一种具有免疫调节活性的灵芝芽蛋白的制备方法技术

本发明专利技术涉及灵芝芽功能性食品和药用的开发，具体涉及一种具有免疫调节活性的灵芝芽蛋白的制备方法。采用超声提取法提取灵芝芽蛋白、饱和硫酸铵盐析纯化，DEAE‑52柱层析分离，得到3种组分灵芝芽蛋白GLBP‑0、GLBP‑1、GLBP‑2。粒径和电位显示，GLBP‑0的Zeta电位最小，粒径最大。紫外显示在280nm具有蛋白的特征吸收。红外显示GLBP‑0具有蛋白质典型酰胺带的特征吸收，SDS‑PAGE电泳结果显示GLBP‑0有5个蛋白条带，是一种混合蛋白，分子量分布主要在10‑30kDa，并得出GLBP‑0组分活性较好。制备的灵芝芽蛋白活性较好，有望作为潜在的免疫调节剂，用于功能性食品和药物的开发。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及功能性食品和药用开发领域，一种具有免疫调节活性的灵芝芽蛋白的制备方法。

技术介绍

1、灵芝( ganoderma lucidum)是一种灵芝科、灵芝属的大型药用真菌，又称灵芝草、神芝、芝草、仙草、瑞草，大多为一年生，少数为多年生，有柄，小柄侧生，而灵芝芽便是灵芝菌柄伸长阶段生长出的一种小芽，由伸长的菌柄和未分化的菌盖组成，占据灵芝种植总产量的10~12%，但为保证灵芝生长，每株灵芝都需要剪除多余的灵芝芽，修剪下来的灵芝芽常被当作废弃物直接丢弃，造成了资源的浪费。因此，对于灵芝芽的纵深开发具有一定的现实意义。

2、灵芝的主要成分包括多糖、三萜类、甾醇、腺苷、氨基酸、脂肪类等，由于灵芝子实体及孢子粉中蛋白质含量较低，近年来的研究主要聚焦于灵芝多糖和三萜方面，蛋白作为其中的关键成分则相对被忽视。

技术实现思路

1、本申请应用超声法提取灵芝芽中的蛋白质，并采用deae-52纤维素对灵芝芽蛋白进行纯化分离，得到不同组分的芽蛋白；通过紫外、红外、本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种灵芝芽蛋白的制备方法如下：

2.根据权利要求1所述的方法：具体步骤为

3.根据权利要求1所述的方法，对所述DEAE-52纤维素进行预处理，预处理方法为：先将DEAE-52干粉浸泡于去离子水中溶胀过夜，再用0.5mol/L的HCl溶液浸泡2 h，用去离子水洗至中性并抽滤；将抽干的DEAE-52再在浸泡在0.5mol/L的NaOH溶液中2 h，再用去离子水洗至中性，然后装柱；采用pH7.3、10 mmol/L的Tris-HCL缓冲液进行平衡，待流出液pH值达到7.3时，停止平衡。

4.根据权利要求1所述的方法，所述超声提取法进行提取的方法为：称取脱...

【技术特征摘要】

1.一种灵芝芽蛋白的制备方法如下：

2.根据权利要求1所述的方法：具体步骤为

3.根据权利要求1所述的方法，对所述deae-52纤维素进行预处理，预处理方法为：先将deae-52干粉浸泡于去离子水中溶胀过夜，再用0.5mol/l的hcl溶液浸泡2 h，用去离子水洗至中性并抽滤；将抽干的deae-52再在浸泡在0.5mol/l的naoh溶液中2 h，再用去离子水洗至中性，然后装柱；采用ph7.3、10 mmol/l的tris-hcl缓冲液进行平衡，待流出液ph值达到7.3时，停止平衡。

4.根据权利要求1所述的方法，所述超声提取法进行提取的方法为：称取脱脂后灵芝芽粉末，按料液比1:20加入0.01 m hcl含0.15 m nacl的提取溶剂，在冰浴中300w超声半小时，取上清盐析及透析后，冷冻干燥，即得灵芝芽纯化蛋白。

5.根据权利要求1所述的方法，所述盐析需边搅拌边缓慢向蛋白提取液中每100ml提取液中加入76.7 g硫酸铵直至饱和度为100%，然后置于4℃静置过夜。

6.根据权利要求1所述的方法，所述deae-52纤维素对纯化后的灵芝芽蛋白进行分离的具体步骤为：称取纯化后的灵芝芽蛋白，用去离子水将其溶解配置成10 mg/ml，上样时吸去柱面液体，以毛细吸管...

【专利技术属性】
技术研发人员：周鸿立，胡鹏，毕慕涵，李想，周双萍，辛蕊，王慧竹，
申请(专利权)人：吉林化工学院，
类型：发明
国别省市：