本发明专利技术涉及用于维持多能干细胞染色体稳定性的组合物，其包含小分子化合物，且更具体地，涉及用于维持诱导的多能干细胞的染色体稳定性的组合物，其包含能够在诱导的多能干细胞的诱导和所述细胞后续培养过程中抑制染色体结构和数目突变或DNA损伤的ROCK抑制剂、MEK抑制剂、ALK5抑制剂或抗氧化剂。所述用于维持诱导的多能干细胞的染色体稳定性的包含小分子化合物的组合物在诱导的多能干细胞产生过程中增加重编程速率和效率并展示对染色体结构和数目突变或DNA损伤出色的抑制效果。因此，本发明专利技术的组合物对具有出色染色体稳定性的诱导的多能干细胞治疗剂的开发非常有用。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于维持多能干细胞的染色体稳定性的组合物，其包含小分子化合物，且更具体地，涉及用于维持诱导的多能干细胞的染色体稳定性的组合物，其包含能够在诱导的多能干细胞的诱导和所述细胞后续培养过程中抑制染色体结构和数目突变或DNA损伤的ROCK抑制剂、MEK抑制剂、ALK5抑制剂或抗氧化剂。技术背景用于产生诱导的多能干细胞的技术是使用动物体细胞制备与胚胎干细胞相似的细胞的技术，且包括在特定培养条件下于四种已知的重编程因子(0ct4、Klf4、Sox2和cMyc)存在下培养细胞。通过该方法制备的诱导的多能干细胞具有分化成为所有组织特异性细胞的优势，并可用作不构成任何伦理问题的细胞治疗剂，但这些诱导的多能干细胞具有的劣势在于它们以低效率产生，它们的安全性难以保证且与胚胎干细胞并不完全相似。自2006诱导的多能干细胞技术开发以来，已实施对于该技术的许多研究，且由这些研究获得的多种组合物已用于增加产生诱导的多能干细胞的效率。作为结果，23篇文章已报道使用特定的组合物成功增加诱导的多能干细胞的产生效率，且6篇文章已报道即使在一种或多种重编程因子不存在下也可成功产生诱导的多能干细胞。至今，已实施研究来主要增加产生诱导的多能干细胞的效率。然而，当仅诱导的多能干细胞的产生效率增加而诱导的多能干细胞的安全性确认不足时，看起来诱导的多能干细胞并非是临床上可应用的。因此，为增加诱导的多能干细胞的临床应用性，需要致力于增加诱导的多能干细胞安全性的研究，且应该开发制备与胚胎干细胞更相似的诱导的多能干细胞的方法。在与本专利技术相关的现有技术中，韩国专利注册号10-1211610(2012年12月6日)公开了通过使用Bmil、MEK抑制剂和GSK抑制剂诱导从体细胞至胚胎干细胞样细胞的反分化(dedifferentiat1n)的组合物，和使用所述组合物用于产生胚胎干细胞样细胞的方法。韩国专利注册号10-1211624(2012年12月6日)公开了通过使用Shh、FGFR酪氨酸激酶抑制剂、MEK抑制剂和GSK抑制剂诱导从体细胞至胚胎干细胞样细胞的反分化的组合物，和使用所述组合物用于产生胚胎干细胞样细胞的方法。此外，韩国专利公开号10-2010-0101764(2010年9月20日)、韩国专利公开号10-2011-0094348(2011年8月23日)、韩国专利公开号10-2012-0094488(2012年8月24日)和韩国专利公开号10-2012-0121084(2012年11月5日)公开了用于产生和维持多能干细胞的有用培养方法和培养基等。与本专利技术的领域相关的数篇文章已报导使用组合物处理增加诱导的多能干细胞产生的效率，但此使用组合物的处理是否可抑制诱导的多能干细胞的突变尚不知晓。具体地，未报导包含MEK抑制剂、ALK5抑制剂、ROCK抑制剂或抗氧化剂的组合物的使用可抑制突变或DNA损伤，后者为在诱导的多能干细胞产生中发生的问题，因而可提供稳定的诱导的多能干细胞。因此，本专利技术发现了包含ROCK抑制剂thiazovivin、MEK抑制剂TO0325901、ALK5抑制剂SB431542或抗氧化剂L-抗坏血酸的组合物通过抑制诱导的多能干细胞中的结构突变和数目突变或DNA损伤维持染色体稳定性，由此完成本专利技术。