五环三萜-肽缀合物、其制备方法、药物组合物及用途技术

本发明专利技术属于医药化工领域，涉及五环三萜-肽缀合物、其制备方法、药物组合物及用途。具体地，所述五环三萜-肽缀合物如式(Ⅰ)所示。其中XA为五环三萜类化合物或其酯化衍生物；P为2-50个氨基酸缩合形成的多肽；L为连接臂。本发明专利技术的五环三萜-肽缀合物、其药学上可接受的盐以及药物组合物具有抗菌和抗细菌感染的效果，特别是对革兰氏阳性菌具有明显的抑菌效果。XA-L-P(Ⅰ)。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药化工领域，涉及一种五环三萜-肽缀合物、其制备方法、药物组合物及用途。
技术介绍
抗菌肽具有广谱杀菌性，能够抵御外界细菌、真菌、原虫和病毒等微生物的侵害，例如1980年瑞典科学家于天蚕蛹中首次发现的抗菌肽。目前，各国科学家已经陆续发现了2000多种不同种类的抗菌肽，虽然这些抗菌肽的氨基酸序列、肽链长度和结构各异，但是不同种类抗菌肽具有以下的共同特性：(1)抗菌肽由10-50个氨基酸缩合形成；(2)抗菌肽一般是带2-9个正电荷的阳离子肽；(3)抗菌肽含有大约50％非极性氨基酸残基，同时兼具亲水性和疏水性。抗菌肽的阳离子特性及亲水、疏水的两亲特性使抗菌肽得以通过静电相互作用附着于细菌细胞膜表面上的阴离子组分，从而促使疏水基团通过疏水相互作用或范德华力嵌入细菌细胞膜发挥杀菌效力。赖氨酸和精氨酸是抗菌肽构成中使用较为频繁的碱性氨基酸。五环三萜类化合物种类繁多，具有广泛的药理作用和重要的生物活性，尤其在抗炎抗菌、护肤、抗肿瘤和机体免疫调节方面显示出令人关注的药理特性。比如，1995年RoseneiL.Brum等从蜡烛树((Vochysiadivergens)皮中分离提取的五环三萜化合物桦木酸(Betulinicacid)对金葡萄球菌具有抑制作用；2007年G.P.P.Kamatou等由16种南非鼠尾草属中分离提取的齐墩果酸(Oleanolicacid)及熊果酸(Ursolicacid)经活性筛选后表明均具有抗菌活性。目前尚需具有更好抗菌活性的全新结构的抗菌类化合物。
技术实现思路
本专利技术的专利技术人创造性地将抗菌肽与五环三萜类化合物相结合，设计出了全新结构的缀合物，经活性筛选发现，新化合物具有优异的抗菌活性，最低抑菌浓度甚至能够达到几个μM水平。由此提供了下述专利技术：本专利技术的一个方面提供了式(I)所示的五环三萜-肽缀合物或其药学上可接受的盐，XA-L-P(I)其中，XA为五环三萜类化合物或其酯化衍生物；P为多肽，其长度为2-50个氨基酸，并且含有一个或多个精氨酸和/或赖氨酸；所述多肽的C末端为游离的羧基或者酰胺化；L为连接臂。本专利技术的任一实施方式中，所述多肽中精氨酸和/或赖氨酸的含量为≥50％、≥60％、≥70％、≥80％、≥90％或为100％；具体地，所述精氨酸为L-精氨酸；具体地，所述赖氨酸为L-赖氨酸。本专利技术的任一实施方式中，多肽长度为2－40个氨基酸、2－30个氨基酸、2－20个氨基酸、2－15个氨基酸、2－12个氨基酸、2－10个氨基酸、2个氨基酸、3个氨基酸、4个氨基酸、5个氨基酸、6个氨基酸、7个氨基酸、8个氨基酸、9个氨基酸或者10个氨基酸。在本专利技术的一个实施方案中，所述多肽为抗菌肽。在本专利技术的一个实施方案中，所述多肽为非抗菌肽。本专利技术的任一实施方式中，L为叠氮乙酸；具体地，叠氮乙酸通过羧基与多肽N末端的α-氨基缩合连接，叠氮乙酸的叠氮基与XA的炔基通过铜催化的Husigen环加成反应连接。本专利技术的任一实施方式中，所述五环三萜类化合物为桦木酸、齐墩果酸或熊果酸。本专利技术的任一实施方式中，所述酯化衍生物为五环三萜类化合物的酯化衍生物；具体地，酯化位点为五环三萜类化合物的3位羟基和/或28位羧基；更具体地，所述酯化衍生物含有炔基；进一步具体地，桦木酸、齐墩果酸和熊果酸的28位羧基进行酯化反应分别得到含炔基的BAo、OAo和UAo(结构式见下面)，桦木酸、齐墩果酸和熊果酸的3位羟基进行酯化反应分别得到含炔基的BAc、OAc和UAc(结构式见下面)。本专利技术的任一实施方式中，XA选自如下的结构式：本专利技术的具体的实施方式中，其选自如下的缀合物或其药学上可接受的盐：(1)BAc-L-R；(2)OAc-L-R；(3)UAc-L-R；(4)BAo-L-R；(5)OAo-L-R；(6)UAo-L-R；(7)BAc-L-RR；(8)OAc-L-RR；(9)UAc-L-RR；(10)BAo-L-RR；(11)OAo-L-RR；(12)UAo-L-RR；(13)BAc-L-RRR；(14)OAc-L-RRR；(15)UAc-L-RRR；(16)BAo-L-RRR；(17)OAo-L-RRR；(18)UAo-L-RRR；(19)BAc-L-RRRRRR；(20)OAc-L-RRRRRR；(21)UAc-L-RRRRRR；(22)BAo-L-RRRRRR；(23)OAo-L-RRRRRR；(24)UAo-L-RRRRRR；(25)BAc-L-RRRRRRRR；(26)OAc-L-RRRRRRRR；(27)UAc-L-RRRRRRRR；(28)BAo-L-RRRRRRRR；(29)OAo-L-RRRRRRRR；(30)UAo-L-RRRRRRRR；其中，L为叠氮乙酸，R表示L-精氨酸。上面的缀合物中，RRRRRR表示为SEQIDNO：1，RRRRRRRR表示为SEQIDNO：2。本专利技术的另一方面提供了一种药物组合物，包含上面任一项所述的五环三萜-肽缀合物和/或其药学上可接受的盐；任选地，其还包含药学上可接受的辅料。本专利技术另一方面提供了所述五环三萜-肽缀合物的制备方法，包括下述步骤：将五环三萜类化合物的酯化衍生物与多肽-叠氮乙酸修饰物在亚铜离子催化下经Husigen环加成反应，得到终产物；其中，所述五环三萜类化合物的酯化衍生物由五环三萜类化合物进行酯化反应制得；所述多肽-叠氮乙酸修饰物由叠氮乙酸通过羧基与多肽N末端的α-氨基缩合连接制得。不拘于理论的限制，五环三萜类化合物的环内/外都具有双键。采用一般意义上的固相合成法将五环三萜类化合物或以氨基烷酸作连接臂的五环三萜类化合物与肽树脂直接反应时，酸裂解(TFA)条件下五环三萜的双键将移位或者成环，无法形成五环三萜-肽缀合物。而且五环三萜类化合物也无法直接与裂解后的肽树脂进行连接。本专利技术任一实施方式中，所述多肽-叠氮乙酸修饰物由如下步骤制得：经Fmoc固相合成得到氨基端裸露的肽树脂，再用叠氮乙酸对裸露的氨基端进行封端；封端后的肽树脂经裂解、纯化得到多肽-叠氮乙酸修饰物。本专利技术任一实施方式中，封端时向氨基端裸露的肽树脂中加入叠氮乙酸、HBTU、HOBT及DIEA，室本文档来自技高网...

