一种量子点免疫层析试纸条及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种量子点免疫层析试纸条及其制备方法，包括：塑料卡壳、吸水纸、样品垫、量子点免疫垫、胶板；所述制备方法通过碳二亚胺盐酸盐活化量子点的羧基，然后偶联抗体，将混合液置于旋转磁力搅拌器上，去上清液，静置过夜；玻璃纤维膜的前处理，用一定量的处理液，均用喷膜，取适量免疫量子点溶液，用0.02mol/L稀释至一定浓度，喷膜干燥；取胶版，铺膜，配置包被样品，包被大板，温育过夜；将吸水纸、样品垫、量子点免疫垫固定在胶板上，采用自动斩切机切成3mm的试纸条，并放入塑料卡壳中，卡盖卡底压紧，最后将做好的试纸卡与吸管干燥剂放入铝箔袋中密封。本发明专利技术的结构简单，操作方便，结果准确，稳定性高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于抗体检测
，尤其涉及。
技术介绍
瘦肉精是一类药物的统称，主要是肾上腺类、β激动剂、β -兴奋剂(β -agonist)，用于治疗支气管哮喘、慢性支气管炎和肺气肿等疾病。瘦肉精学名为盐酸克伦特罗，可治疗人和家畜支气管哮喘。其用量达到治疗量的10倍、连续服药30d，可明显促进动物生长，并增加瘦肉率。如果家畜被喂食了瘦肉精，其多数会沉积在动物的肝脏、肾脏、肺脏等器官中，人食用后会产生严重的不良反应。其如果在人体长期蓄积，对某些疾病患者(高血压、心脏病等)的危险性更大，可能加重病情，甚至导致死亡。量子点是具有纳米尺寸的半导体晶体，拥有许多独特的光学特性，如宽的吸收谱、窄而对称的发射谱，耐漂白、亮度高和荧光寿命长等优点。由于其出色的光物理特性和相对较小的尺寸，可作为荧光探针应用的免疫层析试纸上；对于量子点而言，其最大优点是耐光漂白，有机荧光团在光激发下会发生不可逆装的广致化学反应，最终导致其失去荧光性。在相同的激发光条件下，量子点的光稳定性要比有机染料高几千倍；几乎所有的生物实验都要求实验材料可溶于水，所以要解决量子点的水溶性问题，才能与蛋白偶联，现有检测技术:1.生物荧光染料标记抗体检测技术，主要缺点是生物荧光染料有毒性，不稳定，检测过程复杂，时间在30分钟以上，对操作人员的技能要求非常高。2、ELISA试剂盒检测技术，试剂盒稳定性差，酶促反应对温度、加样、洗板等过程要求很高，不适合现场实验室外检测。3.金标层析检测卡，满足了现场大样本量的快速筛查，但是对于要求有限量要求的物质来说，无法半定量或定量，只能检测有或无的物质。【专利技术内容】本专利技术的目的在于提供，旨在解决现有检测瘦肉精的方法存在的操作复杂，检测时间较长，稳定性差和使用受限的问题。本专利技术是这样实现的，一种量子点免疫层析试纸条，所述量子点免疫层析试纸条包括:塑料卡壳、吸水纸、样品垫、量子点免疫垫、胶板。本专利技术的另一目的在于提供一种量子点免疫层析试纸条的制备方法，所述量子点免疫层析试纸条的制备方法包括以下步骤:步骤一，通过碳二亚胺盐酸盐活化量子点的羧基，然后偶联抗体，将混合液置于旋转磁力搅拌器上，在37°c下反应6小时，静置过夜；步骤二，玻璃纤维膜的前处理，用一定量的处理液，均用喷膜，取适量免疫量子点溶液，用0.02mol/L稀释至一定浓度，喷膜干燥；步骤三，取胶版，铺膜，配置包被样品，包被大板，温育过夜；步骤四，将吸水纸、样品垫、量子点免疫垫固定在胶板上，采用自动斩切机切成3_的试纸条，并放入塑料卡壳中，卡盖卡底压紧，最后将做好的试纸卡与吸管干燥剂放入铝箔袋中密封。进一步，所述偶联时量子点、抗体、碳二亚胺盐酸盐的摩尔比为1: 12: 4200，反应体系为0.lmol/L pH7.4的磷酸盐缓冲液。本专利技术提供的量子点免疫层析试纸条及其制备方法，利用量子点作为荧光探针，与免疫层析技术结合起来，利用量子点免疫荧光检测仪，采用检测线上荧光强度的比值作为参数进行定量，实现了对猪尿液中的瘦肉精残留进行定量检测；量子点耐光漂白，有机荧光团在光激发下会发生不可逆装的广致化学反应，最终导致其失去荧光性，在相同的激发光条件下，量子点的光稳定性要比有机染料高几千倍。本专利技术的结构简单，操作方便，结果准确，较好的解决了现有检测瘦肉精的方法存在的操作复杂，检测时间较长，稳定性差和使用受限的问题。【附图说明】图1是本专利技术实施例提供的量子点免疫层析试纸条结构示意图；图中:1、塑料卡壳；2、吸水纸；3、样品垫；4、量子点免疫垫；5、胶板；6、层析膜；图2是本专利技术实施例提供的量子点免疫层析试纸条的制备方法流程图。