一种生物光敏剂制造技术

本发明专利技术的目的是提供一种生物光敏剂，即一种强穿透性和高靶向性的新型生物光敏剂.本发明专利技术将酞菁二氯化钛和透明质酸以合适的负载顺序和高效的结合方式对纳米颗粒进行修饰，修饰后的上转换纳米颗粒有高的单线态氧的产率，和对过量表达CD44蛋白的细胞的特异性识别的高靶向功能。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于光敏试剂制备
，具体涉及一种生物光敏剂。
技术介绍
在目前生物光敏剂制备领域中当前存在的问题主要包括负载的光敏剂与纳米颗粒之间的能量转换效率低，因此生物光敏剂的单线态氧的产率低。重要的原因是与纳米颗粒负载的光敏剂本身的特性有关，一般的光敏剂吸收光子之后，与氧分子之间的能量交换率低，产生的单线态氧量少。一般的生物光敏剂对作用对象都没有特定的靶向。无靶向的生物光敏剂，由于对癌细胞没有特异性识别的功能，同样也会攻击正常组织细胞，这样会极大的增加了光动力治疗的副作用。同时，生物光敏剂只有进入到细胞内部，对癌细胞的杀伤力才大，而癌细胞对没有靶向纳米颗粒的吸收率不高。从而导致光动力治疗的效果不佳。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种生物光敏剂，即一种强穿透性和高靶向性的新型生物光敏剂，从而弥补现有技术的不足。本专利技术的生物光敏剂，其制备过程如下:1)在介孔二氧化娃包覆的上转换纳米颗粒(NaYF4:Yb/Er)的表面连接上氨基(-NH2)，获得表面接有氨基(-nh2)的纳米颗粒；2)将酞菁二氯化钛浸入到表面接有氨基(-NH2)的纳米颗粒的介孔二氧化硅层中；获得负载有酞菁二氯化钛的纳米颗粒；3)将负载有光敏剂酞菁二氯化钛的纳米颗粒表面修饰透明质酸完成制备。上述制备过程，其一种具体过程如下:1)将介孔二氧化硅包覆的上转换纳米颗粒溶解在甲苯中，再加入APTMS制成混合溶液，混合溶液进行密封常温旋转；旋转结束后离心收集纳米颗粒，用甲苯清洗风干后获得表面接有氨基的纳米颗粒；作为优选，混合溶液中介孔二氧化娃包覆的上转换纳米颗粒的浓度为2-10mg/ml ；作为优选，混合溶液中甲苯和APTMS的体积比为40-60:1 ；2)将酞菁二氯化钛溶于吡啶溶液中，密封溶解后进行离心，取上清液；将表面接有氨基(_nh2)的纳米颗粒浸入上清液中，密闭进行悬浮，然后离心收集纳米颗粒，将颗粒清洗后存放于MES缓冲液中，获得负载有酞菁二氯化钛的纳米颗粒；其中颗粒清洗是用PBS溶液进行的；3)将透明质酸活化后加入MES缓冲液中，并加入步骤2)制备的负载有酞菁二氯化钛的纳米颗粒，溶液密封超声室温旋转进行酰胺化反应制成产品。在MES缓冲液中NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)和EDC(l-(3_ 二甲氨基丙基)_3_乙基碳二亚胺盐酸盐)对透明质酸的作用终浓度为l_3mg/ml。本专利技术将酞菁二氯化钛和透明质酸以合适的负载顺序和高效的结合方式对纳米颗粒进行修饰，修饰后的上转换纳米颗粒有高的单线态氧的产率，和对过量表达CD44蛋白的细胞的特异性识别的高靶向功能。【附图说明】图1:负载酞菁二氯化钛的上转换纳米颗粒单线态氧的产率图。【具体实施方式】下面结合实施例对本专利技术进行详细的描述。实施例1:生物光敏剂的制备1)介孔二氧化娃包覆的上转换纳米颗粒(NaYF4:Yb/Er)表面连接氨基:称取15mg介孔二氧化娃包覆的上转换纳米颗粒(NaYF4:Yb/Er)，加到装有3ml甲苯溶液的小瓶中，密封常温300rpm旋转6h (旋转速度不宜太快，不超过600rpm)。再加入50ul APTMS (体积比甲苯:APTMS = 60:1)，溶液密封常温旋转24h。旋转结束后，离心收集纳米颗粒，相对离心力为3500g，时间6min。取甲苯溶液3ml，吹打溶液直到颗粒混匀，溶液呈悬池液，再离心收集纳米颗粒，相对离心力为3500g，时间6min，再重复以上步骤，用3ml甲苯清洗一遍，然后放通风橱风干。