【技术保护点】
式(I)所示的五环三萜‑肽缀合物或其药学上可接受的盐，XA‑L‑P(I)其中，XA为五环三萜类化合物或其酯化衍生物；P为多肽，其长度为2‑50个氨基酸，并且含有一个或多个精氨酸和/或赖氨酸；所述多肽的C末端为游离的羧基或者酰胺化；L为连接臂。

【技术特征摘要】
1.式(I)所示的五环三萜-肽缀合物或其药学上可接受的盐，
XA-L-P
(I)
其中，
XA为五环三萜类化合物或其酯化衍生物；
P为多肽，其长度为2-50个氨基酸，并且含有一个或多个精氨酸
和/或赖氨酸；所述多肽的C末端为游离的羧基或者酰胺化；
L为连接臂。
2.根据权利要求1所述的五环三萜-肽缀合物或其药学上可接受
的盐，其特征在于如下的(1)－(7)项中的任意一项或者多项：
(1)所述多肽中精氨酸和/或赖氨酸的含量为≥50％、≥60％、
≥70％、≥80％、≥90％或为100％；
(2)所述精氨酸为L-精氨酸；
(3)所述赖氨酸为L-赖氨酸；
(4)所述多肽的长度为2－40、2－30、2－20、2－15、2－12、
2－10、2、3、4、5、6、7、8、9或者10个氨基酸；
(5)所述五环三萜类化合物为桦木酸、齐墩果酸或熊果酸；
(6)所述酯化衍生物为五环三萜类化合物的酯化衍生物；具体地，
酯化位点为五环三萜类化合物的3位羟基和/或28位羧基；更具体地，
所述酯化衍生物含有炔基；
(7)L为叠氮乙酸；具体地，叠氮乙酸通过羧基与多肽N末端
的α-氨基缩合连接，叠氮乙酸的叠氮基与XA的炔基通过铜催化的
Husigen环加成反应连接。
3.根据权利要求1或2所述的五环三萜-肽缀合物或其药学上可
接受的盐，其中，XA选自如下的结构式：
4.根据权利要求3所述的五环三萜-肽缀合物或其药学上可接受的
盐，其选自如下的缀合物或其药学上可接受的盐：
BAc-L-RR；
OAc-L-RR；
UAc-L-RR；
BAo-L-RR；
OAo-L-RR；
UAo-L-RR；
BAc-L-RRR；
OAc-L-RRR；
UAc-L-RRR；
BAo-L-RRR；
OAo-L-RRR；
UAo-L-RRR；
BAc-L-RRRRRR；
OAc-L-RRRRRR；
UAc-L-RRRRRR；
BAo-L-RRRRRR；
OAo-L-RRRRRR；
UAo-L-RRRRRR；
BAc-L-RRRRRRRR；
OAc-L-RRRRRRRR；
UAc-L-RRRRRRRR；
BAo-L-RRRRRRRR；
OAo-L-RRRRRRRR；
UAo-L-RRRRRRRR；
其中，L为叠氮乙酸，R...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘克良，娜荷芽，李相鹏，王晨宏，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11