平菇多糖的应用制造技术

本发明专利技术涉及医药技术领域，公开了平菇多糖在预防和/或治疗阿尔茨海默病相关方面的新应用。平菇多糖能抑制体外乙酰胆酯酶的活力，有体外抗AD作用，能够明显能降低脑内p‑tau、p‑GSK3、Aβ三种蛋白水平，且能改善AD大鼠的认知障碍，并降低AD大鼠脑内乙酰胆碱酯酶水平，有明显的体内抗AD作用。本发明专利技术为治疗和缓解AD扩宽了途径，具有十分重要的意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药
，具体的说是涉及平菇多糖的应用。
技术介绍
近年来在真菌研究中发现许多多糖物质不仅具有抗肿瘤和较高免疫作用，而且具有良好的药理和临床利用价值，并开发成临床药物。现代科学研究已证明，食用菌多糖对机体免疫和细胞免疫均有增强作用；对网状内皮系统有兴奋功能，对动物肝脏有保护作用；具有广谱的抗病毒、抗肿瘤的免疫作用和对胆固醇的溶解作用。平菇，在生物分类学中隶属于真菌门担子菌纲伞菌目白蘑科侧耳属，是一种常见的食用菌，其主要活性成分为平菇多糖，在我国广泛种植。平菇多糖(Pleurotus ostreatus polysaccharide，POP)是从平菇中提取的一种重要组分，它具有抗氧化，抗肿瘤，抑制癌细胞增生，诱导细胞凋亡，诱导干扰素合成等多种功能，因而备受人们关注。目前，有关平菇多糖的提取方法多是煎煮法(水提醇沉)、酸碱浸提法、酶解法、超声波提取法。阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease，AD)是一种原因不明以认知功能减退为主要临床表现的神经系统退行性疾病，主要表现为进行性智能障碍，记忆力减退，伴有人格和情感改变。随着我国人口老龄化的日益严重，AD已越来越成为一个严重的社会问题。因此，寻找各种途径去实现治疗和缓解AD的研究工作都十分必要也具有十分重要的意义。虽然平菇多糖具有抗炎、抗氧化和抗肿瘤的作用，但是在预防和治疗AD方面还未有相关的报道。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供平菇多糖在制备乙酰胆碱酶抑制剂中的应用，以此提供平菇多糖在治疗因乙酰胆碱酶过多的疾病中的应用。本专利技术的另一个目的在于提供平菇多糖在制备Aβ蛋白抑制剂中的应用。本专利技术的另一个目的在于提供平菇多糖在制备去tau蛋白和/或GSK3蛋白磷酸化水平药物中的应用。本专利技术的另一个目的在于提供平菇多糖在制备治疗和/或预防阿尔茨海默病药物中的应用。本专利技术上述提到的抑制剂和药物可选自颗粒剂、胶囊剂、粉针剂、片剂、口服液、丸剂、膏剂中的一种。本专利技术所述平菇多糖可按照本领域中煎煮法(水提醇沉)、酸碱浸提法、酶解法、超声波提取法进行提取获得。本专利技术提供一个较优的提取方案为纤维素酶酶解法配合超声波提取法进行提取，工艺条件为酶解温度为52℃，酶解时间为57min，酶用量0.0165g，超声时间5min，具体可参照《Box-behnken设计-响应面法优选平菇中多糖的超声波辅助纤维素酶提取工艺》中记载的提取方法。乙酰胆碱是胆碱型神经元的信号递质，它传导的信号和认知、学习及记忆有关，其代谢过程和AD紧密相关。在AD的早期，胆碱功能缺乏的症状早于其他任何症状，AD特征之一的神经元凋亡也主要发生在胆碱神经元。患有AD的人90％在神经冲动传输过程中缺乏乙酰胆碱，所以减轻病症方法之一是抑制乙酰胆碱酶对乙酰胆碱的水解，恢复乙酰胆碱的正常水平。本专利技术从体外对平菇多糖的抗AD作用进行了检测，结果表明，平菇多糖能抑制体外乙酰胆酯酶的活力，有体外抗AD作用。同时，AD的主要病理特征之一是在大脑皮层和海马出现Aβ沉积聚集形成的老年斑以及Tau蛋白过度磷酸化，形成纤维蛋白缠结。Aβ来源于β淀粉样前体蛋白(APP)，APP经过两条途径代谢：若被α分泌酶酶切，为α分泌酶途经，不产生Aβ；若被β分泌酶酶切则为β分泌酶途径，可产生Aβ。BACE表达的增加使β分泌酶含量增高，将会促使APP通过β分泌酶途径代谢，形成Aβ。Aβ等可通过抑制PI3K和PKC途径而激活GSK3β并使tau蛋白发生过度磷酸化、聚积，从而导致神经元功能、结构改变，动物记忆障碍；同时抑制PI3K和PKC可持续激活GSK3β；Tau蛋白经PKA预磷酸化后更易于被GSK3β磷酸化。