地西他滨化合物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及药物分析技术领域，公开了一种新化合物，为地西他滨的一种新杂质。本发明专利技术还公开这一杂质的制备方法、该杂质的检测方法以及应用。本发明专利技术所公开的制备方法操作简单、成本低。检测方法能很好地分离出杂质，重现性好、灵敏度高。本发明专利技术为地西他滨原料和/或制剂的定量及定性分析提供了对照品，提高了地西他滨的质量标准，从而为地西他滨安全用药提供了指导，提高了地西他滨的质量及用药安全。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药物分析
，具体涉及一种新的化合物即地西他滨杂质、应用及其HPLC检测。
技术介绍
地西他滨(Decitabine)是苏伯俭股份有限公司(SuperGen)开发的抗癌药物，是一个非选择性DNA甲基化抑制剂，作为DNA甲基转移酶抑制剂，能阻止DNA中胞嘧啶残基的甲基化。研究发现，地西他滨对急性骨髓细胞白血病(AML)、慢性骨髓细胞白血病(CML)和骨髓增生异常综合症(MDS)具有非常显著的效果。地西他滨的化学名为：4-氨基-1-(2-脱氧-β-D-赤式-戊呋喃糖苷基)-1，3，5-三嗪-2(1H)-酮，别名为5-氮杂-2’-脱氧胞苷，分子式为C8H12N4O4，分子量为228.2，CAS登记号为2353-33-5，结构式如式(I)所示。地西他滨通过化学合成制备得到，在其最终产物中，含有较多的杂质，比如目前在Chem.Res.Toxicol.2009,22,1194–1204第1200页已公开了地西他滨4个杂质，化学名称分别为：N1-2-(2-脱氧-β-D-吡喃核糖)脒基脲苷、N1-2-(2-脱氧-α-D-吡喃核糖)脒基脲苷、N1-2-(2-脱氧-β-D-呋喃核糖)脒基脲苷或N1-2-(2-脱氧-α-D-呋喃核糖)脒基脲苷。中国专利技术专利CN103130855A，公开了地西他滨另一个主要杂质地西他滨α异构体，如式(II)所示，该杂质没有药效活性。另外，中国专利技术专利CN103130855A，还公开了以通式VI表示的地西他滨中间体。但还有一些杂质，还无法分离或制备得到，因而无法进行活性及毒副作用等分析。这些杂质的存在，极大的影响了用药安全，因此急需制备得到。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种新化合物，即地西他滨杂质，分子量为366.07，分子式为C15H15ClN4O5，化学名称为：4-氨基-1-(5-O-对氯苯甲酰-3-羟基-2-脱氧-D-核糖)-1,3,5-三嗪-2(1H)-酮)，结构式如式(III)：地西他滨杂质质谱图如图2，从图2知，地西他滨杂质的分子量为366.07。地西他滨杂质采用常规元素分析方法，分析结果如下表1：表1：元素测定值1(％)测定值2(％)平均值(％)理论值(％)N15.0315.0315.0315.28C49.0649.0849.0749.12H4.044.034.044.12从表1知，地西他滨杂质分子式中C原子、H原子、N原子的理论值与测定值相符合。从附图3知，地西他滨杂质是无水化合物。本专利技术还提供了一种地西他滨杂质的用途，即地西他滨杂质在检测地西他滨原料和/或制剂中的应用。本专利技术的另一个目的是提供一种地西他滨杂质的制备方法，包括如下步骤：1)将4-氨基-1-(3,5-二-O-对氯苯甲酰-2-脱氧-D-核糖在醇氨溶液中，搅拌反应，获得白色混浊液体；2)抽滤、洗涤、干燥获得地西他滨杂质粗品；3)将地西他滨杂质粗品加入甲醇中，加热搅拌溶解，抽滤，干燥，获得地西他滨杂质。其中4-氨基-1-(3,5-二-O-对氯苯甲酰-2-脱氧-D-核糖，结构式如下：其中，4-氨基-1-(3,5-二-O-对氯苯甲酰-2-脱氧-D-核糖可以购买市售产品，也可以参照CN101560232A制备获得。本专利技术制备方法优选方案如下：步骤1)中所述醇氨为甲醇氨、乙醇氨、丙醇氨、异丙醇氨，优选甲醇氨。步骤1)中所述醇氨溶液中氨浓度为10％至饱和浓度，优选醇氨溶液的饱和氨溶液。其中醇氨溶液可以购买市售产品，也可以在-10至0℃时，往无水醇溶液中通氨气，制备含氨浓度为10％至醇氨饱和溶液。