现有技术文献专利文件专利文件1:韩国专利注册号10-1211610(2012年12月6日) 专利文件2:韩国专利注册号10-1211624(2012年12月6日)专利文件3:韩国专利公开号(2010年9月20日)专利文件4:韩国专利公开号10-2011-0094348(2011年8月23日)专利文件5:韩国专利公开号10-2012-0094488(2012年8月24日)专利文件6:韩国专利公开号10-2012-0121084(2012年11月5日)非专利文件非专利文件1: Li, W.,Vei,V.,Zhu,S.,ZhuJ.，Shi，Y.,Lin,T.,Hao,E.,Hayek1A.，Deng，H.，和Ding,S.(2009a).Generat1n of rat and human induced pluripotent stemcells by combining genetic reprogramming and chemical inhibitors.Cell StemCell 4,16-19.非专利文件2: Li，W.，Zhou，Η.,Abujarour，R.，Zhu, S.,Young Joo , J.,Lin,T.,Hao,E.,Scholer,H.R.,Hayek，A.和Ding,S.(2009b).Generat1n of human-1nducedpluripotent stem cells in the absence of exogenous Sox2.Stem Cells 27,2992—3000.Non-专利文件3: Lin，T., Ambasudhan , R., Yuan , X.,Li , ff.，Hilcove，S.,Abujarour，R.，Lin，X.，Hahm，H.S.，Hao，E.，Hayek，A.等(2009).A chemical platform forimproved induct1n of human iPSCs.Nat Methods 6,805-808.Non-专利文件 4:Yuan，X.,ffan,H.，Zhao，X.，Zhu，S.，Zhou，Q.和Ding，S.(2011).Combined Chemical Treatment Enables 0ct4-1nduced Reprogramming from MouseEmbryonic Fibroblasts.Stem Cells. Non-专利文件5:Zhu,S.,Li ,ff.,Zhou,H.,Wei ,ff.,Ambasudhan，R.,Lin，T.,Kim,J.,Zhang，K.和Ding，S.(2010).Reprogramming of human primary somatic cells by0CT4and chemical compounds.Cell Stem Cell 7,651-655.
技术实现思路
本专利技术的目的是提供用于维持诱导的多能干细胞的染色体稳定性的组合物，其包含至少一种选自下组的小分子化合物作为活性成分:ROCK抑制剂、MEK抑制剂、ALK5抑制剂和抗氧化剂。本专利技术的另一目的是提供用于维持诱导的多能干细胞的染色体稳定性的方法，所述方法包括用上文所述的组合物处理诱导的多能干细胞，和用于培养诱导的多能干细胞的方法，所述方法包括用上文所述的组合物培养诱导的多能干细胞。附图简述图1a示意性显示在用于产生诱导的多能干细胞的方法中使用的整体实验方案。图1b描绘了显示用包含小分子组合物的组合物处理和不用所述组合物处理提供具有典型形态学的诱导的多能干细胞的照片。图1c是显示用包含小分子化合物的组合物处理的诱导的多能干细胞和未用所述组合处理的诱导的多能干细胞之间重编程效率和速率的比较的图。图2a和2b是显示实施的RT-PCR和荧光染色分析以分析用包含小分子化合物的组合物处理的诱导的多能干细胞本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于维持诱导的多能干细胞的染色体稳定性的组合物，其包含至少一种选自下组的小分子化合物作为活性成分：ROCK抑制剂、MEK抑制剂、ALK5抑制剂和抗氧化剂。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：洪性会，朴恒洙，黄仁植，崔京雅，
申请(专利权)人：高丽大学校产学协力团，
类型：发明
国别省市：韩国;KR
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。