【具体实施方式】为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。本专利技术利用量子点作为荧光探针，与免疫层析技术结合起来，利用量子点免疫荧光检测仪，采用检测线上荧光强度的比值作为参数进行定量，可以对猪尿液中的瘦肉精残留进行定量检测；本专利技术通过置换量子点表面活性层或在活性层外覆盖附加层，使之带有电荷来调节其水溶性；量子点和抗体的偶联，通过共价链接将抗体非特异性地吸附到量子点的亲水表面上，量子点带负电，带正电的抗体就能吸附到表面上。下面结合附图1对本专利技术的结构作详细的描述:如图1所示，本专利技术实施例的量子点免疫层析试纸条主要包括:塑料卡壳1、吸水纸2、样品垫3、量子点免疫垫4、胶板5、层析膜6 ;设置有塑料卡壳，所述塑料壳的内部设置有吸水纸2、样品垫3、量子点免疫垫4、胶板5、层析膜6 ;吸水纸2、样品垫3、量子点免疫垫4、层析膜6设置在胶板5上，胶板5自左往右依次设置有样品垫3、量子点免疫垫4、层析膜6、吸水纸2。胶板5采用PVC ;层析膜6为NC硝酸纤维素膜，设置有检测线T和质控线C。下面结合附图2对本专利技术的制备方法做详细的说明:如图2所示，本专利技术实施例的量子点免疫层析试纸条的制备方法包括以下步骤:S201:通过碳二亚胺盐酸盐活化量子点的羧基，然后偶联抗体，偶联时量子点、抗体、碳二亚胺盐酸盐的摩尔比为1: 12: 4200，反应体系为0.lmol/L pH7.4的磷酸盐缓冲液，将该混合液置于旋转磁力搅拌器上，在37°C下反应6小时，静置过夜；S202:玻璃纤维膜的前处理，用一定量的处理液，均用喷膜，取适量免疫量子点溶液，用0.02mol/L稀释至一定浓度，喷膜干燥；S203:取胶版，铺膜，配置包被样品，利用设备包被大板，温育过夜；S204:将吸水纸、样品垫、量子点免疫垫固定在胶板上，采用自动斩切机将其切成3mm的试纸条，并将其放入塑料卡壳中，卡盖卡底压紧，最后将做好的试纸卡与吸管干燥剂放入铝箔袋中密封。本专利技术的量子点免疫层析试纸条分别与克伦特罗、莱克多巴胺ELISA试剂盒、金标检测卡，做灵敏度、精密度检测时间对比试验，结果灵敏度比ELISA高10倍，比金标检测卡高50倍以上，精密度< 5%，本产品尤其是在5min、10min、15min检测时，数据结果一致，这更加显示了量子点产品对光的稳定性和对外界环境更好的适应性，而金标、ELISA显然要求更高。以上所述仅为本专利技术的较佳实施例而已，并不用以限制本专利技术，凡在本专利技术的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。【主权项】1.一种量子点免疫层析试纸条，其特征在于，所述量子点免疫层析试纸条设置有塑料卡壳，所述塑料壳的内部设置有吸水纸、样品垫、量子点免疫垫、胶板；所述胶板自左往右依次设置有样品垫、量子点免疫垫、层析膜、吸水纸。2.如权利要求1所述的量子点免疫层析试纸条，其特征在于，所述胶板采用PVC;层析膜为NC硝酸纤维素膜，设置有检测线T和质控线。3.一种量子点免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于，所述量子点免疫层析试纸条的制备方法包括以下步骤: 步骤一，通过碳二亚胺盐酸盐活化量子点的羧基，然后偶联抗体，将混合液置于旋转磁力搅拌器上，在37°C下反应6小时，静置过夜； 步骤二，玻璃纤维膜的前处理，用含有2% BSA、0.1 % Tween20的PBS，处理结合垫，37°C干燥过夜，待用； 步骤三量子点结合垫的制备，取已标记抗体的免疫量子本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种量子点免疫层析试纸条，其特征在于，所述量子点免疫层析试纸条设置有塑料卡壳，所述塑料壳的内部设置有吸水纸、样品垫、量子点免疫垫、胶板；所述胶板自左往右依次设置有样品垫、量子点免疫垫、层析膜、吸水纸。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王兵，李万寿，杨伟，
申请(专利权)人：济南尧泰生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37