本发明专利技术提供一种可用于制备Ⅶ型新城疫疫苗的病毒株及其编码基因。该病毒株位保藏号是CCTCC NO:V201548、名称为鸡七型新城疫病毒(Genotype VII Newcastle disease virus)VII NDV/CB‑ND02的病毒株,保藏号是CCTCC NO:V201555、名称为鸡七型新城疫病毒VII NDV/CB‑ND04的病毒株,或保藏号是CCTCC NO:V201556、名称为鸡七型新城疫病毒VII NDV/CB‑ND06的病毒株。该病毒株能够有效提高宿主对新城疫病毒的免疫力、在禽类体内产生抗体免疫持续力,适于研发和制备新城疫疫苗,也可用于制造灭活或减毒型疫苗。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物工程领域,特别是免疫学领域,具体涉及一种可用于制备Ⅶ型新城疫疫苗的病毒株及其编码基因。
技术介绍
研究报告指出:新城疫(Newcastle disease,ND)是各型禽病中最常见的一种恶性传染病,自1926年新城疫被发现以来,已传播至世界上大部分国家,此新城疫在各地区的流行不大相同。鸡新城疫,1926年首先发现于印度尼西亚,不久又在英国新城发现,之后世界各国均有流行记载。新城疫(ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的一种急性传染病,1926年首次爆发于印度尼西亚和英国的新城,故名新城疫病毒(Alexander DJ,1982)。它属于副粘病毒科(Paramyxoviridae),腮腺炎病毒属(Rubulavirus)家族的成员(Rima BK et al.,1995),属于禽类第一型副黏液病毒。其新城疫病毒的基因组为一条单股负链RNA,包含约15kb碱基,六个主要结构蛋白:3’-NP-P-M-F-HN-L-5’。近年来,由于禽类副黏液病毒(Avian Paramyxovirus,APMV)时常被发现于许多种类的家禽、信鸽等禽类间;当感染此种病毒时,经常对于禽鸟造成各种不同的临床症状,例如,造成禽类呼吸、消化和神经系统的障碍等。由于各类型新城疫病毒的毒性强弱差异大,所以新城疫发生率、致病症状、病变征候、及致死率等亦都随着病毒类型不同而明显差异。虽然轻微时病征不显着,然而严重时则会导致死亡,因而晚近已引起世界各国特别地关注、重视并且不断进行此类病原群相关的研究及调查。根据感染能力和感染后所引起的临床症状的严重性差别,新城疫病毒可分为强毒(velogenic)、中毒(mesogenic)和弱毒(lentogenic)三类(AlexanderD J,1997)。NDV强毒株感染力很强,通常以引起强烈性感染为特征;而NDV弱毒株的感染力和致病力很弱,一般无急性感染病症,事实上,包括La Sota等在内的多株弱毒NDV通常在生产上被用做活毒疫苗。然而,因为新城疫的强毒力型病毒感染的死亡率高,对养鸡业危害严重。尚无有效治疗药物,只能依靠严格消毒、隔离,活毒疫苗和灭活疫苗的协同使用预防接种。目前防止新城疫的疫苗主要使用LaSota和Hitchner B1两种弱毒株疫苗或其灭活毒株疫苗,并且这两株病毒作为疫苗毒株已经应用了几十年。LaSota和Hitchner B1两病毒株都属于基因II型,而当前流行亚洲地区的病毒株主要是基因VII型NDV。因此,上述两种疫苗不能在临床应用上提供坚强的免疫保护,此状况也可以解释了新城疫依旧在一些地区爆发流行的原因。此外,基于现有疫苗质量问题、免疫接种方式方法、免疫程序、鸡场饲养管理水平、鸡群抗体水平良莠不齐的现状,使新城疫免疫失败屡见不鲜。可以当作一个好的疫苗候选的病毒株需同时具有毒力弱、和遗传稳定性好的特点,而目前国内外分离到的新城疫病毒普遍存在强毒株的裂解位点、效价低和容易发生变异等缺点。大部分新城疫病毒的F蛋白裂解位点序列为强毒特征,但对鸡的致病力较弱,推测这种毒力的差异可能由于病毒的复制能力的差异而引起。为解决这一难题,有赖于对本地区流行的毒株的流行特点、变异特点进行研究以及筛选分离出合适的优势疫苗的病毒株,以使新城疫的防控进一步具有针对性和有效性。因此,各界莫不期待以及殷切期盼开发出一种能够解决免疫力反应低、感染力弱、防疫效果持续力弱等的传统技术的缺陷的Ⅶ型新城疫疫苗的病毒株。
技术实现思路
有鉴于此,本专利技术人等经由潜心研究及寻找用于解决传统技术缺陷的各种可能方案,进而筛选出一种不但能够克服上述现有技术的缺陷,而且不会危害饲养环境及禽类健康、且具有能够有效提高宿主对新城疫病毒的免疫力反应、对宿主的感染力在安全范围内、产生抗体免疫持续力长等功效、以及能够制成具有长效防治新城疫效能的疫苗的新颖的适用于Ⅶ型新城疫疫苗的病毒株,至此完成本专利技术。具体而言,本专利技术的目的在于提供一种可用于制备Ⅶ型新城疫疫苗的病毒株,所述的病毒株为保藏号是CCTCC NO:V201548、名称为鸡七型新城疫病毒(Genotype VIINewcastle disease virus)VII NDV/CB-ND02的病毒株,保藏号是CCTCC NO:V201555、名称为鸡七型新城疫病毒(Genotype VII Newcastle disease virus)VII NDV/CB-ND04的病毒株,或保藏号是CCTCC NO:V201556、名称为鸡七型新城疫病毒(Genotype VII Newcastledisease virus)VII NDV/CB-ND06的病毒株,这三株病毒株于2015年12月23日保藏于位于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心。