用于诊断和治疗癌症的VISTA调节剂制造技术

本公开涉及在有需要的患者中活化免疫反应的组合物和治疗方法。在一个优选实施方案中，任选地与第二检查点通路的拮抗剂如PD-1组合，所述主题方法和组合物能够拮抗VISTA的活性，所述VISTA是一种有助于免疫耐受性的天然存在的“检查点”蛋白。例如，这些方法和组合物可以适用于预防和治疗结肠癌或另一种癌症。本文中显示示例性VISTA拮抗剂，具体来说是抗VISTA抗体，会体外和体内活化针对癌细胞的免疫反应，从而赋予减小肿瘤负荷的保护性抗肿瘤免疫性。另外，当VISTA拮抗剂与第二检查点蛋白拮抗剂，具体来说是针对PD-1配体(PD-L1)的抗体组合使用时观测到附加益处。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于诊断和治疗癌症的VISTA调节剂相关申请公开本申请要求2012年9月7日提交的美国临时申请61/698,003的优先权。另外，本申请涉及2012年6月22日提交的标题为“VISTA-IGFORTREATMENTOFAUTOIMMUNEDISORDERSANDINFLAMMATORYDISORDERS”的美国临时申请61/663,431(代理卷号76799.000600)和2012年6月25日提交的标题为“VISTA-IGFORTREATMENTOFAUTOIMMUNEDISORDERSANDINFLAMMATORYDISORDERS”的美国临时申请61/663,969(代理卷号76799.000600)。所有前述专利申请由此都以引用的方式整体并入。
本公开涉及用于在有需要的患者中活化免疫反应的组合物和治疗方法。在一个优选实施方案中，任选地与第二检查点通路的拮抗剂如PD-1组合，主题方法和组合物能够拮抗VISTA的活性，所述VISTA是一种有助于免疫耐受性的天然存在的“检查点”蛋白。例如，这些方法和组合物可以适用于预防和治疗结肠癌，或另一种癌症。本文中显示一种示例性VISTA拮抗剂，具体来说是一种抗VISTA抗体会体外和体内活化针对癌细胞的免疫反应，从而赋予减小肿瘤负荷的保护性抗肿瘤免疫性。另外，当VISTA拮抗剂与第二检查点蛋白拮抗剂，具体来说是针对PD-1配体(PD-L1)的抗体组合使用时观测到附加益处。另一方面，本公开涉及诊断方法，其包括测量VISTA的表达水平以诊断由免疫耐受性所介导的疾病。例如，在患者样本中检测到高的VISTA表达水平(例如VISTA蛋白或mRNA)可以表示存在癌症。另外，这些诊断性测试可以用于对患者指定治疗，例如通过基于对患者样本中高的VISTA表达水平的检测而施用VISTA拮抗剂来实现。背景通过多个检查点，包括CTLA-4、PD-L1/PD-1和B7-H4通路来调控针对外来病原体和癌症的免疫反应。其用作多种免疫抑制细胞(包括Treg、骨髓源性抑制因子(MDSC)和致耐受性DC)的“效应分子”，以减损肿瘤特异性T细胞反应。CTLA-4在T细胞上在活化时得到诱导，并且组成性表达在Foxp3+CD4+CD25+天然Treg(nTreg)上。CTLA-4关键性地调控周边耐受性、抑制T细胞反应并且促进Treg介导性免疫抑制(参考文献6-10)。当与细胞疫苗组合的抗体介导性CTLA-4阻断诱导确立的免疫原性差的B16黑素瘤消退时，CTLA-4在抑制肿瘤特异性免疫方面显示重要作用(11)。已经批准伊匹单抗(Ipilimumab)，即人aCTLA-4mAb用于治疗晚期黑素瘤，但是在转移性黑素瘤中的存活反应是适度的(12)。还已经针对其它癌症对其进行了早期试验(13)。然而，与CTLA-4敲除(KO)小鼠中的严重自体免疫性表型一致，aCTLA-4疗法与患者严重的自体免疫性毒性相关(14)。程序化死亡-1(PD-1)和其配体PD-L1呈递另一免疫检查点通路(参考文献15、16)。