本发明专利技术涉及一种截短侧耳素废菌渣资源化综合利用的方法，包括：取含水量2％以下的截短侧耳素废菌渣，加水，静置15min，加入4mol/L的磷酸调pH值为5.0-6.0，得菌渣液；向菌渣液中加入复合酶，30℃酶解60-90min，过滤，滤液为蛋白营养液；取菌种，菌种分类命名斜盖伞，拉丁文学名为clitopilus prunulus，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期2012年5月8日，保藏编号CGMCC No.6093，菌种接种到种子培养基中培养，种子培养基pH值为6.15-6.25，通气量为1.0-1.1vvm，转速为200-250rpm，将培养好的菌种接种至发酵培养基中，菌种的接种量占菌种和发酵培养基总质量的8％-10％，24.5-26.5℃培养270-300h，发酵培养基pH值为8.15-8.25，通气量为0.6-1.3vvm，转速为70-115rpm，得发酵液。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术设及，属于资源循环利用领 域。
技术介绍
截短侧耳素废菌渣是截短侧耳素发酵后剩余的残渣，主要包括菌丝体、剩余培养 基、无机盐、代谢产物和少量截短侧耳素等。经检测废菌渣中富含蛋白质，含量可达20%左 右，除蛋白质外，菌渣还含有比较丰富的多糖、脂肪、淀粉、纤维素等物质。按照国家危险废 物目录规定：截短侧耳素发酵产生的废菌渣，属于危险废物，代码HW-02。按照规定危险废 物的处理需交有资质的正规单位进行处理，每吨处理费用在3000元左右，处理成本较高。 目前各企业将废菌渣干燥封存，运样既增加了占地面积，又增加了二次污染的可能，成本大 大提高；也有企业将废菌渣外卖给其他私企，将菌渣进行干燥加工、堆肥发酵，做成有机肥， 但是运种方法管理混乱；有的私企直接将菌渣做成饲料添加剂，运种做法存在很多安全隐 患。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种截短侧耳素废菌渣资源化综合利用的方 法，本方法能够较高效率的利用截短侧耳素废菌渣中的蛋白质W及其他营养物质，提高了 截短侧耳素的效价，降低了成本，提高了制药企业的经济效益，并解决了环保问题，最终实 现了废菌渣的无害化、资源化利用。 本专利技术所用菌种，分类命名：斜盖伞，拉下文学名clitopilusprunulus，保藏 在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、（化inaGeneralMicrobiological 化ItureCollectionCenter,CGMCC)，地址：北京市朝阳区北辰西路I号院3号中国科学院 微生物研究所，保藏日期2012年5月8日，保藏编号CGMCCNo.6093。 本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：一种截短侧耳素废菌渣资源化综合利 用的方法，包括： 1)称取含水量2%W下的截短侧耳素废菌渣，向截短侧耳素废菌渣中加水，静置 15min，再加入4mol/L的憐酸调整抑值为5. 0-6. 0,得菌渣液； 2)向1)得到的菌渣液中加入复合酶，30°C酶解60-90min，过滤去除未分解的残 渣，滤液为蛋白营养液； 3)取菌种，接种到种子培养基中，接种量为l-2cm2的斜面，25. 5-26. 5°C培养 65-70h，种子培养基的抑值为6. 15-6. 25,通气量为1. 0-1.Ivvm,转速为200-250巧m， 菌种分类命名斜盖伞，拉下文学名为clitopilusprunulus，保藏在中国微生物菌 种保藏管理委员会普通微生物中屯、，保藏日期2012年5月8日，保藏编号CGMCCNo. 6093， 所用种子培养基W原料总重量的百分含量计，由W下原料组成： W11] 葡萄糖4. 5% -5.0%、低溫黄豆饼粉1.0% -1.5%、憐酸二氨钟0.05% -0. 10%、 硫酸儀0.03 % -0.05 %、硝酸巧0.04 % -0.06 %、氯化钢0.005 % -0.009 %、硫酸亚铁 0. 004% -0. 006%、G阳消泡剂 0. 025% -0. 05%、水余量； 4)将3)培养好的菌种接种至发酵培养基中，菌种的接种量占菌种和发酵培养基 总质量的8%-10%，24.5-26.5°(：培养270-30化，发酵培养基的抑值为8.15-8.25，通气量 为0. 6-1. 3vvm，转速为70-115;rpm，得发酵液， 所用发酵培养基W原料总重量的百分含量计，由W下原料组成： 葡萄糖2.5% -3.0%、低溫黄豆饼粉0.5% -0.75%J)制备的蛋白营养液 0.5% -0.75%、硫酸儀 0.03% -0.04%、碳酸巧 0.06% -0.09%、玉米浆 3.0% -3. 5%、生 物氮源粉0. 4% -0. 6%、G阳消泡剂0. 009% -0. 014%、豆油0. 5% -0. 8%、水余量。 在上述技术方案的基础上，本专利技术还可W做如下改进。 进一步，在1)中，所述截短侧耳素废菌渣与水的质量比为1:5。 阳017] 进一步，在1)中，所述复合酶质量占菌渣液质量的0. 01%，所述复合酶由纤维素 酶：木聚糖酶：e-葡聚糖酶按质量比1:1:1组成。 本专利技术的有益效果是： 本专利技术提供，本专利技术利用复合酶酶 解法，从截短侧耳素废菌渣中提取蛋白营养液，并W此部分代替截短侧耳素发酵基础料中 低溫黄豆饼粉进行培养发酵，生产截短侧耳素，提高截短侧耳素的效价。 