步骤1)中所述反应温度为-40℃至10℃，优选-15℃；所述搅拌反应时间为4-12小时，优选8小时。其中反应温度为-40℃至10℃是通过低温溶液循环装置控制温度。步骤1)中所述搅拌反应时间为4-12小时，优选8小时。步骤1)中所述4-氨基-1-(3,5-二-O-对氯苯甲酰-2-脱氧-D-核糖与醇氨溶液重量体积比为1:30-50g/ml，优选1:40g/ml。步骤2)中所述干燥是在45℃干燥6-12小时，优选8小时。步骤3)中所述地西他滨杂质粗品与甲醇重量体积比为1:40-60g/ml,优选1:50g/ml；所述加热搅拌是加热至65-75℃，优选70℃，搅拌20-40min，优选30min；所述干燥是45℃干燥4小时。本专利技术方法中真空干燥的真空度大于0.09Mpa；地西他滨杂质粗品或纯化后地西他滨杂质置于真空烘箱里进行干燥。本专利技术的再一个目的是提供一种地西他滨杂质的HPLC的检测方法，采用VenusilHILIC色谱柱，以乙腈甲酸缓冲液为流动相进行色谱柱分离后，用紫外检测器对地西他滨杂质进行检测。作为优选，所述VenusilHILIC色谱柱型号是250mm*4.6mm*5um；所述乙腈甲酸缓冲液是含0.1％甲酸的乙腈：水体积比为96:4；所述紫外检测器检测波长为220nm。流速：1ml/min；进样量：20ul。其中含0.1％甲酸的乙腈可以购买市售产品，也可以采用1升乙腈加1ml甲酸制备获得。本专利技术带来的有益技术效果如下：1、本专利技术提供了一种地西他滨重要杂质，纯度在99％以上，为地西他滨杂质检测定量及定性分析提供对照品，可用于地西他滨原料和/或制剂中杂质对照定位，定性或定量使用，对地西他滨用药安全具有非常重要的指导意义。2、本专利技术提供的地西他滨杂质制备方法，以获得高纯度的地西他滨杂质，所用试剂如甲醇饱和氨溶液、甲醇，毒性小；制备粗品和纯化均仅需一步，操作简单，成本低、适于绿色工业化大生产。3、本专利技术提供的地西他滨杂质的HPLC的检测方法，采用型号为250mm*4.6mm*5um的VenusilHILIC色谱柱，配合分离效果较好的流动相，能较好地分离杂质，操作简捷，10分钟内出现主峰，30分钟内完成检测，而且重现性好，灵敏度高，从而保证产品质量。附图说明图1为本专利技术实施例1归一化的HPLC谱图。图2为本专利技术实施例1的质谱图。图3为本专利技术实施例1的TGA谱图。具体实施方式本专利技术实施例公开了一种地西他滨杂质及其制备和HPLC检测方法。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种地西他滨杂质，具有如下结构式(III)：

【技术特征摘要】
2015.03.10 CN 20151010355341.一种地西他滨杂质，具有如下结构式(III)：
2.如权1所述的地西他滨杂质在检测地西他滨原料和/或制剂中的应用。
3.权利要求1所述地西他滨杂质的制备方法，包括如下步骤：
1)将4-氨基-1-(3,5-二-O-对氯苯甲酰-2-脱氧-D-核糖在醇氨溶液中，搅
拌反应，获得白色混浊液体；
2)抽滤、洗涤、干燥获得地西他滨杂质粗品；
3)将地西他滨杂质粗品加入甲醇中，加热搅拌溶解，抽滤，干燥，获
得地西他滨杂质。
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中所述醇氨为甲
醇氨、乙醇氨、丙醇氨、异丙醇氨，优选甲醇氨。
5.如权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中所述醇氨
溶液中氨浓度为10％至饱和浓度，优选醇氨溶液的饱和氨溶液。
6.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中所述反应温度
为-40℃至10℃，优选-15℃；所述搅拌反应时间为4-12小时，优选8小时。
7.如权利要求3所述的制备方...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑直，杨建科，金燕芬，李国琴，吴红霞，
申请(专利权)人：杭州华东医药集团新药研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33