PD-1KO小鼠会产生自体免疫疾病(参考文献17、18)。在癌症中，异常PD-L1表达见于肿瘤细胞，其与癌症患者的不良预后相关(参考文献19、20)。PD-L1/PD-1轴通过诱导T细胞凋亡、无变应性、对细胞毒性T细胞介导性溶解的抗性、功能耗尽和产生IL10来下调肿瘤特异性免疫(参考文献21-23)。我们和其它人先前证明了在DC上的PD-L1表达会促进Foxp3+适应性Treg(aTreg)的诱导，并且PD-L1是TME内的aTreg的强力诱导物(2)。阻断PD-L1/PD-1通路结合以其它免疫疗法如CTLA-4阻断会抑制肿瘤进展(参考文献24-29)。MDX-1106，即人aPD-1MAb已经进入临床试验，其显示出有前途的抗肿瘤作用，并且与伊匹单抗(Ipilumimab)相比毒性较小(30)。B7-H4是B7抑制性配体家族的较新的一个成员(参考文献31-33)。在许多人癌症中检测到B7-H4表达。在人卵巢癌中，在肿瘤相关巨噬细胞(TAM)上诱导了B7-H4表达，并且B7-H4的阻断恢复了肿瘤特异性T细胞反应并且有助于肿瘤消退(34)。人Treg还通过APC产生的IL10上调B7-H4表达而向APC传达抑制活性(35)。综上所述，免疫检查点的阻断会提高内源性和疫苗引发性抗肿瘤免疫反应两者，但在临床试验中仅产生有限的反应。Foxp3+CD4+CD25+调控性T细胞(Treg)在正常生理条件下维持周边耐受性方面，以及在癌症中抑制抗肿瘤免疫反应方面是重要的(36-38)。在人卵巢癌中，Foxp3+Treg大量浸润与存活率降低相关(39)。全身性除去Treg或者使其功能衰减会增强天然和疫苗诱导性抗肿瘤T细胞反应，从而产生提高的治疗功效(37、40)。由IDO+浆细胞样DC活化的Treg会以PD-L1依赖性方式上调目标DC上的B7-H1表达并且抑制T细胞反应(41)。单核细胞是组织巨噬细胞和单核细胞源性DC(mo-DC)的前体，其对先天免疫性和适应免疫性两者都起到重要作用(42-46)。将鼠类单核细胞鉴别为CD115+CD11b+F4/80+(47)，其由以下两个子集组成：LY6C+CX3CR1int和LY6C-CX3CR1hi(48、49)。人对应物分别是CD14+CD16-CCR2+CX3CR1int和CD14loCD16+CX3CR1hi单核细胞。将鼠类Ly6C+炎症性单核细胞(IMC)募集到炎症部位并且分化成M1巨噬细胞和炎症性mo-DC，其会产生高水平的TNF/iNOS(TipDC)并且对于微生物清除是重要(43、50-53)。相比之下，驻留型LY6Cneg单核细胞以稳态巡视血管，并且在感染和炎症期间分化成M2类巨噬细胞(46)。IMC关键性地影响着适应性免疫反应。对于人，TLR诱导单核细胞分化成巨噬细胞和mo-DC，其为最优T细胞反应所需(54、55)。在小鼠模型中，单核细胞源性M1巨噬细胞和mo-DC对于通过产生炎症性细胞因子如IL-12来诱导T细胞针对微生物感染或接种的免疫性是必需的，并且引导T细胞初免(56-58)。在有肿瘤的小鼠和癌症患者中，IMC会异常扩增并且有助于骨髓源性抑制细胞(MDSC)的单核子集(59-61)。将MDSC一起标记为CD11b+Gr1+，其由单核(Ly6G+/-LY6C-hi)和粒细胞(Ly6G+LY6C低)子集组成(62)。MDSC会抑制T细胞反应并且阻碍癌症免疫疗法的功效(60、62-64)。消除MDSC或中和其活性或者诱导其分化的策略已经在癌症免疫疗法中显示功效(60、63)。大部分肿瘤相关的DC是单核细胞源性DC。其在抗原呈递方面典型地具有缺陷，缺乏共刺激分子并且会上调抑制分子，如PD-L1(29、65、66)。因此，这些mo-DC不会有效地启动T细胞反应，从而产生缺失性耐受性，或者诱导功能上惰性的T细胞，和甚至Treg扩增和诱导(40、60、62、63、67、68)。