因此，减少Aβ产生减少，抑制tau蛋白的磷酸化，AD有可能得到有效的防治和治疗。本专利技术采用免疫蛋白印迹法对AD大鼠脑内与AD发生、发展相关的三种蛋白：p-tau、p-GSK3、Aβ水平进行表达，结果表明，平菇多糖明显能降低脑内p-tau、p-GSK3、Aβ三种蛋白水平。此外，本专利技术还通过跳台行为学实验、Morris水迷宫行为学实验评估平菇多糖改善阿尔茨海默病行为学障碍的药效，结果表明，平菇多糖能改善AD大鼠的认知障碍，并降低AD大鼠脑内乙酰胆碱酯酶水平，有明显的体内抗AD作用。由以上技术方案可知，本专利技术提供了平菇多糖在预防和/或治疗阿尔茨海默病相关方面的新应用，为治疗和缓解AD扩宽了途径，具有十分重要的意义。附图说明图1所示为平菇多糖对乙酰胆碱酯酶的IC50曲线图；图2所示为定位巡航实验红外热分布图；图3所示为空间搜索实验红外热分布图；图4所示为免疫蛋白印迹结果。具体实施方式本专利技术实施例公开了平菇多糖的应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术内。本专利技术所述应用已通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。以下就本专利技术所提供的平菇多糖的应用做进一步说明。实施例1：平菇多糖体外乙酰胆碱酯酶抑制作用研究1、实验方法采用酶标仪，建立体外乙酰胆碱酯酶抑制活性筛选体系，利用体外酶活性测定方法对乙酰胆碱酯酶抑制活性进行测定，通过IC50对活性成分进行评价。酶标仪反应体系：抑制率测定：反应体系中，96孔板内药物终浓度定为100mg/L，即母液稀释10倍后以10μL体积加入反应体系，实验分为6组，每组设3个复孔，分别为阴性对照组(酶+缓冲液+底物)，空白对照组(底物+缓冲液)，阳性对照组(加兰他敏+酶+缓冲液+底物)，阳性空白对照组(加兰他敏+缓冲液+底物)，样品组(平菇多糖+酶+缓冲液+底物)，样品空白对照组(平菇多糖+缓冲液+底物)(平菇多糖有色物在405nm处检测时会出现自身颜色干扰，因此在检测时要设置每味平菇多糖各浓度的空白对照尽量避免假阳性现象)。首先将酶和缓冲液、药物、阳性对照物、底物在37℃温度下水浴30min，然后按照阳性对照物或平菇多糖、酶、缓冲液、底物的顺序依次加入96孔板，使每个孔中的总体积为100μL，按反应体系加入，各孔的反应温度为37℃，时间10min。抑制率(％)＝(OD阴性对照组-OD空白对照组)-(OD样品组-OD样品空白对照组)/(OD阴性对照组-OD空白对照组)×100％采用SPSS 10.0统计软件进行数据处理。实验结果以均数±标准差表示，Student’s t-test进行组间比较。P<0.05为差异有统计学意义。2、实验结果通过表1和图1，可以得出平菇多糖抑制率呈一趋势上升，当升至最高时，不再上升，呈下降趋势，得到抑制率在0.00625g/mL(相当于生药量45.12mg/mL)时最大，此时抑制率最大为72.41％，即在此浓度时为最佳抑制状态，抑制率最大，IC50为3.01mg/mL(相当于生药量21.73mg/mL)。从体外对平菇多糖的抗AD作用进行了筛选，结果表明，平菇多糖能抑制体外乙酰胆酯酶的活力，有体外抗AD作用。表1 平菇多糖对乙酰胆碱酯酶的抑制率实施例2：平菇多糖改善阿尔茨海默病行为学障碍的药效学研究1、大鼠造模及分组Wistar本文档来自技高网...

【技术保护点】
平菇多糖在制备乙酰胆碱酶抑制剂中的应用。

【技术特征摘要】
1.平菇多糖在制备乙酰胆碱酶抑制剂中的应用。2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述抑制剂为颗粒剂、胶囊剂、粉针剂、片剂、口服液、丸剂、膏剂中的一种。3.平菇多糖在制备Aβ蛋白抑制剂中的应用。4.根据权利要求3所述应用，其特征在于，所述抑制剂为颗粒剂、胶囊剂、粉针剂、片剂、口服液、丸剂、膏剂中的一种。5.平菇多糖在制备去t...

【专利技术属性】
技术研发人员：张艳，金刚，曲小姝，杨秀东，张扬，周鸿立，
申请(专利权)人：吉林化工学院，
类型：发明
国别省市：吉林;22