在某些具体实施例中,本专利技术进一步提供了一种可用于制备Ⅶ型新城疫疫苗的病毒株,其中所述病毒株具有Fo蛋白的编码核苷酸序列为SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:3,分别依次对应鸡七型新城疫病毒VII NDV/CB-ND02、鸡七型新城疫病毒VII NDV/CB-ND04、鸡七型新城疫病毒VII NDV/CB-ND06。在某些具体实施例中,本专利技术进一步提供了一种可用于制备Ⅶ型新城疫疫苗的病毒株,其中所述病毒株具有HN蛋白的编码核苷酸序列为SEQ ID NO:4~SEQ ID NO:6,分别依次对应鸡七型新城疫病毒VII NDV/CB-ND02、鸡七型新城疫病毒VII NDV/CB-ND04、鸡七型新城疫病毒VII NDV/CB-ND06。具体而言,根据本专利技术,在某些具体实施例中,本专利技术进一步提供了一种可用于制备Ⅶ型新城疫疫苗的病毒株,其中所述病毒株具有P蛋白的编码核苷酸序列为SEQ ID NO:7~SEQ ID NO:9,分别依次对应鸡七型新城疫病毒VII NDV/CB-ND02、鸡七型新城疫病毒VIINDV/CB-ND04、鸡七型新城疫病毒VII NDV/CB-ND06。另外,在某些具体实施例中,本专利技术进一步提供了一种可用于制备Ⅶ型新城疫疫苗的病毒株,其中所述病毒株具有F0蛋白的切割点氨基酸序列(112~117)为SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15中的任一种。再者,在某些具体实施例中,本专利技术进一步提供了一种可用于制备Ⅶ型新城疫疫苗的病毒株,其中所述病毒株感染SPF鸡胚的平均致死时间在20~40小时;经过弱化后,所述病毒株的平均致死时间超过60小时。进一步,在某些具体实施例中,本专利技术提供了一种可用于制备Ⅶ型新城疫疫苗的病毒株,其中所述病毒株感染SPF鸡只的脑内致病性指数的平均数值在1.7~2;经过弱化后,所述病毒株的脑内致病性指数的平均数值在0.4以下。其中,在某些具体实施例中,本专利技术进一步提供了一种可用于制备Ⅶ型新城疫疫苗的病毒株,其中所述病毒株为感染鸡胚胎培养、动物接种、或组织培养中的至少一种。根据某些具体实施例,本专利技术进一步提供了一种可用于制备Ⅶ型新城疫疫苗的病毒株,其中所述病毒株为感染Vero细胞、BHK-21细胞、或MDCK细胞中的至少一种。进而,根据某些具体实施例,本专利技术进一步提供了一种可用于制备Ⅶ型新城疫疫苗的病毒株,本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种可用于制备Ⅶ型新城疫疫苗的病毒株,其特征在于,所述的病毒株为保藏号是CCTCC NO:V201548、名称为鸡七型新城疫病毒(Genotype VII Newcastle disease virus)VII NDV/CB‑ND02的病毒株,保藏号是CCTCC NO:V201555、名称为鸡七型新城疫病毒(Genotype VII Newcastle disease virus)VII NDV/CB‑ND04的病毒株,或保藏号是CCTCC NO:V201556、名称为鸡七型新城疫病毒(Genotype VII Newcastle disease virus)VII NDV/CB‑ND06的病毒株,这三株病毒株于2015年12月23日保藏于位于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心。
【技术特征摘要】
1.一种可用于制备Ⅶ型新城疫疫苗的病毒株,其特征在于,所述的病毒株为保藏号是CCTCC NO:V201548、名称为鸡七型新城疫病毒(Genotype VII Newcastle disease virus)VII NDV/CB-ND02的病毒株,保藏号是CCTCC NO:V201555、名称为鸡七型新城疫病毒(Genotype VII Newcastle disease virus)VII NDV/CB-ND04的病毒株,或保藏号是CCTCCNO:V201556、名称为鸡七型新城疫病毒(Genotype VII Newcastle disease virus)VIINDV/CB-ND06的病毒株,这三株病毒株于2015年12月23日保藏于位于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心。2.根据权利要求1所述的病毒株,其特征在于,所述的病毒株具有Fo蛋白,Fo蛋白的编码基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:3。3.根据权利要求1所述的病毒株,其特征在于,所述病毒株具有HN蛋白,HN蛋白的编码基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:4~SEQ ID NO:6。4.根据权利要求1所述的病毒...
【专利技术属性】
技术研发人员:林建宏,
申请(专利权)人:国年实业有限公司,
类型:发明
国别省市:中国台湾;71
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