本专利技术首先采用复合酶对细胞壁进行有效分解使得内部蛋白及其它营养物质暴 露出来，很容易通过水提的方式浸出，然后用水浸提将有用物质溶出，溶液作为基础料代替 低溫黄豆饼粉进行截短侧耳素发酵培养。通过上述的处理大大提高了废菌渣内部营养物质 的利用率，并且部分替代低溫黄豆饼粉提高了截短侧耳素的效价，从而达到废菌渣无害化 处理，节约成本，提高经济效益的目的。【具体实施方式】 W下对本专利技术的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本专利技术，并非用于限 定本专利技术的范围。 本专利技术实施例所用酶的购买厂家及酶活性数据。 纤维素酶，济宁和信生物技术有限公司，酶活性2000u/g 木聚糖酶，济宁和信生物技术有限公司，酶活性50000u/g0 -葡聚糖酶，济宁和信生物技术有限公司，酶活性80000u/g。 生物氮源粉为成都浦发生物科技有限公司生产并市售产品。 低溫黄豆饼粉购买自山东省嘉冠油脂化工有限公司。 玉米浆购自济宁一泉商贸有限公司。 下面实施例和对比例制得的发酵液通过HPLC方法检测效价，具体步骤如下： 色谱条件： 色谱柱：C18, 250mm*4. 6mm，5Jim 流动相：质量浓度0. 27%的憐酸二氨钟：乙腊：无水甲醇体积比为5:4:1 流速：1.0ml/min 柱溫：35°C 检测波长：200nm 齡36] 进样体积：20yL 样品处理方法：用移液管量取5.Oml发酵液于100血容量瓶中，加入无水甲醇 70血，超声50min，冷却至20-30°C后定容至100血，样品用0. 45ym过滤膜过滤，待用。 截短侧耳素标准品购买自郑州大学新药研究开发中屯、，处理方法：精密称量 0. 025g标准品于50ml容量瓶中，用色谱级甲醇溶解定容，混匀，过滤进样。W40] 稀释倍数指样品的稀释倍数，为20倍。 阳OW 实施例1 1)称取含水量2%W下的截短侧耳素废菌渣800g，向截短侧耳素废菌渣中加4Kg 水，静置15min，再加入4mol/L的憐酸调整抑值为5. 0,得菌渣液； 2)向1)得到的菌渣液中加入0.OSg复合酶，所述复合酶由纤维素酶：木聚糖酶： 0 -葡聚糖酶按质量比1:1:1组成，30°C酶解60min，过滤去除未分解的残渣，滤液为蛋白营 养液； 3)取菌种，接种到种子培养基中，接种量为Icm2的斜面，25. 5°C培养65h，种子培 养基的抑值为6. 15,通气量为1.Ovvm,转速为220巧m， 菌种分类命名斜盖伞，拉下文学名为clitopilusprunulus，保藏在中国微生物菌 种保藏管理委员会普通微生物中屯、，保藏日期2012年5月8日，保藏编号CGMCCNo. 6093， 所用种子培养基W原料总重量的百分含量计，由W下原料组成： 葡萄糖4. 5wt%、低溫黄豆饼粉1.Owt%、憐酸二氨钟0. 05wt%、硫酸儀0. 03wt%、 硝酸巧0. 〇4wt本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种截短侧耳素废菌渣资源化综合利用的方法，其特征在于，包括：1)称取含水量2％以下的截短侧耳素废菌渣，向截短侧耳素废菌渣中加水，静置15min，再加入4mol/L的磷酸调整pH值为5.0‑6.0，得菌渣液；2)向1)得到的菌渣液中加入复合酶，30℃酶解60‑90min，过滤去除未分解的残渣，滤液为蛋白营养液；3)取菌种，接种到种子培养基中，接种量为1‑2cm2的斜面，25.5‑26.5℃培养65‑70h，种子培养基的pH值为6.15‑6.25，通气量为1.0‑1.1vvm，转速为200‑250rpm，菌种分类命名斜盖伞，拉丁文学名为clitopilus prunulus，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期2012年5月8日，保藏编号CGMCC No.6093，所用种子培养基以原料总重量的百分含量计，由以下原料组成：葡萄糖4.5％‑5.0％、低温黄豆饼粉1.0％‑1.5％、磷酸二氢钾0.05％‑0.10％、硫酸镁0.03％‑0.05％、硝酸钙0.04％‑0.06％、氯化钠0.005％‑0.009％、硫酸亚铁0.004％‑0.006％、GPE消泡剂0.025％‑0.05％、水余量；4)将3)培养好的菌种接种至发酵培养基中，菌种的接种量占菌种和发酵培养基总质量的8％‑10％，24.5‑26.5℃培养270‑300h，发酵培养基的pH值为8.15‑8.25，通气量为0.6‑1.3vvm，转速为70‑115rpm，得发酵液，所用发酵培养基以原料总重量的百分含量计，由以下原料组成：葡萄糖2.5％‑3.0％、低温黄豆饼粉0.5％‑0.75％、2)制备的蛋白营养液0.5％‑0.75％、硫酸镁0.03％‑0.04％、碳酸钙0.06％‑0.09％、玉米浆3.0％‑3.5％、生物氮源粉0.4％‑0.6％、GPE消泡剂0.009％‑0.014％、豆油0.5％‑0.8％、水余量。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：邱向东，张铜镇，何惠欣，张善飞，王甜，
申请(专利权)人：山东胜利生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37
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