本发明专利技术公开了一种吡噻菌胺残留量的GC-MS/MS测定方法，该方法主要用于测定粮谷、动物源性食品等复杂基质食品农产品中残留的吡噻菌胺含量的方法。用乙腈或含1%乙酸的乙腈溶液均质提取样品中残留的吡噻菌胺，C18/PSA固相萃取柱净化浓缩后，气相色谱串联质谱（GC-MS/MS）检测，采用不含待测农药的空白基质溶液建立校正的标准工作曲线，外标法定量。本方法平均回收率为86.4%～95.3%，平均相对标准偏差（RSD）为5.0%～8.7%，检出限低于0.25μg/kg，具有操作简便、快速、去杂效果好、灵敏度高、特征性强、重复性好、定性定量准确的优点。能满足美国、欧盟、日本等国家对相应产品安全检测的技术要求，为保障我国人民食品安全及对外出口贸易健康发展提供有力的技术支撑。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种吡噻菌胺残留量的GC-MS/MS测定方法，更具体地说是采用气相色 谱串联质谱(GC-MS/MS)定性定量测定粮谷、猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉等动物肌肉及制品等复 杂基质的动植物源性食品中残留的吡噻菌胺含量的方法，属于农药残留量的测定技术领 域。
技术介绍
吡噻菌胺(Penthiopyrad)是日本三井化学公司研发的新颖酰胺类杀菌剂，英文通 用名为 penthiopyrad，试验代号：MTF-753，商品名为 Afetofluapro XAS 登录号：183675-82-3,化学名称为(RS)-N--甲基-3-(三氟甲基)-1Η-吡唑-4-甲酰胺，化学结构式为： 吡噻菌胺与现有的羧酰胺类杀菌剂有不同的杀菌谱，除了与现有羧酰胺类杀菌剂 一样对担子菌有效外，其对子囊菌、不完全菌亦有效，现被推荐用于防治对其他杀菌剂具抗 性的灰霉病和白粉病。该药剂通常使用的有效成分剂量为100~200g/hm 2,其被广泛应用于 果树、蔬菜、草坪等众多作物，防治锈病、菌核病、灰霉病、霜霉病、苹果黑星病和白粉病。 Penthiopyrad于2008年在日本获得首次批准，用于果树、蔬菜和观赏植物，后又于2011年11 月在加拿大获准登记。商标名为Vertisan和Fontelis(均以penthiopyrad 200g/L为其活性 成分）和Treoris (penthiopyrad 100g/L+chlorothalonil (百菌清）250g/L)的3个产品主要 用在果树、蔬菜和田间作物上，在实际应用发现吡噻菌胺具有很广阔的应用前景。 随着吡噻菌胺的登记、推广和使用，作为我国主要出口市场的欧盟、加拿大和澳大 利亚等国家制定了其在蔬菜、水果、粮谷和畜产品等食品农产品中的最大允许残留量 (MRL)，加拿大规定吡噻菌胺在果蔬、坚果、粮谷及畜产品等动物源性食品中的MRL为0.01~ 30mg/kg;澳大利亚规定吡噻菌胺在果蔬、坚果、粮谷及畜产品等动物源性食品中的MRL为 0.01~5mg/kg;欧盟规定吡噻菌胺在果蔬、坚果、粮谷及畜产品等动物源性食品中的MRL为 0.01~30mg/kg;欧盟、日本等国家规定若田间使用农药没有在该国家登记，没有制定相应 的残留限量标准时，出口至其国家的食品农产品包括畜禽肉等动物源性食品中残留限量均 实行0.01mg/L的"一律标准"。 现阶段，对吡噻菌胺残留量测定方法的研究较少，报道的检测方法主要为蔬菜和 水果中吡噻菌胺残留检测方法，这些检测方法均采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)测定蔬 菜和水果中吡噻菌胺残留量的检测方法，使用LC-MS/MS测定食品农产品中农药残留具有快 速、简便、灵敏度高等优点，但由于其价格较昂贵，很多检测机构、企业或科研院所未配置该 仪器或配置台数较少，由于不同的化合物采用LC-MS/MS检测时，需使用不同的流动相或色 谱柱，这样需要不断更换色谱柱、流动相并耗费比较长的时间对系统进行平衡，这一定程度 上制约了 LC-MS/MS的应用。使用气相色谱串联质谱(GC-MS/MS)分析食品农产品中农药残留 具有快速、简便、灵敏度高、选择性强等优点，可实现几百种农药的多残留分析，但迄今为止 未见食品农产品中吡噻菌胺残留量的GC-MS/MS检测方法的报道，由于粮谷、动物源性食品 等食品农产品基质比较复杂，须建立净化效果良好的样品前处理方法和仪器分析条件才能 满足检测要求，因此，建立气相色谱串联质谱(GC-MS/MS)定性和定量分析粮谷和动物源性 食品中吡噻菌胺残留量的检测方法具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种吡噻菌胺残留量的GC-MS/MS测定方法，主要用于测定粮 谷、动物源性食品等复杂基质食品农产品中吡噻菌胺残留量。 为实现以上目的，本专利技术所采用的技术方案是：一种吡噻菌胺残留量的GC-MS/MS 测定方法，包括如下步骤： (1)提取 称取混匀样品于具塞离心管中，加入适量水复苏后，定量加入乙腈或含1 %乙酸的乙腈 溶液均质或振荡超声提取，然后加入氯化钠或乙酸钠中的一种和无水硫酸镁，剧烈涡旋 lmin后离心。 (2)净化 移取一定体积样品提取液，浓缩至lmL左右，经C18/PSA固相萃取柱净化，乙腈洗脱，收 集洗脱液，取部分洗脱液浓缩至干后，用体积比为1/1的丙酮/正己烷混合溶剂溶解定容，过 膜后，待气相色谱串联质谱(GC-MS/MS)检测。 (3)标准工作溶液的配制 将不含吡噻菌胺的同种类基质空白样品按上述步骤（1)、（2)处理时，得样品提取净化 残渣，加入适量溶剂和标准溶液，涡旋混匀，配制成至少3个浓度的吡噻菌胺系列标准工作 液。 (4)气相色谱串联质谱法(GC-MS/MS)测定 将步骤(3)中的各浓度梯度的标准工作液进行GC-MS/MS测定，以标准工作液的色谱峰 面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线;在相同条件下将步骤(2)中净化后的 样品液注入GC-MS/MS进行测定，测得样品液中吡噻菌胺的色谱峰面积，代入标准工作曲线， 得到样品液中吡噻菌胺含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品中吡噻菌胺 残留量。若上机溶液中吡噻菌胺残留量超过线性范围上限，需用定容溶剂将上机溶液浓度 稀释至线性范围之内。 步骤(1)中样品若为含水量较少的样品，提取前须加适量水充分浸润。 步骤（1)中采用乙腈提取时加入氯化钠盐析，采用含1%乙酸的乙腈溶液提取时加 入乙酸钠盐析。 步骤(2)中进行C18/PSA固相萃取净化，乙腈洗脱时，洗脱体积为6~8mL。 步骤(4)中气相色谱条件为:色谱柱:HP-5MS毛细管色谱柱，柱长30m，内径0.25mm， 膜厚0.25μπι;进样口温度250°C ;载气：He，不分流模式进样，进样量：lyL;恒流模式，流速 1.2mL/min;升温程序:初温60°C保持2min，以每分钟20°C的速度升至200°C，然后以每分钟2 °C的速度升至220°C，再以每分钟20°C的速度升至280°C，保持lOmin;传输线温度:290°C。 步骤(4)中质谱条件为：电离模式：电子轰击电离(EI，70eV);离子源温度280°C;碰 撞气:氩气;多反应监测扫描方式MRM，监测参数为： 步骤(4)中测定样液和基质标准工作溶液时，若样液中农药色谱峰保留时间与标 准溶液中相应农药保留时间相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选择的离子均 出现，而且离子丰度比与标准溶液的离子丰度比相一致，则可判断样液中存在这种农药;若 上述两个条件不能同时满足，则判断不含该种农药。 本专利技术的有益效果在于： 本专利技术利用分散固相萃取技术，建立了简便、快速并能有效避免样品中基质干扰 的样品前处理方法，将此前处理方法结合GC-MS/MS应用于粮谷、动物源性食品中吡噻菌胺 定性确证和定量检测，平均回收率为86.4%~95.3%，平均相对标准偏差(RSD)为5.0%~ 8.7%，检出限低于0.25yg/kg，具有操作简便、快速、准确、灵敏度高及重复性好的优点。能 满足美国、欧盟、日本等国家对相应产品安全检测的技术要求，为保障我国人民食品安全及 对外出口贸易健康发展提供有力的技术支撑。【附图说明】 图1为添加在空白猪肉基质中的吡噻菌胺标液的GC-MS/本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种吡噻菌胺残留量的GC‑MS/MS测定方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)提取称取混匀样品于具塞离心管中，加适量水后，加入乙腈或含1％乙酸的乙腈溶液均质或振荡超声提取后，加入氯化钠或乙酸钠中的一种和无水硫酸镁，剧烈涡旋1min后离心；(2)净化移取一定体积样品提取液，浓缩至1mL左右，经C18/PSA固相萃取柱净化，乙腈洗脱，收集洗脱液，取部分洗脱液浓缩至干后，用体积比为1/1的丙酮/正己烷混合溶剂溶解定容，过膜后，待气相色谱串联质谱(GC‑MS/MS)检测；(3)标准工作溶液的配制将不含吡噻菌胺的同种类基质空白样品按上述步骤(1)、(2)处理，得样品提取净化残渣，加入适量溶剂和标准溶液，涡旋混匀，配制成至少3个浓度的吡噻菌胺系列标准工作液；(4)测定和结果计算将步骤(3)中的各浓度梯度的标准工作液进行GC‑MS/MS测定，以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到基质标准工作曲线；在相同条件下将步骤(2)中净化后的样品液注入GC‑MS/MS进行测定，测得样品液中吡噻菌胺的色谱峰面积，代入基质标准工作曲线，得到样品液中吡噻菌胺含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品中吡噻菌胺残留量；若上机溶液中吡噻菌胺残留量超过线性范围上限，需用定容溶剂将上机溶液浓度稀释至线性范围之内。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：郭庆龙，
申请(专利权)人：郭庆龙，
类型：发明
国别省市：山东;37
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