此时获得表面接有氨基(-NH2)的纳米颗粒。2)纳米颗粒的介孔二氧化硅层负载光敏剂酞菁二氯化钛:称取0.5mg酞菁二氯化钛溶于3ml的吡啶溶液中，密封超声40min (超声池中放冰袋，保证超声过程水温常温)，之后溶液3000rpm离心lOmin，取上清液放于25ml小瓶中，沉淀放通风橱风干后称量质量叫。则上清液中酞菁二氯化钛的浓度是mg/ml ο (酞菁二氯化钛的称量质量1?，溶于吡啶之后，只溶解一部分，此时离心收集不溶解的沉淀，风干后称量m2.我们取用上清液，所以上清液中的酞菁二氯化钛的质量为(m1-ng，浓度 上清液体积V))。将15mg表面接有氨基(_NH2)的纳米颗粒浸入上清液中，密闭瓶口超声40min (超声水温保持不变)后，室温600rpm旋转24h。离心收集纳米颗粒，3000rpm离心lOmin。吸取2ml PBS溶液(0.1M PH7.5)吹打溶液直到颗粒混匀，溶液呈悬浊液，再离心收集纳米颗粒，3000rpm离心lOmin。重复以上步骤，再次用2mlPBS溶液清洗纳米颗粒。最后颗粒存放于2ml MES缓冲液中。获得负载有光敏剂酞菁二氯化钛的纳米颗粒3)介孔二氧化娃包覆的上转换纳米颗粒(NaYF4:Yb/Er)表面修饰透明质酸:称取15mg透明质酸(HA)放入2ml超纯水中活化过夜，再加入2ml MES缓冲液(缓冲液中EDC (4mg/ml)和NHS (4mg/ml))，保证EDC和NHS对透明质酸的作用终浓度都为2mg/ml ο溶液常温600rpm旋转30min。取2ml含有15mg纳米颗粒的MES缓冲液加入上面的溶液中，溶液密封超声40min后，室温旋转300rpm，8h，充分进行酰胺化反应。反应完成后lOOOOrpm离心lOmin离心收集产品，取2ml超纯水吹打溶液直到颗粒混匀，溶液呈悬浊液，离心收集纳米颗粒，lOOOOrpm离心lOmin。重复以上步骤，再次用2ml超纯水清洗纳米颗粒。纳米颗粒清洗2次后完成生物光敏剂的制备。将产品存放于2ml超纯水中，密封4°C保存。1)对本专利技术制备的新型生物光敏剂进行单线态氧产率的检测。单线态氧产率是利用荧光物质ABDA对单线态氧敏感而使其自身的荧光强度降低来检测的。负载不同光敏剂的纳米颗粒单线态氧产率检测结果显示:负载部花青MC540的上转换纳米颗粒的单线态氧产率为20%;负载酞菁锌(ZnPc)的上转换纳米颗粒的单线态氧产率为10%;负载酞菁二氯化钛的上转换纳米颗粒的单线态氧产率为40.7%。本专利技术制备的负载酞菁二氯化钛的上转换纳米颗粒单线态氧的产率与之前的相比有了大大的提高(图1)。2)利用傅立叶红外光谱仪对制备的新型生物光敏剂进行检测，从红外光谱图分析得；3313cm 1处的吸收峰来源于HA的0 - Η伸缩键，2931cm 1处的吸收峰来代表C - Η伸缩键，1637cm 1处的吸收峰代表-CH2shoulder peak,810andlll0,1637cm 1处的吸收峰代表S1-ο-Si伸缩键。综合以上分析透明质酸分子(HA)已经包覆到颗粒的表面。实施例2:生物光敏剂的制备1)介孔二氧化娃包覆的上转换纳米颗粒(NaYF4当前第1页1 2 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种生物光敏剂，其特征在于，所述的生物光敏剂的制备过程如下：1)在介孔二氧化硅包覆的上转换纳米颗粒的表面连接上氨基，获得表面接有氨基的纳米颗粒；2)将酞菁二氯化钛浸入到表面接有氨基的纳米颗粒的介孔二氧化硅层中；获得负载有酞菁二氯化钛的纳米颗粒；3)将负载有光敏剂酞菁二氯化钛的纳米颗粒表面修饰透明质酸完成制备。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：姜磊，燕照霞，刘涵云，杨丽敏，马洪超，
申请(专利权)人：中国石油大学华东，
类型：发明
国别省市：山东;37