷雾，每次10...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘英，曾炳山，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院热带林业研究所，
类型：发明
国别省市：广东;44
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