通过PD-L1阻断、CD40/TLR刺激或免疫毒素介导性耗尽对肿瘤DC进行治疗性靶向会明显增加肿瘤特异性T细胞反应并且提高存活率(29、69-74)。我们最近已经发现一种新型的免疫球蛋白本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗患有将受益于免疫反应上调的病状的受试者的方法，所述方法包括施用VISTA拮抗剂，从而抑制免疫反应的VISTA介导性抑制，以治疗将受益于免疫反应上调的病状。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.09.07 US 61/698,003;2013.06.21 US PCT/US2013/1.抗VISTA抗体和抗PD-L1抗体组合用于制备用于治疗具有癌症的受试者的试剂的用途。2.如权利要求1所述的用途，其中所述癌症是结肠直肠癌。3.如权利要求1所述的用途，其中所述癌症是肉瘤、黑素瘤、淋巴瘤、白血病、神经母细胞瘤或恶性肿瘤。4.如权利要求1-3中任一项所述的用途，其中所述试剂进一步包含药学上可接受的载体。5.如权利要求1所述的用途，其中所述癌症是棘皮瘤、腺泡细胞癌、听神经瘤、肢端雀斑样痣黑素瘤、肢端汗腺瘤、急性嗜酸粒细胞性白血病、急性淋巴母细胞性白血病、急性巨核母细胞白血病、急性单核细胞性白血病、急性髓母细胞性白血病伴成熟、急性骨髓树突细胞白血病、急性骨髓白血病、急性早幼粒细胞白血病、釉质瘤、腺癌、腺样囊性癌、腺瘤样牙原性肿瘤、肾上腺皮质癌、成人T细胞白血病、侵袭性NK细胞白血病、AIDS相关癌症、肺泡样软组织肉瘤、釉母细胞纤维瘤、肛门癌、多形性大细胞淋巴瘤、多形性甲状腺癌、血管免疫母细胞T细胞淋巴瘤、血管肌脂瘤、血管肉瘤(angiosarcoma)、阑尾癌、星形细胞瘤、非典型畸胎瘤横纹肌样肿瘤、基底细胞癌、基底细胞样恶性肿瘤、B细胞白血病、贝利尼管恶性肿瘤、胆道癌、膀胱癌、胚细胞瘤、骨癌、脑肿瘤、乳癌、布伦纳瘤、支气管肿瘤、细支气管肺泡癌、棕色瘤、伯基特氏淋巴瘤、原发部位不明癌症、类癌瘤、原位癌、阴茎癌、原发部位不明恶性肿瘤、癌肉瘤、卡斯尔曼氏病、中枢神经系统胚胎性瘤、宫颈癌、胆管癌、软骨瘤、软骨肉瘤、脊索瘤、绒毛膜癌、脉络丛乳头状瘤、慢性淋巴细胞性白血病、慢性单核细胞性白血病、慢性骨髓性白血病、慢性骨髓增殖性病症、慢性中性粒细胞白血病、透明细胞瘤、结肠癌、结肠直肠癌、颅咽管瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、德戈斯病、隆凸性皮肤纤维肉瘤、皮样囊肿、促结缔组织增殖小圆细胞肿瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、胚胎发育不良性神经上皮肿瘤、胚胎癌、内胚层窦瘤、子宫内膜癌、子宫内膜子宫癌、子宫内膜样肿瘤、肠病相关T细胞淋巴瘤、成室管膜细胞瘤、室管膜瘤、上皮样肉瘤、红白血病、食道癌、敏感性神经胚细胞瘤、尤文氏家族肿瘤、尤文氏家族肉瘤、颅外生殖细胞肿瘤、性腺外生殖细胞肿瘤、乳腺外佩吉特氏病、输卵管癌、胎内胎、纤维瘤、纤维肉瘤、滤泡性淋巴瘤、滤泡性甲状腺癌、胆囊癌、节细胞神经瘤、胃淋巴瘤、胃肠癌、胃肠类癌肿瘤、胃肠间质瘤、生殖细胞肿瘤、胚组织瘤、妊娠性绒毛膜癌、妊娠性滋养母细胞肿瘤、骨巨细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、神经胶质瘤、血管...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·J·诺埃勒，
申请(专利权)人：达特茅斯大学理事会，伦敦国王学院，
类型：发明
国别省市：美国;US